Role nosní dysbiózy u Parkinsonovy choroby (SMELLPARK)

Čichová dysfunkce je častá u Parkinsonovy choroby (PD) a může být přítomna roky předtím, než se objeví motorické symptomy. Časná čichová dysfunkce může být důsledkem environmentálních faktorů působících přes nosní dutinu, jako jsou mikrobiální komunity. Lokální zánět vyvolaný nosní bakteriální dysbiózou (mikrobiota dysbalance) by mohl vést k časným neuronálním dysfunkcím v čichovém systému šířícím se v celém mozku, a tak indukovat motorické, kognitivní a emocionální projevy u PD, v souladu s hypotézou Braakova stádia. Navrhujeme translační projekt zaměřený na zkoumání potenciálního vlivu nosní dysbiózy na patogenezi PD. Nejprve budeme analyzovat jak čich, tak nosní mikroflóru u velké série pacientů s PD a testovat souvislost mezi čichovými deficity a nosní dysbiózou. Poté využijeme možnosti studia dvou populací subjektů s velmi odlišnou expozicí prostředí (v pevninské Francii a Francouzské západní Indii), abychom izolovali abnormality nosní mikroflóry, které by mohly být specifické pro PD. Studie bude provedena na 160 pacientech a 160 zdravých dobrovolnících. Pacienti budou zařazeni do dvou výzkumných pracovišť s různou expozicí prostředí: 1) nemocnice Guadeloupe, Francouzská západní Indie a 2) nemocnice Pitie-Salpetriere, Paříž, Francie. Výběr pacienta bude proveden po konzultaci s lékařem a manželovi bude navrženo, aby se zúčastnil kontroly. Subjekty studie budou zapsány po shromáždění jejich informovaného souhlasu.

Jakmile budou zahrnuty subjekty studie, budou při zařazení najednou provedena následující měření:

• Neurologické vyšetření: Idiopatická PD. Závažnost onemocnění bude hodnocena pomocí Hoehn a Yahr staging. Nemotorické projevy onemocnění budou hodnoceny pomocí škály nemotorických symptomů (NMSS). Závažnost REM poruchy chování bude hodnocena pomocí innsbruckého inventáře REM spánkových poruch chování.
• Čichová funkce: Čichová výkonnost bude měřena pomocí (a) testovací baterie Sniffin' Stick (Burghardt, Wedel, Německo) podle standardizovaného postupu a (b) rozlišovacího testu směsí zápachu vyvinutého výzkumnou jednotkou.
• Globální kognitivní výkonnost a exekutivní funkce: K hodnocení globální kognitivní výkonnosti bude použito Montrealské kognitivní hodnocení (MoCA). Frontal Assessment Battery (FAB) bude sloužit k detekci exekutivní dysfunkce.
• Paměť: Index zpožděného vybavování odstavců z Wechslerovy škály paměti IV-Revidovaný bude použit jako platná, citlivá míra verbální deklarativní paměti a náhradní marker hipokampální funkce.
• Poruchy nálady: Budou použity dva autodotazníky: Snaithova-Hamiltonova škála potěšení k posouzení závažnosti anhedonie a Rychlý inventář depresivní symptomatologie – sebehodnocení pro hodnocení intenzity deprese. Budou také použity dva klinické hodnotící testy závažnosti deprese: Hamiltonova škála hodnocení deprese 17 a MINI.

Na závěr bude proveden odběr vzorků lidské mikrobioty. Subjekty podstoupí čištění nosu z předních nosních dutin po lokální aplikaci epinefrinu se sterilním vločkovým tamponem vloženým a jemně rolovaným kolem vnitřku obou nosních dírek. Výtěry (jeden do každé nosní dírky) budou ihned po odběru umístěny na led a poté před odesláním do výzkumné jednotky (Institut Pasteur), kde budou provedeny analýzy, zmraženy na -80 °C:

• Imunohistochemická analýza: Ve vzorcích nosní tkáně budou analyzovány hladiny Neuroinflammation a aSyn proteinů.
• Analýza mikrobiomu: Mikrobiální složení bude určeno metagenomickým (pan-bakteriálním sekvenováním genu 16S rRNA).