En prospektiv undersøgelse af anvendelsen af ​​flydende biopsi i overvågningen af ​​højrisikopopulationer af HCC.

Hepatocellulært karcinom (HCC) er en af ​​de kræftformer med høj morbiditet og dødelighed i verden, og forekomsten af ​​leverkræft i Kina er særlig alvorlig. I 2020 vil der være 410.000 nye tilfælde af leverkræft i Kina, hvilket udgør 42,5 % af verden. Der var 391.000 dødsfald, rangerende på femtepladsen i forekomsten af ​​maligne tumorer og nummer to i dødeligheden. De fleste patienter med primær leverkræft har en snigende start og har nået det midterste og sene stadie, når de er diagnosticeret. På dette tidspunkt er behandlingen af ​​leverkræft få, prognosen er dårlig, og dødeligheden høj. Tidlig opdagelse og behandling er af stor betydning for at forbedre overlevelsesraten for patienter med leverkræft, og 5-års overlevelsesraten efter tidlig leverkræft (BCLC stadium 0/A) kan nå mere end 60 %. Imidlertid er diagnosen for tidlig leverkræft i Kina kun 30%. I andre lande kan antallet af tidlige diagnoser øges til mere end 60 % ved at overvåge højrisikopopulationer. Det kan ses, at tæt overvågning af præ-cancerstadiet er nøglen til tidlig diagnose og tidlig behandling af HCC.

At identificere personer med høj risiko for kræftudvikling er forudsætningen for kræftovervågning og den største forskel fra at udføre tumorscreening i den generelle befolkning. Sammenlignet med mange andre almindelige kræftformer kommer Targets for flydende biopsier i mange former, herunder genetikbaserede tests for genmutationer og epigenetisk-baserede tests for methylering. Da der ikke er fundet nogen specifikke genmutationshændelser direkte relateret til cancerdannelse i leverkræft, er effekten af ​​at søge efter biomarkører langs denne rute begrænset. Derfor er det at opdage tidlig leverkræft fra det epigenetiske niveau blevet en anden måde, der er værd at udforske.

I den epigenetiske mekanisme er DNA-methylering en vigtig genreguleringsmetode, som er tæt forbundet med forekomsten og udviklingen af ​​tumorer. Endnu vigtigere er det, at unormal methylering af kræftrelaterede gener ofte forekommer i det tidlige stadie af cancerudvikling, så DNA-methyleringssignaler betragtes som potentielle markører for tidlig tumorscreening [14]. Derudover er methyleringsmodifikation vævsspecifik i forskellige tumorer og kan endda bruges til at lokalisere det primære væv af cancer, som er en ideel molekylær markør for tidlig tumorscreening [15]. Derfor kan ctDNA, som bærer tumorcellespecifik methyleringsinformation, bruges som et mål for flydende biopsi af leverkræft, hvilket giver en innovativ vej til tidlig diagnose af HCC udvikles gradvist på grundlag af klare årsager, såsom typisk hepatitis, cirrhose til leverkræft "tre trin". Disse karakteristika bestemmer målpopulationen for tidlig diagnose af HCC, som kan findes i den medicinske behandling af forskellige kroniske leversygdomme. At gøre fuld brug af disse præcancerøse risikofaktorer og identificere højrisikogrupper af leverkræft som overvågningsobjekter vil hjælpe med at forbedre detektionsraten for kræft og opnå et bedre forhold mellem fordele og omkostninger.

