Rychlé testování protilátek SARS-CoV-2 IgG u vysoce rizikových zdravotnických pracovníků (COVID-Antibody)

Úspěch Singapuru, Tchaj-wanu a Hongkongu při omezování dopadu náhlého akutního respiračního syndromu coronavirus-2 (SARS-CoV-2), také známý jako COVID-19, byl přisuzován jejich připravenosti, ale především implementaci a distribuci. rychlých diagnostických testů SARS-CoV-2 a zavedení decentralizovaného testování v místě péče (POC) (https://www.nature.com/articles/d41587-020-00010-2). Doposud bylo přední reakcí na vypuknutí SARS-CoV-2 testování polymerázové řetězové reakce (PCR). PCR je zlatým standardem pro diagnostiku infekčního agens a má tu výhodu, že primery potřebné pro takové testy mohou být vyrobeny relativně rychle, jakmile je známa virová sekvence.

První kvantitativní testy PCR založené na reverzní transkriptáze (RT-PCR) pro detekci SARS-CoV2 byly navrženy a distribuovány v lednu Světovou zdravotnickou organizací (WHO), krátce poté, co byl virus identifikován. Zkušební protokol je však složitý a drahý a hodí se hlavně pro velké, centralizované diagnostické laboratoře. Dokončení testů obvykle trvá 4–6 hodin, ale logistický požadavek na odeslání klinických vzorků znamená, že doba obratu je v nejlepším případě 24 hodin. Nový rychlý PCR test (45 minut) od společnosti Cepheid byl schválen Úřadem pro potraviny a léčiva USA 21. března s dostupností na konci měsíce. Rychlé POC testy jsou také potřebné k urychlení klinického rozhodování a odstranění části pracovní zátěže z centralizovaných testovacích laboratoří. A co je nejdůležitější, současný stav ve zdravotnickém systému Indiana University, stejně jako v mnoha po celé zemi, je takový, že zdravotničtí pracovníci, včetně z ER a JIP, nejsou v současné době schopni dostat adekvátní testování prostřednictvím stávajících zařízení. Nejhorší je, že jejich přístup k vhodným osobním ochranným prostředkům (OOP) byl omezen, což zvýšilo riziko jejich expozice a způsobilo značné množství stresu a úzkosti poskytovatelům zdravotní péče v první linii v celé zemi.

Zpět ke zkušenostem ze Singapuru, použili imunotesty, které mohou poskytnout historické informace o virové expozici, stejně jako diagnostické důkazy. Využili rozpoznávání protilátka-antigen, buď pomocí monoklonálních protilátek (mAb) k detekci virových antigenů v klinických vzorcích, nebo pomocí klonovaných virových antigenů k detekci protilátek pacientů namířených proti viru. Formát laterálního průtoku – v podstatě měrka zapouzdřená v kazetě – obsahuje záchytná činidla (buď mAb namířenou na virový antigen nebo virový antigen, který je rozpoznáván protilátkami pacientů) imobilizovaná na definovaných místech na nitrocelulózové membráně. jako značené detektorové mAb, které rozpoznávají stejný cíl. Pozitivní výsledek, který je vyvolán vazbou mezi analytem a záchytnou mAb a vazbou detektorem mAb, je viditelný jako barevná čára. K detekci viru stačí dvě kapky krve z píchnutí špendlíkem. Jsou v podstatě stejné jako domácí těhotenské sady. Některé z těchto testů jsou dostupné v Asii a většina evropských zemí je také používá. V USA vyvinula společnost RayBiotech podobný test využívající znalosti z asijských testů (https://www.raybiotech.com/covid-19-igm-igg-rapid-test-kit/). Tento produkt je označen CE a certifikován pro diagnostické použití v EU. Žádost o povolení FDA pro nouzové použití testů byla podána 16. března 2020. V současné době FDA schválil pouze testování PCR. K 23. březnu 2020 nebyly schváleny žádné testy bočního průtoku. Tento laterální průtokový test však může být v USA legálně používán pro diagnostické použití in vitro jako POC test, pokud je podáván licencovaným lékařem. Tyto soupravy byly vyvinuty interně společností Ray Biotech a validovány pomocí vzorků odebraných v nemocnici pacientům s klinickými příznaky v Guangzhou v Číně (vše potvrzeno pomocí PCR). Současné zásoby 10 000 sad jsou denně doplňovány v RayBiotech se snahou o desetinásobné zvýšení produkce během příštího týdne. Certifikát CE naleznete zde: https://www.raybiotech.com/files/images/CG-COV_CE-Certificates.jpg.

Na základě pozitivních zkušeností ze Singapuru, Tchaj-wanu a Hongkongu a abychom omezili rychlé šíření viru v USA, navrhujeme použít protilátku POC SARS-CoV-2 IgG u vysoce rizikových zdravotnických pracovníků s příznaky nebo bez nich, kteří byli dříve v karanténě. nebo ne. Ve skutečnosti předpokládáme, že výskyt sérokonverze mezi zdravotnickými pracovníky na pohotovosti a na JIP je vysoký a vyšší, než předpovídají současné modely, a že několik případů je asymptomatických nebo s mírnými příznaky.

Testování sérokonverze má dvě další výhody.

1. Ačkoli neexistují žádné oficiální zprávy, jasně slyšíme a vidíme selfie úzkosti, stresu a vyčerpání od našich kolegů v první linii. Pokud tedy zdravotníci vědí, že prodělali sérokonverzi, budou mít větší jistotu, že jsou nyní chráněni a mohou pracovat v bezpečnějších podmínkách, protože se nedávno ukázalo, že u makaků rhesus infikovaných SARS-CoV-2 nemůže dojít k reinfekci https: //www.biorxiv.org/content/10.1101/2020.03.13.990226v1.
2. Zdravotníci představují ideální skupinu dárců pro rekonvalescentní plazmu díky svému nasazení a skutečnosti, že jsou obvykle testováni na odběr krve nebo jsou v současné době dárci krve. FDA právě schválil hlavní protokol pro odběr a podávání rekonvalescentní plazmy: https://www.fda.gov/vaccines-blood-biologics/investigational-new-drug-ind-or-device-exemption-ide-process-cber /investigational-covid-19-convalescent-plasma-emergency-inds

Stručně řečeno, "nemůžete bojovat s ohněm se zavázanýma očima a nemůžeme zastavit tuto pandemii, pokud nevíme, kdo je nakažen." (generální ředitel Světové zdravotnické organizace, 16. března 2020).

Pokud bude úspěšná a ověřená, budeme doufat, že ji rychle rozšíříme, abychom navrhli rychlé testování protilátek IgG proti SARS-CoV-2 obecné populaci, jak se to dělalo v zemích, které neměly téměř žádná úmrtí na COVID-19.