Wpływ spożycia pomidorów na stłuszczenie, czynność jelit oraz metabolizm glukozy i lipidów u osób z NAFLD

Przewlekłe choroby wątroby należą do głównych przyczyn zachorowalności i śmiertelności. Wzrost umieralności z powodu chorób wątroby wiąże się z częstszym występowaniem NAFLD, czyli najczęstszej przewlekłej choroby wątroby obserwowanej w praktyce klinicznej w krajach zachodnich. Termin „stłuszczenie wątroby” jest cechą charakterystyczną NAFLD i odnosi się do złogów tłuszczu w komórkach wątroby przekraczających 5% i niezwiązanych ze spożywaniem alkoholu, infekcjami wirusowymi lub używaniem narkotyków. Można rozróżnić stłuszczenie wątroby od niealkoholowego stłuszczeniowego zapalenia wątroby (NASH), podtypu NAFLD, w którym odkładanie się tłuszczu wiąże się z zapaleniem zrazikowym ze zwłóknieniem lub bez, charakteryzującym się ryzykiem progresji do marskości wątroby i ewentualnie na raka wątrobowokomórkowego. Stłuszczenie wątroby jest niezależnym czynnikiem ryzyka wszystkich zmian w wątrobie charakteryzujących NAFLD, zwłaszcza zapalenia i zwłóknienia. Na całym świecie częstość występowania NAFLD oceniana za pomocą ultrasonografii wątroby wynosi średnio 30,69%. W ciągu ostatnich 10-15 lat częstość występowania tej choroby, zawsze oceniana za pomocą USG wątroby, wzrosła o +38,7%, z 25,16% w latach 1990-2006 do 34,59% w latach 2016-2019. Jeśli najwyższa częstość występowania NAFLD występuje w Ameryce Łacińskiej (44,37%), to w Ameryce Północnej wynosi ona 31,2%, a w Europie Zachodniej 25,1%. Badania przeprowadzone we Włoszech wskazują na częstość występowania NAFLD w populacji ogólnej wynoszącą 22,5–27,0%, przy 2% częstości występowania zwłóknienia rozpoznawanego metodami nieinwazyjnymi. U chorych na NAFLD śmiertelność z wszystkich przyczyn wynosi 12,60 na 1000 osobolat, natomiast z przyczyn sercowo-naczyniowych, nowotworów pozawątrobowych i przyczyn związanych z wątrobą wynosi odpowiednio 4,20 na 1000 osób/rok,2,83 na 1000 osobolat i 0,92 na 1000 osobolat. W powstaniu i postępie NAFLD, oprócz insulinooporności i uogólnionego stanu zapalnego, zaangażowane są również szlaki relacji między jelitami i wątrobą, na które z kolei wpływa rodzaj mikroflory jelitowej. Wiek wpływa również na rozwój tych chorób wątroby, a wraz z ich postępem zwiększa się częstość występowania NAFLD i powiązanego z nim zwłóknienia. Co więcej, częstość występowania NAFLD wzrasta równolegle ze wzrostem częstości występowania zmian metabolicznych, takich jak dyslipidemia i cukrzyca typu 2. Chociaż głównymi przyczynami zgonów osób dotkniętych NAFLD są choroby układu krążenia i nowotwory pozawątrobowe, zaawansowane zwłóknienie wątroby wydaje się być „samo w sobie” niekorzystnym markerem prognostycznym następstw chorób wątroby. Wobec braku oficjalnie zatwierdzonych terapii farmakologicznych w leczeniu NAFLD, europejskie wytyczne kliniczne i przeglądy systematyczne zawierające metaanalizy zalecają interwencje oparte na stylu życia. Obejmują one głównie ilościowe i jakościowe zmiany w diecie oraz zwiększenie regularnej aktywności fizycznej, które łącznie są uważane za najlepszą strategię terapeutyczną w leczeniu pacjentów z NAFLD. Dieta może poprawić NAFLD poprzez zmniejszenie ilości tłuszczu w wątrobie i insulinooporności, podczas gdy ćwiczenia sprzyjają utracie wagi i poprawiają czynność wątroby. Dieta stanowi zatem skuteczne narzędzie profilaktyki w zwalczaniu chorób metabolicznych, takich jak NAFLD. W szczególności wykazano, że owoce o wysokiej zawartości polifenoli wywierają silne działanie przeciwzapalne, przeciwzakrzepowe i antyproliferacyjne. Niedawno wykazano in vitro na liniach komórkowych ludzkiego raka jelita grubego, że ekstrakty polifenolowe z winogron stołowych mogą hamować proliferację i wzrost komórek, a także wpływać na morfologię komórki, hamując jej zdolność migracyjną. Dane te potwierdzają pogląd, że winogrona jako nutraceutyk mogą mieć wpływ na zdrowie i zapobiegać mechanizmom utleniania, zapaleniom komórkowym i przerzutom. Co więcej, badanie kliniczne na zdrowych ochotnikach wykazało, że dzienne spożycie winogron może obniżyć ekspresję małych jednoniciowych, niekodujących cząsteczek RNA, zwanych miRNA, metabolicznie związanych z „metabolizmem raka przewodu pokarmowego”. Zatem ich hamowanie prowadziłoby do zapobiegania transformacji komórki w sensie nowotworowym. Ostatnio wśród przeciwutleniaczy spożywczych szczególną uwagę zwraca się na likopen, substancję fitochemiczną należącą do rodziny karotenoidów. Likopen występuje obficie w warzywach i odpowiada za ich charakterystyczny kolor. Na jego właściwości bioaktywne wpływa wiele czynników, takich jak biodostępność, metabolizm i interakcja z innymi karotenoidami. W naturze likopen występuje w postaci izoformy trans, która odpowiada za jego biodostępność w obecności podwyższonych temperatur (trans