Szybkie wykrywanie chorobotwórczej Bordetelli

Krztusiec to ostra choroba zakaźna układu oddechowego wywołana przez Bordetella pertussis. Chociaż jest to choroba, której można zapobiegać poprzez szczepienia, od czasu do czasu zgłaszano wybuchy epidemii i przypadki epidemii krztuśca na całym świecie. Bordella parapertussis, Bodella bronchiseptica i bordetella hosei mogą powodować choroby przypominające krztusiec z objawami podobnymi do krztuśca. Objawy kliniczne są trudne do rozróżnienia i są łatwo zgłaszane jako przypadki krztuśca przez sieć chorób zakaźnych.

Rozpoznanie chorób zakaźnych powodowanych przez cztery patogenne bodelle opiera się głównie na laboratoryjnych testach patogenicznych. Obecnie testy laboratoryjne Bordetella, które można przeprowadzić w laboratorium mikrobiologii klinicznej, obejmują hodowlę, serologiczne wykrywanie swoistych przeciwciał przeciwko Bordetella pertussis (PT-IgG) oraz wykrywanie kwasu nukleinowego Bordetella pertussis metodą PCR. Jednak żadne z nich nie spełnia wymogów wczesnej diagnozy.

Amplifikacja w stałej temperaturze startera krzyżowego (CPA) to technologia amplifikacji w stałej temperaturze kwasu nukleinowego z niezależnymi prawami własności. W pełni zautomatyzowana platforma do wykrywania kwasów nukleinowych wyposażona w technologię CPA sprawi, że wykrywanie czterech chorobotwórczych bordetelli będzie łatwe, szybkie, bezpieczne i dokładne.

Jako chorobotwórcza bodella jest trudna w uprawie i nie ma standardu testu lekowrażliwości. Badania wykazały, że 57,4% wyizolowanych klinicznych izolatów Bordetella pertussis ma wartość MIC dla ertomycyny ≥256 μg/mL, a 23s rRNA w miejscu 2047 adenina (A) zostało zmutowane do guaniny (G). CRISPR/Cas to układ odpornościowy w bakterie, które mogą specyficznie rozpoznawać atakujące kwasy nukleinowe i je ścinać. Technologia CRISPR opracowana w oparciu o zasadę CRISPR/Cas umożliwia wykrywanie pojedynczych mutacji punktowych w genach.

Hipoteza, że ​​4 chorobotwórcze bordetella i ich oporność na erytromycynę zostaną wykryte jednocześnie na jednej platformie testowej. Dokładność, niezawodność i wartość predykcyjna tej platformy zostaną sprawdzone za pomocą prospektywnych metod oceny testów diagnostycznych. Hodowla i identyfikacja Bordetella pertussis byłaby metodą złotego standardu.