Effetto della terapia con microvescicole ed esosomi sulla massa delle cellule beta nel diabete mellito di tipo I (T1DM)

• Venti pazienti con T1DM, età compresa tra 18 e 60 anni con riduzione della catena peptidica C superiore al 50%, peptide C superiore a 0,8 ng/mL allo screening e che richiedevano insulina ≥0,4 UI per kg al giorno.
• Venti pazienti con T1DM con gli stessi criteri di selezione dell'ingresso saranno sottoposti a tutti i passaggi tranne la somministrazione di microvescicole come gruppo di controllo.
• Periodo di follow-up dello studio: tre mesi
• Sesso: sono inclusi sia maschi che femmine
• I criteri di selezione delle voci includono:

UACR inferiore a 300, BUN tra 10-20 mg/dl, creatinina sierica tra 0,6-1,4 mg/dl ed enzimi epatici normali, bilirubina sierica normale, albumina sierica normale e profilo della coagulazione). C-peptide superiore a 0,8 ng/mL allo screening. BMI 20-40 kgm/m2 - Criteri di esclusione: Altre malattie autoimmuni. Gravidanza. Precedente trattamento con cellule staminali. Tutti i pazienti e i controlli saranno esaminati per HBV, HCV e HIV mediante test PCR prima dell'arruolamento nello studio e la positività per uno qualsiasi di questi parametri significa l'esclusione di questo paziente dallo studio.

- L'endpoint primario sarà la fine del follow-up di tre mesi. Al giorno (0): tutti i pazienti e i controlli saranno sottoposti alle seguenti indagini: test di funzionalità epatica, test di funzionalità renale, HbA1c, test di tolleranza al glucosio (GTT), livelli di glucosio nel sangue a digiuno e 2 ore post prandiali, catena C-peptidica livello e la dose giornaliera totale calcolata di insulina.

Dopo tre mesi (al termine dello studio) verranno ripetute le stesse indagini.

Due infusioni endovenose di microvescicole di cellule staminali mesenchimali derivate dal sangue del cordone ombelicale [CB-MSC]:

- La prima dose sarà costituita da esosomi purificati, compresi tra 40-180 nm, in una dose del surnatante prodotto da (1.22-1.51) × 10 (6)/kg/IV.

(Caratterizzazione degli esosomi: CD63, CD9, Alix, TSG 101, HSP 70).

- La seconda dose, dopo 7 giorni, saranno le microvescicole, comprese tra 180-1000 nm, in una dose del supernatante prodotto da (1.22-1.51) × 10 (6)/kg/IV.

(Caratterizzazione delle microvescicole: (Annessina V, Flotillina-2, selectina, integrina, metalloproteinasi CD40).