Validação ELISA de Resultados de Teste de Diagnóstico Rápido de Hipersensibilidade para Detecção de P. Falciparum (ELISA)

A eliminação da malária por P. falciparum (PF) em um território requer acesso universal ao tratamento de casos clínicos para comunidades e direcionamento específico para locais ou grupos populacionais onde a transmissão da malária persiste, apesar do acesso generalizado ao tratamento. Em particular, suspeita-se que uma grande prevalência de portadores de parasitas de PF seja uma das razões para a persistência da malária. O fato de esses portadores não desenvolverem sintomas permite que eles abriguem e transmitam parasitas por longos períodos de tempo. É provável que contribuam significativamente com a transmissão em sua comunidade e até mesmo fora dela, de acordo com seus padrões de movimento.

Identificar esses bolsões de portadores assintomáticos é um componente-chave da estratégia de eliminação da malária, pois permite direcionar intervenções específicas, como tratamento em massa direcionado, para drenar rapidamente o reservatório assintomático.

Estrategicamente, para atingir esse objetivo, precisamos ser capazes de identificar de forma rápida e confiável as aldeias ou grupos de aldeias em que o reservatório assintomático é grande e deve ser tratado por administração de medicamentos em massa (MDA).

Atualmente, não há testes de ponto de atendimento disponíveis para detectar portadores assintomáticos com precisão. Os Testes de Diagnóstico Rápido disponíveis (RDT normais) foram concebidos para diagnosticar infecções de malária clinicamente relevantes. No entanto, a sua sensibilidade para portadores de malária assintomáticos é baixa, uma vez que a maioria destes indivíduos apresenta parasitemias abaixo dos limiares de detecção de RDT. Atualmente, contamos com pesquisas de sangue de alto volume, nas quais uma pequena amostra da população da aldeia fornece uma amostra de sangue venoso de 2mL que pode ser analisada por qPCR ultrassensível. Esta técnica permite detectar parasitemias muito baixas. No entanto, é um teste de alto custo e os requisitos técnicos para usar o qPCR limitam o número de amostras que podem ser testadas. Além disso, como a análise deve ser feita em laboratório, o tempo necessário para envio e análise resulta em atrasos de 4 a 8 semanas entre a pesquisa e o resultado. O levantamento de áreas remotas e com poucos recursos aumenta o desafio, pois as amostras devem ser enviadas do campo para o laboratório, na cadeia de frio, dentro de 24 a 48 horas após a coleta de sangue.

Para garantir que os indivíduos assintomáticos sejam diagnosticados de forma rentável e viável, é vital que seja disponibilizado um RDT mais sensível para utilização no terreno. Dependendo do seu desempenho, um RDT sensível pode ser usado para pesquisas de prevalência para direcionar o MDA, ou diretamente para intervenções baseadas no tratamento de indivíduos positivos (detecção de casos reativos ou triagem e tratamento em massa).

Um novo RDT hipersensível (hsRDT) foi desenvolvido, mas antes que possa ser utilizado para pesquisas de eliminação, precisamos validar suas propriedades técnicas (sensibilidade e especificidade) e sua utilidade no campo para detectar a presença de PfHRP2 em comparação com um ELISA de controle padrão-ouro (Ensaio de Imunoabsorção Enzimática). Isso permitirá a confirmação de falso e verdadeiro positivo entre as amostras.