Veiligheid van Sofosbuvir bij mensen met gevorderd nierfalen

Onderzoeksopzet Driearmige, observationele, farmacokinetische studie

Studieduur Twee jaar (maart 2019-februari 2020)

Studiedeelnemers Er zullen twee groepen deelnemers worden opgenomen (i) Mensen zonder chronische nierziekte, d.w.z. normale eGFR en geïnfecteerd met HCV-infectie (ii) Mensen met chronische nierziekte en eGFR <30 ml/min en geïnfecteerd met HCV-infectie

We zullen in totaal dertig deelnemers opnemen met tien in elk van de drie groepen: Groep A (ESRD, alternatieve dagdosis), Groep B (ESRD, dagelijkse dosis) en Groep C (normale eGFR)

Geneesmiddelschema Deelnemers met eGFR <30 ml/min: krijgen daclatasvir 60 mg eenmaal daags samen met ofwel sofosbuvir (200 mg) eenmaal per dag of sofosbuvir 400 mg eenmaal per dag. Deelnemers met een normale nierfunctie worden behandeld met sofosbuvir 400 mg en daclatasvir 60 mg eenmaal daags.

De behandelingsduur is 12 weken voor alle drie de onderzoeksgroepen.

Dialyseschema Twee keer per week worden hemodialysesessies van vier tot vijf uur gegeven

Plan voor farmacokinetisch onderzoek (i) Moleculen: Sofosbuvir en GS331007 (ii) Methode: vloeistofchromatografie-tandem massaspectrometrie (iii) Specimenverzameling (~2 ml per keer) zal als volgt worden gedaan: uur '0', 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 24 [Dag 1]; uur 36 [Dag 2]; uur 84 [Dag 4] en uur 156 [Dag 7].

Monsterafname, transport en opslag Kort na de monsterafname wordt het serum gescheiden door centrifugatie bij 4000×g gedurende 10 minuten bij 4°C en wordt het afgescheiden serum bewaard bij -80°C tot analyse. Analyse zal worden uitgevoerd met behulp van een gevalideerde bioanalytische methode bij CSIR-CDRI, Lucknow.

Inactivatie van het hepatitis C-virus in het opgeslagen monster. HCV-inactivatie vindt plaats door warmtebehandeling. Vóór de warmtebehandeling wordt de waterbadkamer gereinigd, gevuld met vers RO-water en wordt de temperatuurkalibratie gecontroleerd op nauwkeurigheid. De monsters worden 10 minuten op 60 C of 5 minuten op 65 C verwarmd om het virus te inactiveren. Onmiddellijk na de warmtebehandeling worden de monsters in crushed ijs geplaatst om het warmte-effect te stoppen. De monsters worden voor analyse in bevroren toestand vervoerd.

Monstervoorbereiding:

De monstervoorbereiding bestaat uit de eenvoudige vloeistof-vloeistofextractie en/of eiwitprecipitatie.

Vloeistofchromatografie-massaspectroscopie HPLC-systeem bestaande uit Shimadzu UFLC-systeem bestaande uit LC-20AD binaire pompen en SIL-HTc autosampler (Shimadzu Corporation, Kyoto, Japan) zal worden gebruikt om aliquots van 10 µL van de verwerkte monsters te injecteren op een C18-kolom (4.6 mm × 50 mm, 5,0 µm). De scheiding zal worden bereikt door de mobiele fase in isocratische modus te laten lopen met acetonitril en 10 mM ammoniumacetaatbuffer in een geschikte verhouding (% v/v) bij een stroomsnelheid die voldoende resolutie biedt om te worden geoptimaliseerd tijdens de ontwikkeling en validatie van de methode. De mobiele fase wordt voor gebruik gefilterd door een filter van 0,22 µm en ultrasoon ontgast. Massaspectrometrische detectie zal worden uitgevoerd op een API 5500 Q Trap massaspectrometer (Applied Biosystems, MDS Sciex Toronto, Canada) uitgerust met een API elektronenspray-ionisatie (ESI)-bron. De ionensproeispanning wordt ingesteld op 5500 V. De instrumentgerelateerde parameters, namelijk vernevelingsgas, gordijngas, hulpgas en botsingsgas en cocompound-gerelateerde parameters, namelijk ontclusteringspotentieel (DP), botsingsenergie (CE), ingangspotentieel (EP) en botsingsceluitgangspotentieel (CXP) respectievelijk worden geoptimaliseerd voordat de methode wordt gevalideerd. Nullucht zal worden gebruikt als brongas, terwijl stikstof zal worden gebruikt als zowel gordijn- als botsingsgas. De massaspectrometer zal zowel in ESI-positieve als in ESI-negatieve ionenmodus werken en de detectie van de ionen zal worden uitgevoerd in de multiple reaction monitoring (MRM)-modus die de overgangen van de analyten bewaakt. Quadrupool 1 en quadrupool 3 blijven op eenheidsresolutie en de verblijftijd wordt ingesteld op 200 ms. Analyst 1.6-software (versie 1.6, gebouwd in 3773; AB Sciex, Toronto, Canada) zal worden gebruikt voor data-acquisitie en kwantificering.

Schatting van de farmacokinetische parameters De farmacokinetische parameters zullen worden geschat met behulp van WinNonlin-software, hetzij door middel van compartiment/niet-compartimentmodellering.