do cis). Przyjmuje się, że ze względu na formę cis likopen jest lepiej przyswajalny. Ponieważ jest to substancja rozpuszczalna w tłuszczach, związane z tym spożycie tłuszczów w diecie zwiększa jej biodostępność. Głównymi źródłami likopenu w diecie śródziemnomorskiej są pomidory i przetwory pomidorowe. W populacji europejskiej spożycie likopenu waha się od 5 do 7 mg/dzień, a ponad 80% jego dziennego spożycia pochodzi z produktów na bazie pomidorów. W kilku badaniach wykazano korzystny wpływ likopenu na zdrowie, wynikający z jego budowy oraz lipofilowego charakteru, który warunkuje jego działanie przeciwzapalne i przeciwutleniające. Niedawne badania sugerują, że zmiany w mikroflorze jelitowej mogą stanowić nową strategię zapobiegania NAFLD lub leczenia niej. Obecnie wiadomo, że określona dieta i regularne ćwiczenia fizyczne mogą wywoływać zmiany w składzie mikroflory jelitowej, co z kolei przyczynia się do wzrostu insulinowy. wrażliwość i metabolizm lipidów w wątrobie. Ponadto w niedawnym badaniu prospektywnym zaobserwowano, że NAFLD wiąże się ze wzrostem o 20% ryzyka rozwoju zespołu jelita drażliwego (IBS), choroby nie spowodowanej zmianami organicznymi i charakteryzującej się bólem brzucha i obrzękiem brzucha, związanym z częstą biegunką lub długotrwałym zaparciem często okresowo na zmianę, złagodzenie objawów po wypróżnieniu, modyfikacja częstotliwości wypróżnień i/lub konsystencji stolca. IBS dotyka od 4,1% do 10,1% populacji ogólnej i jest odpowiedzialny za obniżenie jakości życia oraz wzrost kosztów opieki zdrowotnej, dlatego priorytetem jest identyfikacja czynników stylu życia, które mogą złagodzić objawy IBS. Ponieważ NAFLD i W przypadku IBS występują różnice w poziomach krążących cytokin prozapalnych (zwiększony czynnik martwicy nowotworu (TNF)-α, interleukina (IL)-6 itp. i zmniejszenie poziomu IL-10), powiązania między wątrobą, mózgiem, jelitami i jelitami, wątrobą osi jelitowej, dysfunkcja mikroflory jelitowej, zmiany bariery jelitowej i zmiany motoryki jelit, nie można wykluczyć, że poprawa lub pogorszenie NAFLD może sprzyjać poprawie lub pogorszeniu IBS. Ponadto zaobserwowano, że mechanizmy regulujące funkcję bariery jelitowej ulegają zmianie w NAFLD, co stanowi czynnik pogarszający sytuację. Zapalenie związane z chorobami wątroby może z kolei odgrywać znaczącą rolę w rozwoju zaburzeń żołądkowo-jelitowych (GI). Jest to stan przewlekły o niskiej intensywności, obejmujący cały organizm. Zapalenie wiąże się ze wzrostem poziomu cytokin zapalnych w tkankach, które poprzez aktywację odpowiedzi immunologicznej zmieniają komórkowe szlaki metaboliczne. Ogólnie rzecz biorąc, przewlekłe zapalenie o niskim nasileniu i zmiany w stężeniu hormonów metabolicznych, wraz z rozmieszczeniem tkanki tłuszczowej w jamie brzusznej i zmianami w populacjach bakterii mikroflory jelitowej, stanowią główne czynniki zaangażowane w rozwój chorób przewodu pokarmowego. patologie, które rozwijają się właśnie poprzez zmiany bariery jelitowej. Barierę jelitową można uznać za układ dynamiczny, który reaguje również na sygnały humoralne i szereg różnych cząsteczek, które na różne sposoby są kwestionowane. Wśród nich ważne jest rozważenie zonuliny, peptydu przewodu pokarmowego zdolnego do modulowania funkcjonalności połączeń ścisłych (TJ). Wykazano, że stężenie zonuliny w surowicy koreluje ze stopniem upośledzenia bariery śluzówkowej. Uszkodzenia komórkowe i/lub TJ mogą mieć znaczący wpływ na prawidłowe funkcjonowanie przepuszczalności jelit (PI). I-FABP (jelitowe białka wiążące kwasy tłuszczowe) to białka cytozolowe obecne w komórkach nabłonkowych, odpowiedzialne za transport kwasów tłuszczowych. Mogą one zostać uwolnione do krążenia po utracie integralności błony komórkowej i są szybko eliminowane z moczem; stanowią zatem nieinwazyjne markery wczesnego uszkodzenia na poziomie komórkowym nabłonka jelitowego. Podobnie oksydaza hecka (DAO), enzym wewnątrzkomórkowy o wysokim poziomie aktywności w górnej warstwie kosmków jelitowych, uważana jest za marker surowicy integralności nabłonka jelitowego. Zmiany w funkcjonowaniu bariery mogą sprzyjać przedostawaniu się bakterii i ich produktów. Stwierdzono, że lipopolisacharyd (LPS), dominujący składnik ściany komórkowej bakterii Gram-ujemnych, wpływa na funkcję bariery. W warunkach fizjologicznych LPS nie jest w stanie przekroczyć nienaruszonego nabłonka, natomiast w przypadku zmniejszonej integralności nabłonka może przekroczyć barierę przewodu pokarmowego. Tryptofan jest niezbędnym aminokwasem dla człowieka, ponieważ nie jest syntetyzowany u człowieka; bakterie komensalne katabolizują tryptofan do różnych pochodnych, które są wchłaniane w jelitach i wydalane z moczem. Dwa z tych związków, siarczan indoksylu i 3-metyloindol (skatol), są obecnie stosowane w diagnostyce dysbiozy jelita cienkiego i okrężnicy.

