Ocena IMT tętnicy szyjnej i aterogennych czynników ryzyka u pacjentów z Xantomatozą mózgowo-ścięgnistą (CTX)

Protokół 09-2009 OCENA IMT I ATHEROGENNYCH CZYNNIKÓW RYZYKA IMT SZYI SZYJNEJ U PACJENTÓW Z XANTOMATOTOZĄ MÓZGOWĄ

STRESZCZENIE Ksantomatoza mózgowo-ścięgnista (CTX) jest rzadką chorobą charakteryzującą się występowaniem zmian ksantomatycznych w wielu tkankach, głównie w mózgu. Mutacja w genie 27-hydroksylazy sterolowej - enzymu syntezy kwasów żółciowych powoduje CTX. Zaburzona synteza kwasu chenodeoksycholowego z cholesterolu skutkuje podwyższonym stężeniem cholestanolu w osoczu i żółci.

Naturalnym przebiegiem CTX jest postępująca degradacja neurologiczna od dzieciństwa do dorosłości, prowadząca do rozlanych uszkodzeń ośrodkowego i obwodowego układu nerwowego, a ostatecznie do śmierci.

Zajęcie układu sercowo-naczyniowego w CTX jest prawdopodobnie duże: różne objawy kliniczne choroby sercowo-naczyniowej (CVD) zgłoszono u 10,4% pacjentów z CTX. Dokładny mechanizm miażdżycy w CTX nie jest znany i może być związany z gromadzeniem się cholestanolu w przestrzeni podśródbłonkowej naczyń.

Nieprawidłowości w profilu lipoproteinowym nie zostały opisane w piśmiennictwie, a poziom cholesterolu w CTX mieści się w granicach normy. Poza niewielką liczbą publikacji nie przeprowadzono obszernej oceny czynników ryzyka CVD w grupie pacjentów otrzymujących CTX.

Celem proponowanej pracy jest ocena ryzyka chorób sercowo-naczyniowych i cech „miażdżycogennych” surowicy w CTX oraz określenie przedklinicznej miażdżycy. Badanie obejmie obszerną ocenę profilu lipoprotein oraz pomiar grubości błony wewnętrznej i środkowej tętnicy szyjnej (cIMT).

Profile lipidów i lipoprotein będą obejmować nowe testy, takie jak bezpośrednie pomiary poziomów apolipoprotein A1, B, C2, C3 w osoczu, poziomów lipoproteiny (a), wysoce czułych poziomów białka C-reaktywnego oraz test PLAC, który mierzy poziomy fosfolipazy A2 związanej z lipoproteinami -specyficzny dla naczyń enzym zapalny biorący udział w powstawaniu miażdżycy tętnic.

Byłaby to pierwsza próba przeprowadzenia tak obszernej oceny w grupie pacjentów z CTX.

Plan badań:

Projekt badania i metody

Osoby badane Populacja badana będzie się składać ze wszystkich 17 pacjentów z rozpoznaniem CTX, którzy zostaną zrekrutowani z poradni CTX w Klinice choroby Parkinsona i zaburzeń ruchu w Sagol Neuroscience Center, w Chaim Sheba Medical Center. Pacjenci będą kontaktowani telefonicznie i mailowo i zapraszani do udziału.

Grupa kontrolna będzie składać się ze zdrowych osób dobranych pod względem wieku i płci. Wszyscy pacjenci lub ich opiekunowie prawni podpiszą świadomą zgodę.

Szczegółowy Plan Studium

Wszyscy uczestnicy badania zostaną poddani ocenie, która obejmie jedną wizytę w klinice:

Odwiedź 1

• Szczegółowa historia medyczna, w tym dane demograficzne, przebyta historia medyczna, historia palenia tytoniu, stosowania leków oraz rodzinna historia dyslipidemii i miażdżycowej choroby sercowo-naczyniowej.
• Badanie fizykalne, w tym pomiary wzrostu i masy ciała, ciśnienie krwi, BMI, obwód talii i bioder.

