Podpis MoMa během granulomatózy (MOSAR)

„Sarkoidóza je zánětlivé onemocnění charakterizované přítomností srůstajících, těsně seskupených nenekrotizujících granulomů. Diagnóza je založena na třech hlavních kritériích: kompatibilní klinický obraz, přítomnost nekrotizujícího granulomatózního zánětu a vyloučení alternativních granulomatózních onemocnění. V závislosti na umístění granulomatózních lézí, které mohou postihnout jakýkoli orgán, je pozorována široká škála klinických fenotypů, přičemž nejvíce postiženým místem jsou plíce. Sarkoidóza má mnoho podobností s tuberkulózou, u které je tvorba granulomů spouštěna Mycobacterium tuberculosis (M. tb). Tyto fenotypové podobnosti mezi těmito dvěma onemocněními představují mnoho problémů pro diagnostiku, klinickou léčbu a terapii.

Naše chápání faktorů, které přispívají k rozvoji sarkoidózy, tvorbě a udržování granulomů, zůstává omezené. Součástí této výzvy je, že vývoj granulomu může zahrnovat jak environmentální, tak genetické faktory, které přispívají k náboru imunitních buněk k vytvoření granulomu. Imunitní buňky zahrnuté v granulomu zahrnují (1) CD4 Th1 a Th17 T buňky a jejich asociované cytokiny (např. IFNy, TNFa, IL-17, IL-2); a (2) monocyty (Mo) a makrofágy (Ma) včetně prozánětlivých typů M1 a profibrózy M2. Zbývá však určit konkrétní faktory, které přispívají k udržení a vývoji granulomu. Mezi nimi můžeme předpokládat, že na této chronické dysregulované imunitní reakci se podílí trénovaná imunita, perzistence antigenu nebo mikroprostředí. Takto zlepšené pochopení patofyziologie onemocnění může umožnit vývoj nových léčebných postupů, protože v současnosti kortikosteroidy zůstávají hlavním pilířem terapie.

Naší hlavní hypotézou je, že tvorba a udržování granulomů závisí hlavně na nadměrné aktivaci monocytů (Mo) a makrofágů (Ma). Za tímto účelem je cílem studie (i) definovat systémový podpis MoMa u sarkoidózy, (ii) charakterizovat tento podpis in situ na vzorcích tkání a (iii) identifikovat příčinné faktory, které se podílejí na chronické nadměrné aktivaci MoMa. Bude tedy porovnána skupina pacientů se sarkoidózou s pacienty s tuberkulózou. Systémový podpis MoMa bude definován na plné krvi (model TruCulture) a poté in situ různými metodami (multiparametrová spektrální průtoková cytometrie, RNA-seq, Luminex, zobrazovací hmotnostní cytometrie). Epigenom monocytů bude studován díky CUT&Tag. Systémový podpis MoMa bude definován ex vivo v různých časových bodech (M0, M6 a M12) v průběhu onemocnění pomocí fenotypových, transkriptomických, cytokinových a funkčních přístupů. Dříve identifikovaná signatura bude studována in situ a doplněna charakterizací architektury granulomu a interakcí mikroprostředí, které by mohly být modulovány epigenetickými modifikacemi. Proto bude epigenom monocytů analyzován ve dvou skupinách (sarkoidóza a tuberkulóza). Tyto výsledky by umožnily lépe porozumět fyziopatologii sarkoidózy a v neposlední řadě mohou přinést nové terapeutické strategie. Nakonec by studie mohla zpochybnit dogma o vrozené imunitě/autozánětu versus adaptivní imunitě/autoimunitě/paměti."