Papel da Disbiose Nasal na Doença de Parkinson (SMELLPARK)

A disfunção olfatória é frequente na Doença de Parkinson (DP) e pode estar presente anos antes do aparecimento dos sintomas motores. A disfunção olfatória precoce pode resultar de fatores ambientais atuando através da cavidade nasal, como comunidades microbianas. A inflamação local induzida por uma disbiose bacteriana nasal (desequilíbrio da microbiota) poderia levar a disfunções neuronais precoces no sistema olfatório que se propagariam por todo o cérebro, induzindo manifestações motoras, cognitivas e emocionais na DP, de acordo com a hipótese do estágio de Braak. Propomos um projeto translacional com o objetivo de investigar a possível influência da disbiose nasal na patogênese da DP. Primeiro, analisaremos o olfato e a microbiota nasal em uma grande série de pacientes com DP e testaremos a ligação entre déficits olfativos e disbiose nasal. Então, aproveitaremos o estudo de duas populações de indivíduos com uma exposição ambiental muito diferente (na França continental e nas Antilhas Francesas) para isolar as anormalidades da microbiota nasal que podem ser específicas para a DP. O estudo será realizado em 160 pacientes e 160 voluntários saudáveis. Os pacientes serão inscritos em dois locais de investigadores com exposição ambiental diferente: 1) Hospital Guadalupe, Antilhas Francesas e 2) Hospital Pitie-Salpetriere, Paris, França. A seleção do paciente será realizada em consulta com o médico e será proposta a participação do cônjuge como controle. Os sujeitos do estudo serão inscritos após a coleta de seu consentimento informado.

Assim que os sujeitos do estudo forem incluídos, as seguintes medições serão feitas imediatamente na inclusão:

• Avaliação neurológica: DP idiopática. A gravidade da doença será avaliada pelo estadiamento de Hoehn e Yahr. As manifestações não motoras da doença serão avaliadas por meio da Escala de Sintomas Não Motores (NMSS). A gravidade do distúrbio comportamental REM será avaliada usando o inventário de distúrbios comportamentais do sono REM de Innsbruck.
• Função olfativa: O desempenho olfativo será medido usando (a) a bateria de testes Sniffin' Stick (Burghardt, Wedel, Alemanha) seguindo um procedimento padronizado e (b) um teste de discriminação de misturas odoríferas desenvolvido pela Unidade de Pesquisa.
• Desempenho cognitivo global e funções executivas: O Montreal Cognitive Assessment (MoCA) será usado para avaliar o desempenho cognitivo global. A Bateria de Avaliação Frontal (FAB) será utilizada para detectar disfunções executivas.
• Memória: O índice de recuperação de parágrafo atrasado da Escala Wechsler de Memória IV-Revisada será empregado como uma medida válida e sensível da memória declarativa verbal e um marcador substituto da função do hipocampo.
• Perturbações do humor: Serão utilizados dois auto-questionários: a escala de prazer de Snaith-Hamilton para avaliar a gravidade da anedonia, e o inventário rápido de sintomatologia depressiva autoavaliada para avaliar a intensidade da depressão. Dois testes de classificação clínica para a gravidade da depressão também serão usados: a Escala de Avaliação de Depressão de Hamilton 17 e o MINI.

Ao final será realizada amostragem da microbiota humana. Os indivíduos serão submetidos à escovação nasal das narinas anteriores após a aplicação local de epinefrina com um swab flocado estéril inserido e suavemente enrolado no interior de ambas as narinas. Os swabs (um por narina) serão colocados no gelo imediatamente após a coleta e então congelados a -80°C antes do envio para a Unidade de Pesquisa (Institut Pasteur) onde serão realizadas as análises:

• Análise imuno-histoquímica: Os níveis de neuroinflamação e proteínas aSyn serão analisados ​​nas amostras de tecido nasal.
• Análise do microbioma: A composição microbiana será determinada por metagenômica (sequenciamento do gene pan-bacteriano 16S rRNA).