Lymphknotenverarbeitungsprotokoll für radikale Zystektomie und Beckenlymphknotendissektion bei Blasenkrebs

ZWECK:

Diese Forschung zielt darauf ab, die klinische Bedeutung der Verwendung eines Protokolls zur Fettemulgierung mit dem aktuellen Standard bei der Verarbeitung von Lymphknotenproben nach radikaler Zystektomie und Beckenlymphknotendissektion zu vergleichen.

HYPOTHESE:

Die Forscher gehen davon aus, dass die Verwendung eines fettemulgierenden Protokolls bei der Verarbeitung von Lymphknoten, die zum Zeitpunkt einer radikalen Zystektomie entnommen wurden, den Anteil der Patienten mit Lymphknotenmetastasen im Vergleich zur aktuellen Standardtechnik erhöhen wird.

RECHTFERTIGUNG:

Die wichtigste Säule der Behandlung von muskelinvasivem Blasenkrebs ist die radikale Zystektomie mit Beckenlymphknotendissektion (PLND). Trotz optimaler multimodaler Therapie versterben etwa die Hälfte der Patienten mit invasivem Blasenkrebs an ihrer Erkrankung. Die Bemühungen zur Verbesserung der Patientenergebnisse konzentrierten sich auf zwei Hauptfaktoren: die Durchführung einer präoperativen Chemotherapie und die Angemessenheit der PLND. Während ein PLND letztendlich durch seine anatomische Ausdehnung definiert wird, ist die Anzahl der entfernten Lymphknoten ein beliebtes Ersatzmaß für die Ausdehnung. Über die Beurteilung der Angemessenheit des PLND im Sinne der Versorgungsqualität hinaus ist die genaue Bestimmung des Lymphknotenbefalls von entscheidender Bedeutung für das korrekte Staging des Patienten, das als Leitfaden für die adjuvante Therapie und zur Bestimmung der Prognose des Patienten dient. Die Verarbeitung und Analyse der Lymphknotenproben ist daher in mehrfacher Hinsicht von entscheidender Bedeutung.

Die aktuelle Konvention im Vancouver General Hospital zur Probenhandhabung sieht die Dissektion der Knotenprobe durch einen Labortechniker im Pathologielabor vor. Für die Durchtrennung werden nur tastbare Knoten bearbeitet und das verbleibende Fettgewebe verworfen. Die Anzahl der Knoten wird vom Pathologen bei der Durchsicht der Objektträger anhand einer Kombination aus makroskopischer und mikroskopischer Untersuchung bestimmt. Dieser Prozess ist höchst subjektiv, hängt von der Sorgfalt des Präparators durch den Technologen ab und beschränkt die abschließende Untersuchung auf tastbare Knoten. Bei der Fettemulgierungstechnik wird das gesamte Fett aufgelöst, sodass der Pathologe alle Knoten sichtbar machen und verarbeiten kann. Die Forscher glauben, dass dies zu einer standardisierten und reproduzierbareren Methode bei der Verarbeitung von Lymphknoten führen könnte.

Eine standardisierte und reproduzierbare Methode zur Verarbeitung von Lymphknoten ist Voraussetzung für die Verwendung von Lymphknotenzählungen als Maß für die Qualität der PLND. Und es ist notwendig, den Vergleich der Ergebnisse zwischen den Zentren zu ermöglichen. Darüber hinaus ist eine standardisierte Methodik unerlässlich, um eine angemessene Entnahme von Lymphknoten für die klinische Stadieneinteilung und Prognose sicherzustellen.

