Efeitos da curcumina em pacientes com doença renal crônica

Trata-se de um estudo longitudinal do tipo crossover randomizado, duplo-cego, controlado por placebo, período de washout. Selecionamos 30 pacientes com DRC em hemodiálise na Clínica Renalcor/RJ (segundo cálculo amostral, considerando p = 0,05 e poder do teste de 80%). Pacientes elegíveis de ambos os sexos, previamente avaliados e autorizados pela equipe médica do ambulatório, foram convidados a participar da pesquisa.

A pesquisa foi realizada após assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido, de acordo com as normas dos Comitês de Ética em Pesquisa locais e exigido pela Resolução 466 de 12 de dezembro de 2012 (Conselho Nacional de Saúde), com base nas diretrizes da Declaração de Helsinki e da Associação Médica Mundial em pesquisa humana. Este projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética da Faculdade de Medicina/UFF, número: 2.346.933. Está registrado no ClinicalTrials.gov sob o número NCT 03475017.

Critérios de inclusão e exclusão:

Foram incluídos no estudo pacientes com DRC estágio 5 (TFG <15 mL/min) em hemodiálise há mais de 6 meses, com idade mínima de 18 anos e que apresentavam fístula arteriovenosa (FAV) como acesso vascular. Pacientes gestantes, fumantes, antibióticos nos últimos 3 meses, suplementos antioxidantes e consumo habitual de cúrcuma e/ou cúrcuma, além de portadores de doenças autoimunes e infecciosas, câncer, doenças hepáticas e AIDS não foram incluídos no estudo.

A ingestão alimentar foi avaliada no início e no final da intervenção por meio da técnica de recordatório alimentar de 24 horas. A análise da ingestão total de energia (kcal/kg), carboidratos (%), lipídios (%), proteína (g/kg), fósforo (mg) e potássio (mg) foram estimados usando o software NutWin®.

Avaliação do estado nutricional Os pacientes tiveram peso corporal (kg), altura (m), circunferência do braço (cm), circunferência da cintura (CC) (cm) e dobras cutâneas (mm) (bíceps, tríceps, subescapular e suprailíaca) aferidas com o auxílio de balança calibrada, estadiômetro, fita métrica e adipômetro tipo Lange Skinfold Caliper (Cambridge Scientific Industries Inc.) antes e após a intervenção. O índice de massa corporal (IMC) foi calculado a partir do peso corporal seco (kg) dividido pela altura ao quadrado (m). A área muscular do braço e o percentual de gordura corporal foram calculados. Todas as medições foram realizadas após a sessão de diálise por um membro da equipe treinada.

Coleta de sangue e análises bioquímicas As amostras foram coletadas pela manhã após jejum de 12 horas antes da diálise e imediatamente após a punção da fístula arteriovenosa em tubos Vacutainer® contendo ácido etilenodiamino tetraacético (EDTA) com anticoagulante (1,0 mg/mL). Após a coleta, uma alíquota foi utilizada para análise com sangue total e outra foi centrifugada a 2500 rpm por 10 min a 4 C para obtenção do plasma, que foi distribuído em tubos eppendorfs de polipropileno de 1,5 mL, identificado e aliquotado a cada análise e armazenado a 80 C para posterior análise. O sangue total foi utilizado para obter as células mononucleares do sangue periférico (PBMC).

Análise de PCR em tempo real A expressão de mRNA de Nrf2 e NF-kB foi avaliada a partir de PBMC usando reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qPCR). Os ensaios TaqMan Gene Expression (Thermo Fisher®) para a detecção de expressão de mRNA de controle de Nrf2 (Hs00975961_g1), NF-kB (Hs00765730_m1) e GAPDH (Hs02758991_g1) foram usados. O Prism 7500 Sequence Detection System ABI (Applied Biosystems®) e as condições cíclicas padrão foram usadas para amplificação por PCR. A expressão de NRf2, NF-kB mRNA foi normalizada contra GAPDH, e o nível de expressão foi calculado usando o método DDCT (delta delta threshold cycle).

Parâmetros bioquímicos Informações relevantes, como etiologia da DRC e idade, foram coletadas dos prontuários dos pacientes. Exames bioquímicos de rotina correspondentes às datas de coleta, como uréia, Kt/v, hemoglobina e albumina, fósforo sérico, potássio, paratormônio, glicose e hemoglobina glicada também foram obtidos de prontuários de rotina. Os níveis séricos de proteína C reativa de alta sensibilidade (hsCRP), colesterol total, triglicerídeos, c-HDL foram determinados usando kits BioClin® usando o analisador bioquímico Bioclin BS-120 Chemistry Analyze. O LDL foi calculado pela equação de Friedewald, considerando valores de triglicerídeos abaixo de 400 mg/dL: LDL Colesterol ¼ (Colesterol Total) - (HDL Colesterol) - (Triglicerídeos)/5.