Walidacja ELISA nadwrażliwych wyników szybkiego testu diagnostycznego do wykrywania P. falciparum (ELISA)

Eliminacja malarii wywołanej przez P. falciparum (PF) na danym terytorium wymaga powszechnego dostępu społeczności do leczenia przypadków klinicznych oraz ukierunkowania na miejsca lub grupy populacji, w których mimo powszechnego dostępu do leczenia utrzymuje się przenoszenie malarii. W szczególności podejrzewa się, że duża częstość występowania nosicieli pasożytów PF jest jedną z przyczyn utrzymywania się malarii. Fakt, że ci nosiciele nie rozwijają objawów, pozwala im na schronienie i przenoszenie pasożytów przez długi czas. Prawdopodobnie wniosą znaczący wkład w transmisję w swojej społeczności, a nawet poza nią, zgodnie z ich wzorcami poruszania się.

Zidentyfikowanie tych ognisk wysokiego bezobjawowego nosicielstwa jest kluczowym elementem strategii eliminacji malarii, ponieważ umożliwia ukierunkowanie określonych interwencji, takich jak ukierunkowane masowe leczenie, w celu szybkiego osuszenia bezobjawowego rezerwuaru.

Strategicznie, aby osiągnąć ten cel, musimy być w stanie szybko i niezawodnie identyfikować wsie lub grupy wiosek, w których bezobjawowy rezerwuar jest duży i należy się nim zająć poprzez ukierunkowane masowe podawanie leków (MDA).

Obecnie nie ma dostępnych testów punktu opieki, które pozwoliłyby dokładnie wykryć bezobjawowych nosicieli. Dostępne szybkie testy diagnostyczne (normalne RDT) są przeznaczone do diagnozowania klinicznie istotnych infekcji malarią. Jednak ich wrażliwość na bezobjawowych nosicieli malarii jest niska, ponieważ większość z tych osób ma parazytemie poniżej progów wykrywalności RDT. Obecnie polegamy na badaniach krwi o dużej objętości, w których niewielka próbka populacji wiejskiej dostarcza 2 ml próbki krwi żylnej, którą można analizować za pomocą ultraczułego qPCR. Technika ta pozwala wykryć bardzo niskie parazytemie. Jest to jednak test kosztowny, a wymagania techniczne związane z użyciem qPCR ograniczają liczbę próbek, które można przetestować. Ponadto, ponieważ analiza musi być przeprowadzona w laboratorium, czas potrzebny na wysyłkę i analizę powoduje opóźnienie od 4 do 8 tygodni między badaniem a wynikiem. Badanie odległych, słabo wyposażonych obszarów zwiększa wyzwanie, ponieważ próbki muszą zostać wysłane z pola do laboratorium, w łańcuchu chłodniczym, w ciągu 24 do 48 godzin od pobrania krwi.

Aby upewnić się, że osoby bezobjawowe są diagnozowane w opłacalny i wykonalny sposób, niezbędne jest udostępnienie bardziej czułego RDT do użytku w terenie. W zależności od jego wydajności, czuły RDT mógłby być wykorzystany do badań rozpowszechnienia w celu ukierunkowania na MDA lub bezpośrednio do interwencji opartych na leczeniu osób z pozytywnym wynikiem (reaktywne wykrywanie przypadków lub masowe badania przesiewowe i leczenie).

Opracowano nowy nadwrażliwy RDT (hsRDT), ale zanim będzie można go wykorzystać do badań eliminacyjnych, musimy zweryfikować zarówno jego właściwości techniczne (czułość i swoistość), jak i przydatność w terenie do wykrywania obecności PfHRP2 w porównaniu ze złotym standardem kontrolnym ELISA (Enzyme Linked Immuno-Sorbent Assay). Umożliwi to potwierdzenie wyników fałszywie i prawdziwie dodatnich wśród próbek.