ZIELE:

Die Forscher haben eine prospektive Studie entworfen, um unser aktuelles Protokoll zur Verarbeitung von Beckenlymphknoten nach radikaler Zystektomie mit PLND mit einem Protokoll zur Fettemulgierung zu vergleichen. Die Forscher wollen mit diesem Versuch drei Fragen beantworten:

ich. Während die Fettemulgierungstechnik mit ziemlicher Sicherheit mehr Knoten identifizieren wird als die derzeitige Technik der manuellen Dissektion und wahrscheinlich mehr Knotenmetastasen identifizieren wird, besteht das Ziel dieser Studie darin, festzustellen, ob eine sorgfältigere Analyse einen größeren Anteil der Patienten finden wird Lymphknotenmetastasen. Dies führt zu einer besseren Stadieneinteilung und Prognose.

ii. Die aktuelle Technik übersieht wahrscheinlich besonders kleine Lymphknoten, die nicht leicht zu palpieren sind. Die Forscher gehen davon aus, dass es keinen Schwellenwert für die Lymphknotengröße gibt, unterhalb dessen das Risiko einer Metastasierung vernachlässigbar ist, und dass die Identifizierung dieser kleineren Knoten daher klinisch bedeutsam ist.

iii. Die Forscher gehen davon aus, dass ein Protokoll zur Fettemulgierung einen Großteil der Variabilität aufgrund des menschlichen Elements der manuellen Präparation durch den Prosektor beseitigen wird. Obwohl die Forscher diese Hypothese nicht direkt testen werden, glauben sie, dass die Methodik und die fotografische Dokumentation der Ergebnisse einen Grad an Objektivität in dieser Methodik widerspiegeln werden, der bei anderen Techniken nicht zu finden ist.

Das ultimative Ziel dieses Forschungsvorschlags ist die Entwicklung einer standardisierten und reproduzierbaren Technik, die überall eingesetzt werden kann, um die Versorgung unserer Patienten mit invasivem Blasenkrebs zu verbessern.

UNTERSUCHUNGSMETHODE:

Patienten:

Alle Patienten, die sich am Vancouver General Hospital (VGH) einer radikalen Zystektomie mit Beckenlymphknotendissektion unterziehen, werden zur Teilnahme an dieser prospektiven Studie eingeladen. Patienten mit Blasenkrebs im klinischen Stadium T1-4, N0, M0 werden zur Teilnahme an der Studie eingeladen und nach Einholung der Einverständniserklärung aufgenommen.

Operationstechnik:

Das Ausmaß der Lymphknotendissektion wird entweder als konventionell (bis zur Bifurkation der Arteria iliaca communis) oder als ausgedehnt (mindestens bis zur Bifurkation der Aorta) definiert und vom Chirurgen im Einzelfall festgelegt. Auch die Dissektion der präsakralen Lymphknoten obliegt dem Chirurgen. Eine objektive Dokumentation des Ausmaßes der Knotendissektion wird in jedem Fall durch intraoperative Fotografie sichergestellt.

Pathologische Verarbeitung von PLND-Proben:

Jede Probe wird sowohl mit herkömmlichen Mitteln als auch mit einem Fettemulgierprotokoll analysiert. Die aktuelle Konvention im Vancouver General Hospital für den Umgang mit Proben ist oben beschrieben. In dieser Studie zählt der Pathologe die Anzahl der Knoten, die vom Prosektor gemäß diesem aktuellen Protokoll präpariert wurden. Das nach der Entfernung der grob tastbaren Lymphknoten verbleibende Gewebe wird zur Verarbeitung durch das Fettemulgierungsprotokoll vorgelegt, das mit dem von Koren et al. definierten LNRS-Protokoll („Lymph Node Removal Solution“) identisch ist. Dabei wird die gesamte Probe 12 Stunden lang in eine spezielle Lösung gelegt. Die Lösung ist eine Mischung aus 95 % Ethanol, Diethylether, Eisessig und gepuffertem Formalin im Volumenverhältnis 6,5:2:0,5:1 Die so behandelten Proben werden zur objektiven Dokumentation der Knotenzahl fotografiert. Die zusätzlichen Knoten werden dann in Paraffin eingebettet, in Abständen von 2 mm geschnitten und mit Eosin und Hämatoxylin angefärbt. Die Gesamtzahl der Knoten, ihre Größe und das Vorhandensein von Metastasen werden aufgezeichnet.

