Efeito de um produto de soja fermentado na cognição, estado imunológico e vacina (IS)

Experimental: Q CAN MAIS PÓ

QCAN PLUS POWDER: 2 saquetas por dia, cada saqueta contém (12-15 gramas de pó de soja fermentado)

Suplemento dietético: Q PODE MAIS

Pó ativo com soja fermentada, 2 saquetas por dia, cada saqueta contém 12-15 g de soja fermentada

Comparador de Placebo: Placebo

Proteína de arroz integral germinada com sabor (fornecida pela BESO Biological Research Inc.)

Suplemento dietético: Placebo

Maltodextrina em pó com Whey protein e sabor (fornecido pela BESO Biological Research, Inc.)

Alterações nas medições do estado imunológico

As medições do estado imunológico serão realizadas usando testes estáticos e funcionais em sangue total, soro e células mononucleares do sangue periférico (PBMC). A flebotomia para obter as amostras necessárias será realizada na linha de base (semana 0) e em 16 semanas. Alterações no estado imunológico incluem alterações em: (a) atividade de linfócitos e produção de citocinas (b) atividade de células assassinas naturais, (c) subconjuntos de linfócitos e (d) marcadores inflamatórios e citocinas.

Alterações na atividade dos linfócitos e na produção de citocinas

A atividade dos linfócitos e a produção de citocinas serão medidas por imunoensaio enzimático (ELISA) e citometria de fluxo. Células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) serão incubadas e estimuladas com ou sem fitohemaglutinina (PHA) ou lipopolissacarídeo (LPS) e os fluidos sobrenadantes da cultura coletados e testados por ELISA para as seguintes citocinas: fator estimulador de colônia de macrófagos de granulócitos (GM-CSF) , fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), interferon gama (IFN-γ), interleucina 1 beta (IL-1β), interleucina 2 (IL-2), interleucina 6 (IL-6) e interleucina 10 (IL- 10).

Alterações na atividade das células natural killer (NK)

O ensaio de degranulação NK será realizado em amostras de sangue. O teste será realizado usando um método de citometria de fluxo modificado que mede a expressão de CD107a.

Alterações nos subconjuntos de linfócitos

A imunofenotipagem será realizada em PBMCs criopreservadas usando uma citometria de fluxo. Serão medidos os seguintes marcadores: células T citotóxicas (Tc; CD3+CD8+), células T auxiliares (Th; CD3+CD4+), células B (CD19+), células NK (NK; CD3-CD16+) e células T regulatórias ( Treg; CD3+CD4+CD25+Foxp3+).

Alterações nos fatores inflamatórios e citocinas

Marcadores inflamatórios no soro serão medidos por ELISA e incluirão proteína C-reativa (PCR), E-selectina, Pentraxina 3, Rantes, MCP-1 e Eotaxina.

A imunofenotipagem será realizada em PBMCs criopreservadas usando uma citometria de fluxo. Serão medidos os seguintes marcadores: células T citotóxicas (Tc; CD3+CD8+), células T auxiliares (Th; CD3+CD4+), células B (CD19+), células NK (NK; CD3-CD16+) e células T regulatórias ( Treg; CD3+CD4+CD25+Foxp3+). A caracterização adicional de células T com base em fenótipos virgens e de memória será determinada por padrões correspondentes na expressão de CD45RA, CD45RO e CD62L, enquanto diferentes subpopulações de Tregs serão ainda diferenciadas por expressões de GITR, CTLA-4 e LAG-3

Alterações no hemograma completo (CBC) e contagem diferencial

O CBC e as contagens diferenciais serão realizados em sangue total com o uso de um analisador hematológico automatizado em uma instalação clínica certificada.

A imunofenotipagem será realizada em PBMCs criopreservadas usando uma citometria de fluxo. Serão medidos os seguintes marcadores: células T citotóxicas (Tc; CD3+CD8+), células T auxiliares (Th; CD3+CD4+), células B (CD19+), células NK (NK; CD3-CD16+) e células T regulatórias ( Treg; CD3+CD4+CD25+Foxp3+). A caracterização adicional de células T com base em fenótipos virgens e de memória será determinada por padrões correspondentes na expressão de CD45RA, CD45RO e CD62L, enquanto diferentes subpopulações de Tregs serão ainda diferenciadas por expressões de GITR, CTLA-4 e LAG-3

Alterações nos títulos de anticorpos neutralizantes contra hemaglutinina e neuraminidase da cepa vacinal.

Os títulos de anticorpos neutralizantes no soro contra a hemaglutinina e neuraminidase da cepa vacinal serão medidos usando os kits ELISA comerciais padrão.

Alterações na carga viral em resposta à vacinação

A carga viral no sangue será medida usando um protocolo quantitativo de reação em cadeia da polimerase (qPCR) conforme descrito por Ward CL, et al. (2004).

Alterações da linha de base na pontuação composta cognitiva global

A pontuação composta será calculada usando as pontuações dos testes listados abaixo. Calcularemos as pontuações padronizadas de cada teste como a pontuação de cada participante menos a média do grupo e dividiremos por seu desvio padrão. A pontuação composta é a média das pontuações padronizadas.

Os 12 testes são: Rey Auditory Verbal Learning Test (RAVLT), Rey-Osterrieth Complex Figure (ROCF), Semantic Fluency (Animals), Boston Naming Test (BNT), Visual Object and Space Perception Battery (VOSP), Block Design section from Escala Wechsler de Inteligência para Adultos (WAIS-III), Teste de Trilhas (TMT), FAS Word Fluency, Stroop Color Word Test, Symbol Digit Modalities Test (SMDT) Digit Span do WAIS-III e Conners Continuous Performance Test (CPT-II ).

Alterações na pontuação do questionário de infecção respiratória superior

As infecções do trato respiratório superior serão rastreadas usando o questionário de Jackson e Dowling, conforme adaptado e publicado por Martineau et al. (2015). O questionário será preenchido diariamente pelos participantes, manualmente ou eletronicamente, durante o período de estudo de 20 semanas