Expressão de Metaloproteinases de Matriz na Hiperplasia Neointimal Induzida por Implante de Stent Eluidor de Drogas (DES)

Materiais e métodos Sujeitos (pacientes) Os pacientes derivados de uma população de pacientes encaminhados para angiografia coronária de acompanhamento de 12 meses para doença isquêmica do coração que podem ser realizados IVUS serão incluídos no presente estudo, entre dezembro de 2017 e dezembro de 2018. O estudo foi um projeto multifacetado envolvendo inclusão consecutiva de pacientes com angina estável ou síndrome coronariana aguda que apresentavam pelo menos 1 lesão coronariana (definida como uma estenose de >50%) adequada para implantação de stent 9 meses antes. A angiografia coronária de acompanhamento foi realizada de acordo com técnicas padrão apenas por intervencionistas experientes. A reestenose intra-stent foi definida como uma estenose de diâmetro ≥50% do diâmetro de referência do vaso por avaliação visual no local da lesão tratada com o stent observada em ≥1 projeções múltiplas. A visão única mais grave foi usada para categorizar o padrão de reestenose conforme proposto por Mehran et al para classificação de lesões reestenoticas intra-stent. Detalhes demográficos detalhados, incluindo medidas antropométricas, fatores de risco cardiovascular e uso de medicamentos foram registrados para os participantes.

Análise angiográfica (análise QCA) A análise angiográfica coronariana quantitativa off-line foi realizada com um sistema automatizado de detecção de bordas (QCA-CMS versão 6.0, Medis, Medical Imaging Systems, Leiden, Holanda). A ponta do cateter não cônica preenchida com contraste foi usada para calibração. O diâmetro de referência foi medido por interpolação. O diâmetro mínimo do lúmen (antes e depois da ICP) e o diâmetro da estenose (antes e após a ICP) foram medidos dentro do stent e nas bordas proximal e distal de 5 mm do stent. Além disso, medimos o tamanho do vaso, o comprimento da lesão e o comprimento do segmento com stent. Todas as análises foram realizadas pelo mesmo investigador que desconhecia todos os resultados laboratoriais.

Imagem e análise de IVUS A imagem de IVUS foi realizada após a administração intracoronária de 0,2 mg de nitroglicerina, usando um transdutor motorizado (0,5 mm/s) e um scanner comercial (Boston Scientific/SCIMED, Minneapolis, MN) que consiste em um transdutor rotativo de 40 MHz dentro uma bainha de imagem de 3,2 Fr. A decisão de realizar IVUS ficou a critério do operador. Todos os dados do IVUS foram avaliados off-line por profissionais experientes que desconheciam o tipo de stent alocado ou as informações clínicas. Usando planimetria computadorizada (EchoPlaque 2.7, Indec Systems, Mountain View, CA), stent e segmentos de referência foram avaliados a cada 1 mm. As medições intra-stent foram obtidas a cada 1 mm e incluíram áreas e volumes de EEM, stent, lúmen intra-stent, placa + mídia peristent (EEM menos stent) e IH (stent menos lúmen intra-stent). O percentual de IH foi definido como IH dividido por stent. Todos os volumes foram calculados usando a regra de Simpson e depois normalizados pelo comprimento do stent (volume normalizado).

Amostras de sangue As amostras de sangue foram coletadas em condições de jejum diretamente antes da angiografia de acompanhamento. O sangue arterial foi coletado das artérias coronárias para tubos separadores de soro e as amostras de soro foram deixadas coagular por 30 minutos antes da centrifugação a 1.000 g por 10 minutos e armazenadas a -70°C até o uso.

Medição laboratorial MMP-2 e MMP-9 endógenas foram medidos no soro usando um ensaio imunossorvente ligado a enzima padronizado (ELISA; sistemas de P&D). Este sistema mede a atividade endógena das MMPs específicas.

Estimativas do tamanho da amostra:

O cálculo do tamanho da amostra foi baseado na hipótese nula de que a atividade das MMP-2 e/ou -9 não apresentou correlação com o volume da hiperplasia neointimal. Usando a fórmula de Lachin, cálculos de tamanho de amostra foram realizados para mostrar o coeficiente de correlação esperado (r) maior que 0,40 entre os dois grupos, alfa bilateral de 0,05 e 80% de poder estatístico. Finalmente, 47 pacientes foram calculados.

Análise estatística:

Variáveis ​​contínuas são expressas como média±DP. As variáveis ​​categóricas são resumidas como contagens e porcentagens e foram comparadas pelo teste qui-quadrado ou pelo teste exato de Fisher. Os níveis séricos de MMPs foram comparados pelo teste t de Student ou pelo teste U de Mann-Whitney. A correlação de Pearson foi usada para correlacionar os níveis de MMP com o volume de hiperplasia neointimal. A regressão logística múltipla foi utilizada para avaliar a interação entre as variáveis ​​e as MMPs em correlação com o volume da hiperplasia neointimal e a reestenose intra-stent. Um procedimento de entrada gradual foi aplicado para identificar fatores de confusão significativos ou sugestivos (p < 0,1) de qualquer grupo de pacientes ou nível de MMP. As razões de chances foram expressas com intervalos de confiança de 95%. Um valor de p inferior a 0,05 foi considerado estatisticamente significativo. Todas as análises estatísticas foram realizadas com o pacote de software estatístico SPSS versão 12.0 (SPSS, Inc., Chicago, Illinois). Os autores tiveram pleno acesso aos dados e se responsabilizam por sua integridade. Todos os autores leram e concordam com o manuscrito conforme escrito.