Transmissão Neuromuscular na Esclerose Lateral Amiotrófica (NETALS)

A Esclerose Lateral Amiotrófica (ELA) é uma doença neurodegenerativa progressiva que envolve neurônios motores do córtex motor, tronco cerebral e medula espinhal. Sua patogênese permanece desconhecida, e a única droga atualmente disponível, o riluzol, apenas prolonga modestamente a sobrevida. Dados consistentes mostram que a transmissão neuromuscular é prejudicada em pacientes com ELA. O significado dessas anormalidades permanece desconhecido, mas dados recentes sugerem que elas potencialmente desempenham um papel fundamental na patogênese da doença. A disfunção das junções neuromusculares (NMJs) pode aparecer muito cedo na doença, conforme demonstrado por dados em modelos animais. Os mecanismos desse comprometimento da transmissão neuromuscular são desconhecidos. Nogo A pertencente à família de proteínas inibidoras de crescimento de neurites que é anormalmente expressa no músculo esquelético de pacientes com ELA, provavelmente está envolvido, pois foi demonstrado que a superexpressão de Nogo A no músculo de tipo selvagem leva à desestabilização de NMJs. Um estudo detalhado da estrutura e função do SNM em pacientes com ELA é obrigatório para melhor caracterizar os mecanismos fisiopatológicos envolvidos.

O objetivo deste estudo é caracterizar a disfunção da transmissão neuromuscular na ELA. Para tanto, estudaremos as características estruturais e funcionais de MNJs em biópsias musculares em um grupo de 20 pacientes com ELA em comparação com 10 controles. Utilizando biópsias de um músculo vestigial, o ancôneo, faremos um estudo morfológico do SNM, incluindo histoquímica de rotina, estudos imuno-histoquímicos para proteínas principais do MNJ e complexos imunes IgG e estudo de microscopia eletrônica. O número de receptores de acetilcolina por placa terminal será determinado pela ligação da alfa-bungarotoxina marcada radioativamente. Os níveis de expressão de Nogo-A serão determinados em espécimes musculares por western blot. A transmissão sináptica em NMJs individuais também será estudada ex vivo. Registraremos o potencial de membrana ao longo do tempo usando diferentes frequências de estimulação nervosa e analisaremos as propriedades dos potenciais de placa terminal em miniatura (liberação espontânea de acetilcolina) e potenciais de placa motora após estimulação do nervo (liberação evocada de acetilcolina). Os resultados deste estudo estrutural e funcional da JNM em biópsia muscular serão correlacionados com EMG de superfície e dados clínicos.

Este estudo ajudará a identificar novos mecanismos envolvidos na fisiopatologia da ELA e potenciais novos alvos para futuros tratamentos.