Kombinace přípravné chemoterapie s imunoterapií zabíječskými buňkami indukovanými cytokiny (CIK)

Rakovina plic se stala jednou z hlavních příčin úmrtí souvisejících s rakovinou, se zvyšující se nemocností a úmrtností. A nemalobuněčný karcinom plic (NSCLC) představuje asi 85 % všech pacientů s rakovinou plic. Přestože se klinicky používá stále více molekulových cílových terapií, celkové léčebné účinky nesplňují očekávání. Je naléhavé prozkoumat nové léčebné režimy.

Chemoterapie je hlavní modalitou pro léčbu pokročilého NSCLC, avšak účinek chemoterapie u NSCLC dosáhl plató. Kombinace chemoterapie s jinými terapiemi je nejperspektivnější orientací ve výzkumu léčby rakoviny. Bylo široce přijímáno, že mezi chemoterapií a imunoterapií existuje konfliktní vztah, protože chemoterapeutika mohou zničit imunitní systém. Bylo však přesvědčeno, že chemoterapie může modulovat supresivní imunitní mikroprostředí a up-regulovat imunogenicitu rakovinných buněk a následně zvýšit protinádorové účinky imunitního systému. Tradiční chemoterapeutika nejsou jen cytotoxická léčiva, ale také regulátory imunity. Stále více důkazů ukazuje, že kombinace chemoterapie a imunoterapie by vykazovala účinnější protinádorové výsledky.

Adoptivní buněčná imunoterapie je jedním z nejperspektivnějších způsobů léčby v boji proti rakovině. Buňky CIK jsou heterogenní buněčné populace odvozené z lidské periferní krve nebo myší sleziny po in vitro expanzi s interferonem-y, interleukinem-2 a protilátkami anti-CD3. Buňky CIK zprostředkovávají silnou cytotoxicitu bez omezení hlavního histokompatibilního komplexu (MHC) proti řadě nádorových buněk a mohou rozpoznat a zabít nádorové buňky bez předchozí expozice nebo aktivace. V hromadné kultuře in vitro expandovaných CIK buněk lze rozlišit dvě hlavní subpopulace, z nichž jedna koexprimuje CD3 a klastr diferenciačních 56(CD56) molekul (CD3+CD56+), zatímco druhá prezentuje fenotyp CD3+CD56-. Bylo popsáno, že protinádorová aktivita buněk CIK je omezena hlavně na buňky CD3+CD56+. Adoptivní přenos buněk CIK, jedna z adoptivní imunoterapie, představuje slibnou netoxickou protinádorovou terapii v léčbě solidních nádorů refrakterních na konvenční terapie. V klinických studiích však terapeutická aktivita přenosu buněk CIK není tak účinná, jak se očekávalo, což může být způsobeno abnormálním mikroprostředím nádoru, které brání infiltraci buněk CIK a cytotoxicitě. Je tedy naléhavé najít účinnou terapii pro zvýšení účinnosti adoptivních buněk CIK, aby se zlepšil klinický účinek u pacientů s rakovinou.

Nádorová imunoterapie čelí mnoha výzvám, jako je systémová imunitní tolerance a lokální imunitní únik nádoru. Při vývoji imunitního systému jsou všechny T buňky s vysokou afinitou k vlastnímu antigenu odstraněny negativní selekcí v brzlíku, stejně jako T buňky vázající se na vlastní antigen exprimovaný nádorovými buňkami. Imunitní supresivní buňky jsou však důležitější pro vyhýbání se nádorové imunitě, ve které hrají centrální roli regulační T buňky (Treg buňky). T regulační buňky jsou součástí imunitního systému, který potlačuje imunitní reakce jiných buněk. Jde o důležitou „samokontrolu“ zabudovanou do imunitního systému, aby se předešlo nadměrným reakcím. Regulační T buňky se vyskytují v mnoha formách, z nichž nejznámější jsou ty, které exprimují shluk diferenciace 4 (CD4), shluk diferenciace 25 (CD25), Foxp3, cytotoxickou T-lymfocyty asociovanou molekulu-4 (CTLA-4) a glukokortikoidy- indukovaný receptor faktoru nekrózy nádorů (GITR). Přesné mechanismy účinku buněk Treg jsou dosud nejasné, což se předpokládá včetně kontaktu buňka-buňka a sekretovaných cytokinů (IL-10, transformující růstový faktor (TGF)-β). Kromě toho existují některé další imunosupresivní buňky, jako je myeloidně odvozený supresor (MDSC), který hraje důležitou roli v imunitním úniku rakoviny. Nádorové buňky samy o sobě mohou také inhibovat protirakovinnou imunoreakci prostřednictvím nízké exprese antigenu asociovaného s nádorem, nízké exprese molekuly MHC-I, defektu koaktivačního signálu pro aktivaci cytotoxických T lymfocytů (CTL), vylučování imunosupresivních cytokinů, jako je IL- 10 a TGF-p, exprimující Fas ligand, ligand indukující apoptózu související s faktorem nekrózy nádorů (TRAIL) a indukující apoptózu efektových buněk.

Paklitaxel (PTX) je mitotický inhibitor používaný při chemoterapii rakoviny. Paklitaxel stabilizuje mikrotubuly a v důsledku toho narušuje normální rozpad mikrotubulů během buněčného dělení. Spolu s docetaxelem tvoří lékovou kategorii taxanů. PTX může zvýšit prezentaci antigenu indukcí imunogenní apoptózy nádorových buněk. PTX může také aktivovat dendritické buňky prostřednictvím signálních drah receptoru typu Toll k zahájení přirozené imunitní reakce. Bylo také popsáno, že PTX indukuje produkci cytokinů typu I pomocných T, což přispívá k účinným cytotoxickým odpovědím T-buněk. Zatímco cisplatina (DDP) může up-regulovat expresi NKG2D ligandu (NKG2DL) na nádorových buňkách, a tak senzibilizovat nádorovou buňku k lýze lymfocytů exprimujících NKG2D. DDP může také zvýšit expresi Fas v nádorových buňkách, a tím zvýšit jejich zranitelnost vůči imunitním efektorům pozitivním na ligand Fas (FasL). Bylo hlášeno, že neoadjuvantní chemoterapie s PTX by mohla indukovat infiltraci buněk lymfocytů infiltrujících nádor (TIL) u rakoviny prsu, což souviselo s klinickými účinky. Naše předchozí práce také ukázala, že frekvence intratumorálních a slezinných regulačních T buněk (Treg buněk) byly významně sníženy a intratumorální akumulace CD3+ T lymfocytů byla zvýšena po předléčení chemoterapií u modelů rakoviny plic.

Na základě našich předchozích prací je tato klinická studie navržena s cílem prozkoumat, zda by předkondicionační chemoterapie režimu TP (PTX+DDP) kombinovaná s autologní adoptivní imunoterapií CIK buňkami mohla být přínosem pro pacienty s NSCLC s lepším klinickým výsledkem.