ACGH:n tutkimus parhaasta Blastocyst Post Transferista

Hypoteesi, jonka mukaan preimplantaalinen aneuploidia seulonta voisi parantaa raskauden määrää IVF/ICSI-toimenpiteiden jälkeen, perustuu kahteen pääasialliseen syystä: 1) 50 % kromosomiriski, joka esiintyy hedelmöityksen aikana lisääntymisiässä, kasvaa iän myötä ja 2) todisteet siitä, että useimmat kromosomipoikkeavuudet keskeytyvät spontaanisti. Siksi suurin osa lisääntymiskeskuksista siirtää vähintään kaksi alkiota edistääkseen raskauden alkamista. Tämä asenne on kuitenkin riskialtis, koska se lisää monisikiöistä raskautta ja aiheuttaa lääketieteellisiä ja sosiaalisia haittoja.

Morfologiaan ja kehitysasteeseen perustuva alkionvalinta ei riitä tunnistamaan kromosomaalisesti normaalia alkiota.

Viimeisten 10 vuoden aikana saatu kokemus PGS:stä FISH-tekniikalla on päätellyt, että sillä ei ole kliinistä arvoa edes valituissa populaatioissa, joissa äidin ikä on edennyt, IVF/ICSI:n toistuva epäonnistuminen, toistuva abortti tai vakava miestekijä. Kolme pääargumenttia olivat: 1) tekniikan rajoitus 24 kromosomin luettelemiseksi, 2) heikentynyt implantaatiokyky in vitro -kehityksen kolmantena päivänä tehdyn biopsian jälkeen ja 3) sellaisten alkioiden hylkääminen, jotka olisivat voineet olla itsestään -korjattu.

Mahdollisuus monistaa koko genomi yhdestä tai kahdesta alkion solusta mahdollistaa menetelmien käytön 24 kromosomin seulomiseksi, kuten vertaileva genominen hybridisaatio, joka suoritetaan metafaasilevyillä (mCGH) tai objektilaseilla, joissa on tuhansia koettimia, jotka vastaavat ihmisen kromosomisegmentit, jotka on kloonattu bakteereihin (BAC array) tai joukko yhden nukleotidin polymorfismeja (aSNP), klassisen tai reaaliaikaisen qPCR:n lisäksi.

Muita tärkeitä kehityskulkuja ovat esialkioiden viljely blastokystivaiheeseen asti. Tämä mahdollistaa enemmän solujen saamisen ja tutkimisen trofektodermia kuoriutuessa, ja lasituksella saavutettu tehokkuus mahdollistaa siirron toisessa syklissä, stimuloimatta, paremmilla tuloksilla kuin uusi siirto. Nämä kaksi viimeistä tosiasiaa ovat tärkeitä, ensimmäinen käytännön näkökulmasta, koska tutkimus suoritetaan alkiolla, joka on saavuttanut korkeimman kehitysasteen in vitro, ja toinen siksi, että kohdun limakalvon vastaanottavuus on parempi stimuloimattomassa kierrossa. ja myös se välttää munasarjojen stimulaatiosyklissä käytettävien lääkkeiden mahdollisen iatrogeenisen vaikutuksen. Tässä viimeisessä kohdassa on mielenkiintoista, että viimeisimmän Australian rekisterin ilmoittama havainto synnynnäisten epämuodostumien riskistä lisääntymistekniikoiden jälkeen osoittaa, että sulaneiden alkioiden poikkeavuuksien määrä ei eroa niistä, jotka ovat syntyneet ilman lisääntymistekniikkaa. Syntymäpoikkeavuuksien määrä tuoreiden alkioiden siirrolla on suurempi kuin ilman avusteisia lisääntymistekniikoita. Lisäksi ei-alkioiden siirto tuoreessa syklissä antaa enemmän aikaa tutkia ja toteuttaa erilaisia ​​geneettisiä menetelmiä, joita ei aiemmin voitu suorittaa aikarajoitusten vuoksi. Tämän uuden vaihtoehdon avulla pystymme organisoimaan työn paremmin ja parantamaan tehokkuutta. Tämä mahdollisuus on erittäin tärkeä geneetikoille, jotka ovat valmiita työskentelemään joka päivä tarvittaessa. Edellä mainitut perusteet huomioon ottaen ehdotamme, että IVF/ICSI-hoitoa vaativille pareille tehdään alkiobiopsia blastokystavaiheessa, sen välitön lasittaminen ja paras blastokysta siirretään sen laajenemisen sekä trofektodermin ja sisäsolun laadun perusteella. massa, seuraavassa syklissä fysiologisesti esikäsitellyllä endometriumilla. Molekyylikaryotyyppi (aCGH) suoritetaan alkionsiirron jälkeen. Siirrettyjen alkioiden karyotyypin tulos selviää, kun potilas tekee raskaustestin. Näin tiedämme kromosomipoikkeavuuksien osuuden ja tyypin kolmessa blastokystisiirron jälkeisessä potilasryhmässä: a) ne, jotka eivät voineet tulla raskaaksi, b) ne, jotka tulivat raskaaksi mutta saivat keskenmenon ja c) ne, jotka synnyttivät onnistuneesti. Ehdotamme, että tämä tutkimussuunnitelma mahdollistaa preimplantaatioiden aneuploidioiden biologisen käyttäytymisen edelleen selvittämisen ja sen arvioimisen, onko sillä todella kliinistä arvoa. Jos implantaatiota edeltävillä kromosomipoikkeavuuksilla on kliinistä arvoa, aneuploidien osuuden ja tyyppien tulee olla erilaisia ​​kolmessa yllä mainitussa potilasryhmässä.