Badanie będzie badaniem randomizowanym i kontrolowanym z interwencją żywieniową: 60 pacjentów cierpiących na NAFLD zostanie włączonych i losowo przydzielonych do dwóch grup badania (grupa kontrolna i grupa leczona):

Grupa A (Leczenie): osoby zaliczone do tej grupy będą musiały spożywać dziennie 200 g świeżych, surowych pomidorów i 50 g sosu. Grupa B (Kontrola): osoby zaliczone do tej grupy muszą przestrzegać jednej diety wolnej od pomidorów. Wszystkie grupy będą otrzymać dokładne instrukcje dotyczące diety, którą należy stosować, w zależności od ramienia, do którego zostaną przydzieleni. Leczenie będzie trwało 6 tygodni i oprócz V0 (wizyty przesiewowej) planowane są jeszcze 2 wizyty (V1-V2).

Na poziomie V0 zostanie poddany: Wywiadowi lekarskiemu; Fibroscan, do oceny stopnia stłuszczenia wątroby; - Wykrywanie cech antropometrycznych (BMI, obwód brzucha); Test BIA.

Zarejestrowani pacjenci zostaną poproszeni o powrót na V1 po 7 dniach w celu otrzymania spersonalizowanego planu żywieniowego. W V1 zostaną poddani pobraniu krwi poprzez wkłucie żyły i ocenie składu ciała za pomocą DEXA. Próbki krwi pełnej i surowicy zostaną przesłane do laboratorium centralnego w celu przeprowadzenia rutynowych pomiarów parametrów chemicznych krwi oraz parametrów ryzyka żywieniowego, metabolicznego i sercowo-naczyniowego. Na podstawie wyników zostanie wyliczony wskaźnik HOMA oraz stopień stłuszczenia wątroby FLI (wskaźnik stłuszczenia wątroby) i zwłóknienia wątroby (FIB-4). Główne adipokiny (leptyna, RBP-4, wisfatyna), główne wątrobowe czynniki wzrostu (HGF, Fetuina-A, FGF21, FGF19, PAI-1) i główne cytokiny prozapalne (wysoce wrażliwe białko C-reaktywne, IL-6, IL-8, TNF-α) i przeciwzapalne (IL-4); inne porcje zostaną wykorzystane do analiz lipidomicznych i biochemicznych. W próbkach surowicy pobranych od pacjentów w momentach V1 i V2 zostanie oceniona aktywność przeciwutleniająca i stan zapalny oraz poziomy enzymów deglikantowych w surowicy poprzez badanie enzymów SOD1 i SOD2 (dysmutaza ponadtlenkowa 1 i 2), IL-6, TNF-alfa i enzymy 3-kinaza fruktozaminy i glioksalaza. Osoby objęte badaniem zostaną również poproszone o przyniesienie dwóch próbek kału w celu oceny mikroflory jelitowej oraz pomiaru zonuliny i metabolomu w kale, a także dwóch próbek moczu.