• Próbki krwi

  1. Profil lipidowy na czczo:

     Cholesterol całkowity, cholesterol HDL, cholesterol bezpośredni LDL i trójglicerydy (TG)

  2. Profil apolipoproteiny:
  1. apolipoproteina A1
  2. apolipoproteina B
  3. apolipoproteina C2
  4. apolipoproteina C3

  C. lipoproteina (a) [Lp(a)] d. Białko C-reaktywne -hsCRP e. Fosfolipaza A2 związana z lipoproteinami (Lp-PLA2) f. Genotypowanie Apo E g. Poziom cholesterolu w osoczu godz. Glukoza w osoczu na czczo i insulina

• 12-odprowadzeniowy elektrokardiogram (EKG)
• ocena cIMT.

Metody:

• Badania laboratoryjne
• Próbki krwi zostaną pobrane po całonocnym poście
• Całkowity cholesterol, HDL-cholesterol i TG w osoczu zostaną określone za pomocą kolorymetrycznych procedur enzymatycznych (Olympus, Irlandia).
• Stężenia apolipoprotein A1, B, C2, C3 i Lp(a) w surowicy zostaną określone za pomocą procedury immunoturbidymetrycznej. (Olympus, Irlandia).
• Bezpośredni LDL- zostanie określony za pomocą enzymatycznego testu barwnego. (Olympus, Irlandia).
• HsCRP- zostanie określone za pomocą turbidymetrycznego testu immunologicznego (Olympus, Irlandia)
• Lp-PLA2 (test PLAC®) — test PLAC mierzy poziom Lp-PLA2 (fosfolipazy A2 związanej z lipoproteinami), specyficznego dla naczyń enzymu zapalnego biorącego udział w tworzeniu płytek podatnych na pękanie. Turbidymetryczny test immunologiczny do ilościowego oznaczania Lp-PLA2 w ludzkim osoczu (diaDexus, Inc. CA .USA) Do wszystkich wyżej wymienionych pomiarów zostanie użyty analizator automatyczny Olympus AU 400.
• Genotypowanie Apo E – genotypy Apo E genomowego DNA z krwi zostaną określone za pomocą testu Elisa z wydłużaniem pojedynczego nukleotydu startera. (Pronto Diagnostics, Tel Awiw, Izrael)
• Poziom cholestanolu w osoczu – będzie mierzony za pomocą wysokosprawnej chromatografii cieczowej z detekcją ultrafioletową (Halperin i wsp., ref. 10)
• Glukoza – zostanie zmierzona metodą oksydazy glukozy (Olympus AU2700, Hamburg, Niemcy).
• Insulina będzie mierzona chemiluminescencyjną metodą immunometryczną (Immulite 2000, Diagnostic Products Corporation, Los Angeles, CA).
• Zostanie wykonany elektrokardiogram odprowadzenia EKG-12. (Mac 1100, systemy medyczne GE, Niemcy)

Grubość błony wewnętrznej i środkowej tętnicy szyjnej: Pacjenci zostaną poddani badaniu dwustronnemu naczyń szyi kodowanym kolorami przy użyciu ultrasonografii liniowej 10 MHz (korporacja medyczna Hitachi, Tokio, Japonia). IMT zostanie oceniona na tętnicach szyjnych wspólnych (CCA) w odległości ≈1,5 cm proksymalnie od rozdzielacza przepływu, zgodnie ze standardowymi wytycznymi. Krótko mówiąc, IMT będzie mierzona w najgrubszym miejscu wolnym od płytki nazębnej na bliższej i dalszej ścianie za pomocą specjalnie zaprojektowanego programu komputerowego. Grubość ścianki CCA zostanie zdefiniowana jako średnia maksymalnej grubości ścianki bliższej i dalszej obustronnie. Uzyskane zostaną obrazy ultrasonograficzne dystalnego 1 cm dalszej ściany każdej tętnicy szyjnej wspólnej i porównane z wartościami z normatywnego zestawu danych (dopasowany wiek i płeć). Podane zostaną średnie wartości CIMT z odległych ścian prawej i lewej tętnicy szyjnej wspólnej