Datensammlung:

Demografische, klinische und pathologische Informationen werden prospektiv erfasst. Zu den analysierten demografischen Variablen gehören: Alter, Geschlecht, Gewicht, Größe und Rasse. Zu den klinischen Variablen gehören: Datum der Krebsdiagnose, klinisches und pathologisches Stadium bei der Diagnose und zum Zeitpunkt der Operation (TNM-Stadium), Datum der radikalen Zystektomie, Vorgeschichte einer intravesikalen Chemotherapie, andere medizinische Komorbiditäten und frühere Bauchoperationen, Ausmaß des Lymphknotens Dissektion und Komplikationen während des Eingriffs. Pathologische Variablen werden für die Ergebnisse sowohl des konventionellen als auch des fettemulgierenden Protokolls aufgezeichnet. Anzahl, Größe und Vorhandensein von Metastasen für jeden gefundenen Knoten werden aufgezeichnet.

STATISTISCHE ANALYSE:

Ergebnis Maßnahme:

Das primäre Ergebnis wird der Anteil der Patienten sein, bei denen bei der pathologischen Untersuchung Lymphknotenmetastasen festgestellt wurden. Insbesondere wird der Unterschied im Anteil der Proben, bei denen festgestellt wurde, dass sie Knotenmetastasen enthalten, unter Verwendung des Fettemulgierungsprotokolls im Vergleich zur herkömmlichen Lymphknotenverarbeitung analysiert. Sekundäre Ergebnismaße sind: die Gesamtzahl der Lymphknoten und die Gesamtzahl der Lymphknotenmetastasen, die mit beiden Techniken gezählt wurden, sowie die Beziehung zwischen der Größe des Lymphknotens und dem Vorhandensein eines metastasierten Karzinoms.

Berechnung der Stichprobengröße:

Als klinisch bedeutsam wird eine Steigerung der Erkennung von Knotenmetastasen um 15 % (fettemulgierend im Vergleich zur herkömmlichen Verarbeitung) angesehen. Die aktuelle Knotenpositivitätsrate zum Zeitpunkt der radikalen Zystektomie mit PLND bei VGH beträgt 28 %, so dass ein Anstieg auf 43 % als klinisch relevant angesehen werden würde. Um diesen Unterschied mit einer Trennschärfe (1-β) von 80 % und einem α-Fehler von 10 % zu erkennen, müssen 125 Patienten in jeden Studienarm aufgenommen werden.

Datenanalyse:

Die Daten werden mit der SPSS-Software analysiert. Der t-Test für unabhängige Proben wird verwendet, um die Ergebnisse der Lymphknotenanalyse bei herkömmlicher Verarbeitung mit denen derselben Knoten zu vergleichen, die mit dem Fettemulgierprotokoll verarbeitet wurden (p < 0,5). Das Verhältnis der Größe zum Vorliegen einer metastasierenden Erkrankung wird durch ein lineares Regressionsmodell ermittelt (p<0,5). Ein signifikanter Unterschied zwischen den Gruppen wird als p<0,05 definiert. Ein Biostatistiker (Robert Bell) am Vancouver Prostate Centre wird bei der Datenanalyse behilflich sein.

ZUSAMMENFASSUNG

Die Forscher haben die Möglichkeit, mit einfachen und kostengünstigen technischen Maßnahmen einen integralen Bestandteil unserer klinischen Risikostratifizierung bei Patienten mit invasivem Blasenkrebs zu verbessern. Die Forscher können eine solide Grundlage für die Zählung von Beckenlymphknoten schaffen, auf der klinische Konzepte der Lymphknotenausbeute und -dichte validiert werden können. Die Forscher erwarten den Nachweis, dass das Protokoll zur Fettemulgierung einfach anzuwenden, reproduzierbar und für eine breite Anwendung geeignet ist. Es hat das Potenzial, Auswirkungen auf jeden Patienten zu haben, der sich einer radikalen Zystektomie mit PLND unterzieht.