Efectos de la vasoconstricción de la terapia antioxidante local en diferentes razas

En conjunto, estos estudios proporcionarán datos novedosos e información sobre el impacto de las respuestas vasoconstrictoras aumentadas en BL en la función vascular. Se les pedirá a los participantes interesados ​​que vengan en ayunas (un mínimo de 3 horas desde la última comida) y que se hayan abstenido de alcohol, cafeína y actividad física durante 24 horas. Primero revisaremos los criterios de inclusión/exclusión y discutiremos el formulario de consentimiento informado, incluida una explicación oral del propósito del estudio, los procedimientos y medidas experimentales, y los riesgos y beneficios potenciales asociados con la participación. Antes de cualquier selección/prueba, todos los sujetos darán su consentimiento informado por escrito. Luego, el sujeto completará un cuestionario de historial de salud médica y, posteriormente, el equipo de investigación lo revisará para determinar la elegibilidad. Para los participantes calificados, para probar las hipótesis antes mencionadas, utilizaremos láser Doppler para evaluar la respuesta del flujo sanguíneo de la piel a la administración local del fármaco simpaticomimético-norepinefrina, que es un agonista de los receptores adrenérgicos alfa-1 y alfa-2. Cada participante será instrumentado con cuatro fibras de microdiálisis cutánea en la piel del antebrazo no dominante. Cada una de las siguientes condiciones se asignará aleatoriamente a un sitio de microdiálisis individual. Luego, los sitios experimentales se infundirán con sus respectivos agentes vasoactivos a una velocidad de 2 μl/min durante un período de lavado de 30 min. Sitio 1: este sitio servirá como sitio de control y recibirá Ringer lactato (solución salina). Sitio 2: este sitio recibirá L-NAME 20 mM (clorhidrato de éster metílico de Nω-nitro-L-arginina, Sigma Aldrich) para inhibir la producción de óxido nítrico por la óxido nítrico sintasa. Luego, este sitio se infundirá con no más de 10 mM de norepinefrina para provocar la vasoconstricción. Sitio 3: este sitio recibirá ácido ascórbico 10 mM que sirve como antioxidante no selectivo. El ácido ascórbico se conoce comúnmente como vitamina C. Luego, este sitio se infundirá con no más de 10 mM de norepinefrina para provocar la vasoconstricción. Sitio 4: este sitio recibirá una combinación de L-NAME 20 mM + ácido ascórbico 10 mM. Luego, este sitio se infundirá con dosis incrementales de 10-8 M - 10-2 M de norepinefrina para provocar la vasoconstricción. Esta dosis y enfoque se utiliza comúnmente en este tipo de estudios. Después del período de lavado de 30 minutos, se recopilarán 15 minutos de datos de referencia con calentadores locales configurados a 33 °C (91,4 °F). Después de 15 minutos de recolección de datos de referencia, la perfusión en cada sitio se cambiará a varias concentraciones de norepinefrina combinada con el agente vasoactivo respectivo para cada sitio: dosis incrementales de 10-8 M - 10-2 M (no más de 10 mM (10-2 M ) a razón de 2 μl/min durante un período breve (no más de 6 min cada dosis) para cuantificar el nivel de vasoconstricción en cada sitio. El orden del procedimiento será el siguiente: 1. Instrumentación con membranas. 2. Perfusión de lavado con agente vasoactivo en el sitio respectivo (cada sitio recibirá su agente vasoactivo respectivo simultáneamente). Temperatura fijada a 33 °C (91,4 °F). 3. Recopilación de datos de referencia. Temperatura fijada a 33 grados C (91,4 °F). 4. Cambie a infusión de norepinefrina + agente vasoactivo combinado (para cada sitio respectivo). Temperatura fijada a 33 grados C (91,4 °F). 5. Repita el paso 4 para cada concentración de norepinefrina utilizada. Como se hace comúnmente en este tipo de estudios, no habrá lavados de solución de Ringer entre dosis de NE. Además, también mediremos el flujo sanguíneo en la arteria braquial mediante ecografía Doppler en condiciones de reposo, así como durante un protocolo estándar de dilatación mediada por flujo (FMD). Esto incluye inflar un manguito de presión arterial a presiones suprasistólicas (presión ligeramente por encima de la presión arterial sistólica del participante) durante 5 minutos y realizar mediciones continuas del flujo sanguíneo antes y después de soltar el manguito. Esto se realizará en la parte superior del brazo en la arteria braquial. Este es un procedimiento estándar utilizado en numerosas investigaciones clínicas para estimar la función endotelial sin informes de lesiones o eventos adversos. Participación del sujeto: durante el curso del estudio, un sujeto puede decidir no participar en una medida o procedimiento experimental en particular y, por lo tanto, esta parte del protocolo no se completará. Sin embargo, se realizarán todas las demás mediciones y procedimientos. Esto no afectará el valor científico de la participación del sujeto, ya que cada medida y procedimiento experimental proporciona información importante y, en la mayoría de los casos, independiente.