Tarjoamme kaikille raskaana oleville naisille maksuttoman amniocenteesin varmistaaksemme, onko sikiön karyotyyppi trofektoderman mukainen, erityisesti niille, joille on tehty aneuploidinen blastokystisiirto. Ne, jotka kieltäytyvät synnytystä edeltävästä arvioinnista, testataan synnytyksen yhteydessä napanuoraverellä. Sitä vastoin keskenmenon saaneille potilaille tarjotaan raskauden iästä riippuen tutkimusta keskeytetystä tuotteesta, joka on saatu kuretaatiolla, suonivilluspunktiolla, lapsivesitutkimuksella tai sikiön biopsialla.

Potilaat, jotka eivät tulleet raskaaksi tai jotka menettivät sen spontaanisti kromosomipoikkeavuuden vuoksi, voivat hyötyä myöhemmästä siirrosta jäljellä olevilla lasitetuilla euploidisilla alkioilla tai uudella stimulaatiosyklillä suorittamalla aCGH ennen siirtoa. Potilaat, jotka saavuttivat "vauvan kotiin viemisen" ja päättävät hankkia lisää lapsia, voivat myös hyödyntää jäljellä olevaa euploidista devitrifioitunutta blastokysta.

Tässä kliinisessä tutkimuksessa pidämme parempana olla siirtämättä stimuloidun syklin aikana, koska pilottitutkimus, jossa käytettiin stimuloimatonta syklin siirtoa, tuotti parempia tuloksia raskausasteen suhteen verrattuna PGD:n historiallisiin tietoihin tuoreella siirrolla. Muut viimeaikaiset tutkimukset, jotka koskevat devitrifioituneen blastokystan siirtymistä luonnollisessa syklissä tai fysiologisesti valmistettuna endometriumin kanssa, osoittavat myös parempia raskauslukuja ja lisäksi ovat vähemmän iatrogeenisiä kuin tuoreen alkionsiirto.

Hypoteesi alkion aneuploidia seulonnasta parhaan alkion valitsemiseksi on oikea ja sitä tukevat julkaistut tiedot sukusolujen ja/tai ihmisalkioiden sytogeneettisistä tutkimuksista. Kun pariskunta tuottaa tarpeeksi hyvälaatuisia blastokytoja, euploidisen blastokystin valinta siirtoa varten on hyödyllistä, mutta jos pariskunta tuottaa vain yhden aneuploidisen blastokystin, emme ole varmoja sen hylkäämisestä ennen kuin pystymme osoittamaan aneuploidioiden käyttäytymisen preimplantaatiojaksolla. , varsinkin jos löydetty kromosomipoikkeavuus ei ole osa vastasyntyneen patologiaa, muuten poistaisimme parilta viimeisen mahdollisuuden tulla geneettisiksi vanhemmiksi.

Uskomme, että kun alkion molekyylikaryotyypin kliininen arvo ja sen soveltaminen on osoitettu, se voisi olla hyödyllistä paremman raskauden saavuttamisessa valituissa potilasryhmissä, kuten pitkälle lisääntymisiässä olevilla naisilla, toistuvat abortit ja vakava miestekijä.