Hodnocení karotických IMT a aterogenních rizikových faktorů u pacientů s cerebrotendinózní xantomatózou (CTX)

Protokol 09-2009 HODNOCENÍ KRAOTIDNÍ IMT A ATEROGENNÍCH RIZIKOVÝCH FAKTORŮ U PACIENTŮ S CEREBROTENDINOZNÍ XANTOMATÓZOU

ABSTRAKT Cerebrotendinózní xantomatóza (CTX) je vzácné onemocnění charakterizované xantomatózními lézemi v mnoha tkáních, především v mozku. Mutace v genu sterol-27-hydroxylázy-enzymu při syntéze žlučových kyselin způsobuje CTX. Porucha syntézy kyseliny chenodeoxycholové z cholesterolu má za následek zvýšení plazmatického a žlučového cholestanolu.

Přirozeným průběhem CTX je progresivní neurologické zhoršování od dětství do dospělosti vedoucí k difuznímu poškození centrálního a periferního nervového systému a nakonec ke smrti.

Kardiovaskulární postižení u CTX je pravděpodobně vysoké: různé klinické projevy kardiovaskulárního onemocnění (CVD) byly hlášeny u 10,4 % pacientů s CTX. Přesný mechanismus aterosklerózy u CTX není znám a může souviset s akumulací cholestanolu ve vaskulárním subendoteliálním prostoru.

Abnormality v lipoproteinovém profilu nebyly v literatuře popsány a hladiny cholesterolu jsou v CTX v normálních mezích. Rozsáhlé hodnocení rizikových faktorů KVO ve skupině pacientů s CTX nebylo kromě malého počtu publikací provedeno.

Cílem navrhované studie je zhodnotit riziko kardiovaskulárních onemocnění a „aterogenních“ vlastností séra u CTX a stanovit preklinickou aterosklerózu. Studie bude zahrnovat rozsáhlé hodnocení lipoproteinového profilu a měření tloušťky intima-media karotid (cIMT).

Lipidové a lipoproteinové profily budou zahrnovat nové testy, jako jsou přímá měření plazmatických hladin apolipoproteinu A1,B,C2,C3, hladin lipoproteinu (a), vysoce citlivých hladin C-reaktivního proteinu a PLAC test, který měří hladiny fosfolipázy A2 spojené s lipoproteinem - vaskulárně specifický zánětlivý enzym, který se podílí na tvorbě aterosklerózy.

Jednalo by se o první pokus provést tak rozsáhlé hodnocení ve skupině pacientů s CTX.

Výzkumný plán:

Návrh a metody studie

Subjekty Populace studie bude tvořit všech 17 pacientů s diagnostikovaným CTX, kteří budou rekrutováni z CTX ambulance na Klinice Parkinsonovy choroby a pohybových poruch v Sagol Neuroscience Center, v Chaim Sheba Medical Center. Pacienti budou kontaktováni telefonicky a e-mailem a budou vyzváni k účasti.

Kontrolní skupina se bude skládat ze zdravých jedinců stejného věku a pohlaví. Všichni pacienti nebo jejich zákonní zástupci podepíší informovaný souhlas.

Podrobný plán studie

Všichni účastníci studie podstoupí hodnocení, které bude zahrnovat jednu návštěvu kliniky:

Návštěva 1

• Podrobná zdravotní anamnéza, včetně demografických údajů, anamnéza v minulosti, historie kouření, užívání léků a rodinná anamnéza dyslipidemie a aterosklerotického kardiovaskulárního onemocnění.
• Fyzikální vyšetření včetně měření výšky a hmotnosti, krevního tlaku, BMI, obvodu pasu a boků.

• Vzorky krve

  1. Profil lipidů nalačno:

     Celkový cholesterol, HDL-cholesterol, přímý LDL-cholesterol a triglyceridy (TG)

  2. Profil apolipoproteinu:
  1. apolipoprotein A1
  2. apolipoprotein B
  3. apolipoprotein C2
  4. apolipoprotein C3

  C. lipoprotein (a) [Lp(a)] d. C-reaktivní protein -hsCRP e. Fosfolipáza A2 spojená s lipoproteinem (Lp-PLA2) f. Apo E genotypizace g. Hladina cholesterolu v plazmě h. Plazmatická glukóza a inzulín nalačno

• 12svodový elektrokardiogram (EKG)
• posouzení cIMT.

Metody:

• Laboratorní studie
• Vzorky krve budou odebrány po celonočním hladovění
• Celkový cholesterol, HDL-cholesterol a TG v plazmě budou stanoveny kolorimetrickými enzymatickými postupy (Olympus, Irsko).
• Koncentrace apolipoproteinu A1, B, C2, C3 a Lp(a) v séru budou stanoveny imunoturbidimetrickou metodou. (Olympus, Irsko).
• Přímý LDL- bude stanoven enzymatickým barevným testem. (Olympus, Irsko).
• HsCRP – bude stanoven turbidimetrickým imunotestem (Olympus, Irsko)
• Lp-PLA2 (PLAC® Test) – Test PLAC měří Lp-PLA2 (fosfolipáza A2 spojená s lipoproteinem), vaskulárně specifický zánětlivý enzym, který se podílí na tvorbě plaku náchylného k prasknutí. Turbidimetrická imunoanalýza pro kvantitativní stanovení Lp-PLA2 v lidské plazmě (diaDexus, Inc. CA .USA) Pro všechna výše uvedená měření bude použit autoanalyzátor Olympus AU 400.
• Apo E genotypování - Apo E genotypy genomové DNA z krve budou stanoveny testem Elisa prodlužujícím jeden nukleotidový primer. (Pronto Diagnostics, Tel Aviv, Izrael)
• Plazmatická hladina cholestanolu – bude měřena vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií s ultrafialovou detekcí (Halperin et al, ref 10)
• Glukóza - bude měřena glukózooxidázovou metodou (Olympus AU2700, Hamburg, Německo).
• Inzulin- bude měřen chemiluminiscenční imunometrickou metodou (Immulite 2000, Diagnostic Products Corporation, Los Angeles, CA).
• Bude proveden EKG-12 svodový elektrokardiogram. (Mac 1100, GE medical systems, Německo)

Tloušťka intimy karotidové tepny: Pacienti podstoupí barevně odlišené duplexní vyšetření krčních cév pomocí 10MHz lineárního ultrazvuku (Hitachi medical corporation, Tokio, Japonsko). IMT bude hodnocena na společných karotidách (CCA) nad ≈ 1,5 cm proximálně k rozdělovači průtoku podle standardizovaných pokynů. Stručně řečeno, IMT bude měřena v nejtlustším místě bez plaku na blízké a vzdálené stěně pomocí speciálně navrženého počítačového programu. Tloušťka stěny CCA bude definována jako průměr maximální tloušťky stěny blízké a vzdálené stěny oboustranně. Budou získány ultrazvukové snímky distálního 1 cm vzdálené stěny každé společné karotidy a porovnány s hodnotami z normativního souboru dat (věk a pohlaví se shodují). Budou uvedeny průměrné hodnoty CIMT ze vzdálenějších stěn pravé a levé společné karotidy