Efectos del secretoma ASC en explantes osteocondrales humanos (ASC-OA)

Caracterización bioquímica y funcional de explantes osteocondrales no tratados (para montar el modelo) y explantes tratados con citoquinas inflamatorias (para simular patología osteoartrítica) mediante la evaluación de varios parámetros. Las múltiples medidas que concurrirán para describir el fenotipo de los ejemplares son las siguientes:

• viabilidad celular por AlamarBlue (Unidades arbitrarias de fluorescencia).
• evaluaciones histológicas (diferencias cualitativas entre especímenes).
• análisis de la expresión génica por RT-PCR (reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real, cuantificación relativa por el método 2-ΔΔCT).
• análisis de expresión de proteínas por Western Blot (cuantificación relativa por densitometría) y Luminex (pg/ml).

Evaluación de los efectos del secretoma ASC (ya sea medio acondicionado completo o sus subcomponentes) en biopsias osteocondrales tratadas con citocinas inflamatorias a través de los análisis bioquímicos y funcionales descritos anteriormente.