Rola dysbiozy nosa w chorobie Parkinsona (SMELLPARK)

Dysfunkcja węchu jest częsta w chorobie Parkinsona (PD) i może występować na wiele lat przed pojawieniem się objawów ruchowych. Wczesna dysfunkcja węchu może wynikać z czynników środowiskowych działających przez jamę nosową, takich jak społeczności drobnoustrojów. Miejscowy stan zapalny wywołany dysbiozą bakteryjną nosa (nierównowaga mikroflory) może prowadzić do wczesnych dysfunkcji neuronalnych w układzie węchowym rozprzestrzeniających się w całym mózgu, indukując w ten sposób motoryczne, poznawcze i emocjonalne objawy choroby Parkinsona, zgodnie z hipotezą stadium Braaka. Proponujemy translacyjny projekt mający na celu zbadanie potencjalnego wpływu dysbiozy nosa na patogenezę PD. Najpierw przeanalizujemy mikroflorę węchową i nosową w dużej grupie pacjentów z PD i przetestujemy związek między deficytami węchowymi a dysbiozą nosa. Następnie skorzystamy z badania dwóch populacji osób o bardzo różnym narażeniu środowiskowym (we Francji kontynentalnej i francuskich Indiach Zachodnich), aby wyizolować nieprawidłowości mikroflory nosa, które mogą być specyficzne dla PD. Badanie zostanie przeprowadzone na 160 pacjentach i 160 zdrowych ochotnikach. Pacjenci zostaną zapisani do dwóch ośrodków badaczy, których ekspozycja środowiskowa jest różna: 1) Szpital Guadeloupe, Francuskie Indie Zachodnie i 2) Szpital Pitie-Salpetriere, Paryż, Francja. Selekcja pacjentów zostanie przeprowadzona w porozumieniu z lekarzem i zostanie zaproponowany współmałżonkowi do udziału jako kontrole. Osoby objęte badaniem zostaną włączone po uzyskaniu ich świadomej zgody.

Gdy tylko osoby badane zostaną włączone, następujące pomiary zostaną wykonane natychmiast po włączeniu:

• Ocena neurologiczna: idiopatyczne PD. Ciężkość choroby zostanie oceniona przy użyciu stopniowania Hoehna i Yahra. Pozamotoryczne objawy choroby będą oceniane za pomocą Skali Objawów Niemotorycznych (NMSS). Stopień nasilenia zaburzeń zachowania podczas snu REM zostanie oceniony przy użyciu kwestionariusza zaburzeń zachowania podczas snu REM w Innsbrucku.
• Funkcja węchowa: Wydajność węchowa zostanie zmierzona przy użyciu (a) baterii testowej Sniffin' Stick (Burghardt, Wedel, Niemcy) zgodnie ze znormalizowaną procedurą oraz (b) testu rozróżniania mieszanek substancji zapachowych opracowanego przez Jednostkę Badawczą.
• Ogólna wydajność poznawcza i funkcje wykonawcze: Do oceny globalnej wydajności poznawczej zostanie wykorzystana skala Montreal Cognitive Assessment (MoCA). Frontal Assessment Battery (FAB) zostanie wykorzystany do wykrycia dysfunkcji wykonawczych.
• Pamięć: wskaźnik odroczonego przypominania akapitów z IV-poprawionej Skali Pamięci Wechslera zostanie wykorzystany jako ważny, czuły pomiar werbalnej pamięci deklaratywnej i zastępczy wskaźnik funkcji hipokampa.
• Zaburzenia nastroju: zostaną użyte dwa kwestionariusze: skala przyjemności Snaitha-Hamiltona do oceny nasilenia anhedonii oraz kwestionariusz szybkiej samooceny objawów depresyjnych do oceny nasilenia depresji. Zostaną również użyte dwa kliniczne testy oceny nasilenia depresji: skala oceny depresji Hamiltona 17 i MINI.

Na koniec zostanie pobrane próbki ludzkiej mikroflory. Pacjenci będą poddawani szczotkowaniu nosa z przednich nozdrzy po miejscowym podaniu epinefryny za pomocą sterylnego flokowanego wacika wprowadzonego i delikatnie przetoczonego po wewnętrznej stronie obu nozdrzy. Wymazy (po jednym na nozdrze) zostaną umieszczone w lodzie natychmiast po pobraniu, a następnie zamrożone w temperaturze -80°C przed wysyłką do Jednostki Badawczej (Institut Pasteur), gdzie zostaną przeprowadzone analizy:

• Analiza immunohistochemiczna: W próbkach tkanek nosa zostaną przeanalizowane poziomy białek neuroinflammation i aSyn.
• Analiza mikrobiomu: Skład mikroorganizmów zostanie określony metodą metagenomiczną (panbakteryjne sekwencjonowanie genu 16S rRNA).