Intrahepatiske knuder er lidelsen i hepatisk trabekulær arrangement forårsaget af fibrøs vævshyperplasi. Deres dannelse indikerer progressionen af ​​leverskade og er også et vigtigt stadium af præcancerøse læsioner. Patologisk kan knuder opdeles i stadier såsom regenererede knuder, lavgradig og højgradig atypisk hyperplasi og adenom i henhold til deres nærhed til kræft, men standarderne og terminologien er stadig vanskelige at forene, og patologisk diagnose kræver indhentning af prøver gennem leveren punktering, som ikke er meget udbredt i klinisk praksis. I dette tilfælde bliver størrelsen af ​​de intrahepatiske knuder detekteret ved ultralyd et vigtigt grundlag for stratificering af leverkræftrisiko. Med de nuværende retningslinjer for diagnosticering og behandling af leverkræft i Kina som eksempel, er om knudediameteren er større end 2 cm hovedgrundlaget for klassificering og diagnose: for knuder mindre end 2 cm kræves der mindst to billeddannelsesbeviser for at bekræfte leverkræft; For knuder større end 2 cm kræves kun én genstand. Derudover er stratificeret analyse baseret på størrelsen af ​​intrahepatiske knuder også en ramme for objektiv evaluering af tumormarkørers rolle. Alpha-fetoprotein (AFP), en traditionel serummarkør for hepatocellulært karcinom, har en følsomhed på 72-87 % ved fremskreden hepatocellulært karcinom. Men for tidligt stadie leverkræft mindre end 2 cm er dens følsomhed kun 30-50%.

I lyset af manglerne ved traditionelle serologiske markører med få typer og lav specificitet, er der gjort mange vigtige fremskridt i anvendelsen af ​​molekylære detektionsteknikker baseret på omics til cancerdiagnose og -screening. Den flydende biopsiteknologi baseret på sekventering med høj gennemløb kan detektere specifikke unormale signaler i en lille mængde cirkulerende tumor-DNA (ctDNA) i humant perifert blod og dermed fremme den teknologiske innovation inden for tidlig tumorscreening.

Mål for flydende biopsier kommer i mange former, herunder genetik-baserede tests for genmutationer og epigenetisk-baserede tests for methylering. Da der ikke er fundet nogen specifikke genmutationshændelser direkte relateret til cancerdannelse i leverkræft, er effekten af ​​at søge efter biomarkører langs denne rute begrænset. Derfor er det at opdage tidlig leverkræft fra det epigenetiske niveau blevet en anden måde, der er værd at udforske.

I den epigenetiske mekanisme er DNA-methylering en vigtig genreguleringsmetode, som er tæt forbundet med forekomsten og udviklingen af ​​tumorer. Endnu vigtigere er det, at unormal methylering af kræftrelaterede gener ofte forekommer i det tidlige stadie af cancerudvikling, så DNA-methyleringssignaler betragtes som potentielle markører for tidlig tumorscreening. Derudover er methyleringsmodifikation vævsspecifik i forskellige tumorer og kan endda bruges til at lokalisere det primære væv af cancer, som er en ideel molekylær markør for tidlig tumorscreening. Derfor kan ctDNA, som bærer tumorcellespecifik methyleringsinformation, bruges som et mål for flydende biopsi af leverkræft, hvilket giver en innovativ vej til tidlig diagnose af HCC.

Selvom flydende biopsi viser lovende anvendelse i den tidlige diagnose af HCC, er de fleste resultater baseret på retrospektive undersøgelser. Ifølge trinene i markørforskning og -udvikling er fremtidige og multicenterundersøgelser nødvendige for at verificere det. I dette projekt vil vi stole på holdet og arbejdsgrundlaget for nøgledisciplinen fordøjelse (leversygdom) og samarbejde med BGI Shenzhen BGI Medical Laboratory for at udføre flydende biopsi baseret på methylering og evaluere dets gennemførlighed for leverkræftovervågning gennem prospektive undersøgelser. Fremme realiseringen af ​​tidlig påvisning, diagnose og behandling af HCC.

Risikovurderingsmodellen for leverkræft blev etableret for at identificere højrisikogrupperne for leverkræft. Et prospektivt kohortestudie blev udført for at evaluere flydende biopsiteknologis forudsigelige evne til forekomst af leverkræft og for at verificere ydeevnen og anvendelsesmulighederne for denne nye genetiske detektionsteknologi i leverkræftovervågning.