Biomarkery w ślinie i kale

Wiele rozpuszczalnych czynników występujących we krwi można wykryć w ślinie i kale. Często stwierdza się, że poziomy tych czynników korelują między płynami ustrojowymi, chociaż dokładny związek między odpornością ogólnoustrojową (krew) i miejscową (ślina i stolec) nie jest jeszcze dobrze ustalony. Czynniki związane ze śliną i kałem są wytwarzane w jamie ustnej i jelitach, które reprezentują miejsca na błonie śluzowej, które potencjalnie wchodzą w bezpośredni kontakt z patogenami. Zatem poziomy rozpuszczalnych czynników związanych z błoną śluzową mogą lepiej odzwierciedlać lokalną odpowiedź immunologiczną w tych miejscach.

Staje się teraz jasne, że ślina i stolec mogą być również wykorzystywane do analizy reakcji zapalnych. W niedawnym badaniu przebadano 20 możliwych biomarkerów śliny związanych z otyłością i autorzy znaleźli cztery biomarkery, które wykazują znaczące zmiany wraz ze wzrostem masy ciała w populacji pediatrycznej. Stwierdzono, że stężenie białka C-reaktywnego w ślinie (CRP), insuliny w ślinie, leptyny i adiponektyny różni się u dzieci otyłych w porównaniu ze zdrowymi dziećmi z prawidłową masą ciała. Dane te sugerują, że ślina może być użytecznym substytutem krwi w badaniu metabolicznych powikłań otyłości u dzieci, gdzie wielokrotne pobieranie krwi może być zarówno traumatyczne, jak i trudne. Wyniki tego badania dostarczają również wglądu we wczesny rozwój choroby metabolicznej u dzieci. (Goodson, Kantarci i in. 2014). W innym badaniu cytokiny-chemokiny-czynniki wzrostu (CCGF) mierzono za pomocą multipleksowych testów perełkowych i porównywano osocze, ślinę i mocz pobrane od 20 zdrowych ochotników płci męskiej i żeńskiej. Analiza więcej niż jednego rodzaju próbek od tego samego pacjenta zwiększyłaby możliwość identyfikacji biomarkerów dla dowolnej choroby zapalnej. W tym badaniu zaobserwowano również specyficzne dla płci CCGF, a stężenia niektórych CCGF różniły się w zależności od płci. Informacje te są również cenne dla odkrywania biomarkerów, które poprzez połączenie osobników płci męskiej i żeńskiej w badaniu klinicznym wyeliminowałyby fałszywe wykrywanie biomarkerów (Khan 2012).

Układ odpornościowy błony śluzowej można również zrozumieć, analizując próbki kału. W niedawnym badaniu wykazano, że szczególna przewaga bakterii, takich jak Bifidobacterium sp., może wzmacniać rozwój grasicy i odpowiedzi immunologiczne na szczepionki doustne i pozajelitowe we wczesnym okresie niemowlęcym, podczas gdy odchylenie od tego wzorca, skutkujące większą różnorodnością bakterii, może powodować ogólnoustrojowe zapalenie (neutrofilię) i słabszą odpowiedź na szczepionkę. Zatem odpowiedź na szczepionkę można poprawić poprzez promowanie jelitowych Bifidobacteria sp. oraz minimalizowanie dysbiozy we wczesnym okresie niemowlęcym (Huda, Lewis i in. 2014). Warto zauważyć, że cechą charakterystyczną odpowiednich odpowiedzi immunologicznych błon śluzowych jest wytwarzanie wydzielniczej immunoglobuliny A (SIgA), która może zapobiegać infekcji i usuwać antygen przekraczający barierę śluzówkową. SIgA jest również konieczne do ustanowienia wzajemnego oddziaływania między gospodarzem a mikroflorą jelitową (Maynard, Elson i in. al.2012). Dlatego pomiar SIgA może pomóc w ocenie odporności błony śluzowej.

Mimo że próbki śliny i kału są coraz częściej badane w celu oceny odpowiedzi immunologicznej błony śluzowej i/lub wyników klinicznych, nadal brakuje ustalonej metodologii, która mogłaby być rutynowo stosowana w laboratoriach diagnostycznych i badaniach klinicznych. Dlatego naszym celem jest pobranie próbek śliny i kału za pomocą wymazówki salimetrycznej i zestawu do samodzielnego pobierania kału od kohorty 60 ochotników, przetwarzanie i przechowywanie próbek w znormalizowany sposób. Następnie zamierzamy przeprowadzić testy immunologiczne, takie jak test immunoenzymatyczny, test multipleksowych perełek i Immunocap, aby skorelować poziomy biomarkerów w ślinie i kale u zdrowych dawców. Ponieważ jest to metoda nieinwazyjna, wierzymy, że więcej osób będzie chciało oddać próbki. Jest również łatwy do samodzielnego zbierania i opłacalny.