Clostridium Butyricum nella Malattia di Crohn Stenosante (AUTOCD)

La malattia di Crohn è una patologia infiammatoria cronica e recidivante dell'intestino di eziologia sconosciuta, che coinvolge disregolazione immunitaria e alterazioni del microbiota. La malattia stenosante (fenotipo B2 di Montreal) rappresenta un bisogno terapeutico insoddisfatto di primaria importanza, poiché attualmente non sono disponibili terapie farmacologiche per la fibrosi intestinale, che viene spesso gestita chirurgicamente.

L'autofagia, un regolatore chiave dell'omeostasi cellulare, è stata collegata alla patogenesi della malattia di Crohn, con studi genetici che identificano polimorfismi nei geni correlati all'autofagia. L'autofagia compromessa può esacerbare l'infiammazione, lo stress ossidativo e il danno tissutale. Dati preliminari del nostro gruppo mostrano una ridotta autofagia nei pazienti con malattia di Crohn stenosante rispetto a quelli con fenotipo infiammatorio o controlli sani.

Clostridium butyricum, un probiotico di nuova generazione con forte attività produttrice di butirrato, esercita effetti antinfiammatori e protettivi della mucosa in parte attraverso la stimolazione dell'autofagia. Il suo utilizzo potrebbe rappresentare un nuovo approccio terapeutico per prevenire o mitigare le complicanze fibrostenotiche nella malattia di Crohn.

Questo è uno studio pilota clinico interventistico senza scopo di lucro che arruolerà 40 pazienti con malattia di Crohn stenosante (B2, classificazione di Montreal; localizzazione L2 o L3). I pazienti sottoposti a colonscopia clinicamente indicata saranno randomizzati in uno dei quattro gruppi per ricevere per due mesi prima della procedura:

1. Integrazione con C. butyricum
2. Integrazione con trealosio (un noto induttore dell'autofagia)
3. Combinazione C. butyricum + trealosio
4. Placebo Durante la colonscopia, saranno prelevate biopsie di routine, con due campioni aggiuntivi raccolti per scopi di ricerca, insieme a campioni di sangue periferico. Le analisi di laboratorio si concentreranno sui mediatori molecolari dell'infiammazione, fibrosi, stress ossidativo e vie dell'autofagia.

L'obiettivo primario è testare l'ipotesi che C. butyricum sia sicuro e capace di stimolare i processi autofagici locali nella mucosa intestinale di pazienti con malattia di Crohn stenosante.

Gli obiettivi secondari includono la valutazione delle vie correlate all'autofagia (infiammazione, fibrosi, produzione di ROS, attività della NADPH ossidasi) e il confronto degli esiti tra i quattro gruppi di trattamento. Procedure di laboratorio saranno utilizzate per valutare e quantificare, nei campioni bioptici ed ematici, autofagia, infiammazione, fibrosi e stress ossidativo. In particolare, l'autofagia sarà valutata misurando i marcatori autofagici mucosali LC3b-II e p62. L'infiammazione sarà valutata misurando l'espressione di citochine pro-infiammatorie (TNFα, IFNγ, IL-17 e COX2), quantificando l'mRNA mediante PCR in tempo reale (RT) con primer specifici. La fibrosi sarà valutata quantificando l'mRNA dei geni correlati Col1a1, α-sma, Snail1, Snail2, TGFβ. Infine, i livelli di stress ossidativo saranno valutati misurando marcatori sierici come sNOX2-dp, H2O2 e l'attività di degradazione del perossido di idrogeno sierico (H2O2) (HBA).