Agregacja płytek krwi u pacjentów z Covid-19

Do tego obserwacyjnego badania kliniczno-kontrolnego włączono 50 dorosłych pacjentów z dodatnim wynikiem testu PCR na obecność wirusa Covid-19, rekrutowanych z oddziału izolacji szpitala uniwersyteckiego w Mansoura w okresie od lipca 2021 r. do maja 2022 r. jako grupę badaną, a grupa kontrolna obejmowała 25 zdrowych osób bez historii ani objawów COVID -19 i negatywny test PCR, dopasowany do grupy badanej pod względem zmiennych demograficznych i chorób współistniejących.

Protokół tego badania został zatwierdzony przez Instytucjonalną Radę ds. Badań Wydziału Lekarskiego Uniwersytetu Mansoura (nr kodu: MS.21.07.1596), a od wszystkich pacjentów uzyskano pisemną świadomą zgodę na włączenie do tego badania.

Celem tego badania była ocena agregacji płytek krwi za pomocą agregometrii transmisji światła i difosforanu adenozyny (ADP) jako agonisty u pacjentów z COVID-19 w porównaniu z grupą kontrolną osób zdrowych.

Pacjenci:

Kryteria przyjęcia:

Wiek ≥ 18 lat.

Grupa badana: Przypadki potwierdzone dodatnim testem PCR w pierwszym tygodniu od rozpoznania choroby COVID-19 ze zmianami w tomografii komputerowej w przebiegu choroby Covid-19 o dowolnym stopniu nasilenia według WHO, (2020) jako:

Łagodne przypadki: łagodne objawy kliniczne i brak wyników badań obrazowych zapalenia płuc. Umiarkowane przypadki: gorączka, objawy ze strony układu oddechowego i nieprawidłowości radiologiczne w przebiegu COVID-19.

Ciężkie przypadki: spełniają którekolwiek z poniższych kryteriów; SpO2 < 93%, PaO2 /FiO2 < 300, częstość oddechów równa lub większa niż 30 oddechów/min lub naciek płuc większy niż 50%, w tym GGO lub konsolidacja.

Krytycznie chore przypadki: niewydolność oddechowa, konieczność inwazyjnego MV, wstrząs septyczny i/lub dysfunkcja wielonarządowa.

Kryteria wyłączenia:

Wykluczono następujących pacjentów:

Pacjenci z trombocytopenią i trombocytozą definiowaną jako liczba płytek krwi mniejsza niż 100 000/µl, liczba odpowiednio większa niż 450 000/µl Pacjenci z nieprawidłowościami hematokrytu mniejszymi niż 34% lub większymi niż 55% Pacjenci z rozsianym wykrzepianiem wewnątrznaczyniowym (DIC) Aktywny nowotwór złośliwy Choroba wątroby jako taka przewlekłe zapalenie wątroby, marskość wątroby lub niewydolność komórek wątroby. Wszelkie zaburzenia hematologiczne, takie jak hemofilia lub talasemia. Pacjenci poddawani inwazyjnej wentylacji mechanicznej, takiej jak intubacja dotchawicza, i sama wentylacja mechaniczna są czynnikami wpływającymi na wyższą średnią objętość płytek krwi (MPV), co oznacza, że ​​płytki krwi są większe niż przeciętnie, są bardziej przyczepne i podatne na agregację in vitro. Pacjenci przyjmujący aspirynę, niesteroidowe leki przeciwzapalne, leki przeciwpłytkowe lub inne leki mogące wpływać na czynność płytek krwi (14 dni przed pobraniem krwi)

Grupa kontrolna: zdrowi ochotnicy, osoby bez historii i objawów sugerujących zakażenie Covid-19, z ujemnym wynikiem testu PCR na obecność wirusa Covid-19 i bez tomografii komputerowej. Zmiany w klatce piersiowej sugerujące zakażenie wirusem Covid-19. Dopasowano ich również do grupy badanej pod względem zmiennych demograficznych i chorób współistniejących. Metody:

Wszyscy pacjenci zostali poddani następującym zabiegom:

1. Pełny wywiad ze szczególnym uwzględnieniem: danych demograficznych (wiek i płeć), historii palenia tytoniu i chorób współistniejących, takich jak przewlekła obturacyjna choroba płuc, nadciśnienie, cukrzyca, choroba niedokrwienna serca, astma oskrzelowa, udar mózgu i nowotwory złośliwe. Objawy sugerujące COVID-19 to duszność, kaszel, odkrztuszanie, krwioplucie, gorączka, bóle kości, ból gardła, utrata smaku, brak węchu, biegunka i ból głowy.
2. Ogólne i miejscowe badanie klatki piersiowej.

3. Badania laboratoryjne takie jak:

   1. Pełna morfologia krwi (CBC)
   2. Testy czynności wątroby (ALT, AST i albumina w surowicy)
   3. Kreatynina w surowicy • Międzynarodowy współczynnik znormalizowany (INR).
   4. Markery stanu zapalnego, takie jak (dehydrogenaza mleczanowa (LDH), białko C-reaktywne (CRP), D-dimer i ferrytyna w surowicy)

4. Ocena radiologiczna (TK klatki piersiowej):

   I. Opis albo konsolidacja, albo zmętnienie matowego szkła według Hansella i in. (2008).

   II. Skalę ciężkości CT oceniano według Bernheima i wsp. (2020), w którym każdy z pięciu płatów płuc został oceniony i oceniony pod kątem stopnia zajęcia i sklasyfikowany jako: wynik 0, brak zajęcia (0% dotkniętych); 1, minimalne (1% -25%); 2, łagodny (26% -50%); 3, umiarkowany (51%-75%); i 4, ciężki (76% -100%). Całkowity wynik nasilenia uzyskano poprzez zsumowanie wyników pięciu płatów w zakresie od 0 do 20. Wynik 1–5 oceniono jako „minimalny”, 6–10 jako „łagodny”, 11–15 jako „umiarkowany”, a 16–20 jako „poważny”.

5. Działanie agregacji płytek krwi:

   1. Stosowany odczynnik: W tym badaniu zastosowano difosforan adenozyny (ADP) jako agonistę w celu wzmocnienia i oceny agregacji płytek krwi. Jest to liofilizowany preparat adenozyno-5'-difosforanu. Robocze stężenie odtworzonego odczynnika wynosi 200 µM.
   2. Urządzenie do agregacji: agregometr przepuszczalności światła płytek krwi (agregometr marki PAP-8E). Jest produkowana przez firmę Bio/Data Corporation w USA, posiada programowalną pipetę elektroniczną ze stacją ładującą, 8 kanałami testowymi oraz komputer z monitorem.
   3. Procedurę testową wykonano według Hvas i Favaloro (2017)

6. Miary wyników:

   1. Opracowanie nowego zdarzenia zakrzepowo-zatorowego w postaci zakrzepicy tętniczej lub żylnej, takiego jak ostry zawał mięśnia sercowego (AMI), udar mózgu i płucna choroba zakrzepowo-zatorowa podczas hospitalizacji oraz określenie rodzaju tego zdarzenia.
   2. Konieczność inwazyjnej wentylacji mechanicznej (MV).
   3. Długość pobytu w szpitalu (w dniach), w tym mniej więcej 7 dni.
   4. Wskaźnik śmiertelności.