Wpływ szczepienia przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu B na antygenem HBs

Przetrwała antygenemia HBs >1000 IU/ml stwarza możliwość reaktywacji wirusa i wątrobiaka u 8%; badano wpływ szczepionki HBV na HBsAg, nawroty wiremii, insulinooporności i regresję włóknienia.

Od sierpnia 2011 r. do października 2016 r. 220 uczestników z przewlekłym wirusowym zapaleniem wątroby typu B zostało poddanych ocenie w klinice hepatologicznej — oddziale chorób wewnętrznych — uniwersytecie Zagazig — Egipt. Zostali zapisani po zatwierdzeniu przez komisję etyczną szpitala uniwersyteckiego w Zagazig. Uzyskano pisemną świadomą zgodę na wywiad, ocenę kliniczną i pobieranie krwi.

uczestnicy zostali podzieleni na dwie grupy:

• Nieaktywni nosiciele (n=100), u których stwierdzono przetrwałe HBsAg, niewykryte DNA HBV, prawidłowe enzymy wątrobowe, dodatni wynik HBeAb i nigdy nie byli narażeni na terapię przeciwwirusową.
• Pacjenci narażeni na NA (n=120): tenofowir 300 mg (n=65) lub Entekawir 1 mg (n=55): Pacjenci z dodatnim wynikiem A-HBeAg (n=60), którzy otrzymywali NA do 1 roku po serokonwersji HBe i ustąpieniu HBV DNA z przetrwałymi HBsAg B-HBeAg-ujemnymi pacjentami (n=60), którzy otrzymywali NA do 3 lat po zniknięciu DNA HBV; wszyscy wykazali trwałe HBsAg.
• Kryteria wykluczenia Klinicznie niewyrównana marskość wątroby; rak wątrobowokomórkowy; inne przyczyny choroby wątroby lub przyczyny mieszane (nadmierne spożycie alkoholu, autoimmunologiczne choroby wątroby, leki immunosupresyjne lub które zostały zakażone wirusem zapalenia wątroby typu C.

B- Harmonogram szczepień

• Wszyscy uczestnicy otrzymali 30 µg rekombinowanej szczepionki HBV, która zawiera oczyszczony antygen HBs wytworzony technologią rekombinacji DNA (Euvax-B, LG Life Sciences, Korea) domięśniowo w okolice mięśnia naramiennego w trzech różnych odstępach czasu (0, 1, 6 miesięcy). Pierwszą dawkę szczepionki rozpoczęto 1 rok po serokonwersji HBe i zaniku DNA HBV u pacjentów HBe +ve lub 3 lata po zaniku DNA HBV u pacjentów HBe - ve lub bezpośrednio po rozpoznaniu nieaktywnych nosicieli. NA zostały zatrzymane trzy miesiące po trzeciej dawce szczepionki HBV
• Trzy miesiące po podaniu ostatniej dawki szczepionki uczestnicy zostali poddani ocenie pod kątem poziomu IP-10, wytwarzania ochronnego HBsAb, nawrotu wiremii na podstawie zwykłego HBV DNA, oznaczania ilościowego HBsAg.

Pacjenci, u których nie udało się wytworzyć HBsAb, tj. miano HBsAb < 10 IU/ml, podano czwartą dawkę przypominającą szczepienia bezpośrednio po potwierdzeniu braku odpowiedzi na szczepionkę.

C- Grupa kontrolna Obejmowała ona 100 uczestników, którzy mieli PWZW, z niewykrywalnym DNA HBV z utrzymującym się HBsAg i nie otrzymali szczepionki HBV. Zostali oni podzieleni na nieleczonych wcześniej (n=50) i leczonych wcześniej (n=50), którym podawano tenofowir (n=30) lub entekawir (n=20), które przerwano 3 lata po zaniku DNA HBV i serokonwersji HBeAg i obserwowano przez 3 lata poprzez ocenę poziomu HBsAg i HBV DNA co 6 miesięcy w celu wykrycia naturalnego tempa reaktywacji HBV.

D- Analiza laboratoryjna Obejmowała pełną morfologię krwi, próby wątrobowe, czas protrombinowy, stężenie protrombiny (%), próby czynnościowe nerek.

• przeciwciała HCV, HBeAg, HBeAb, HBcAb.
• Ilościową PCR w czasie rzeczywistym w kierunku HBV DNA wykonano na początku badania, a następnie co 6 miesięcy po ostatniej dawce szczepionki HBV przez 3 lata (COBAS AMPLICOR HBV MONITOR, z granicą wykrywalności 15 IU/ml; Roche Diagnostic Systems).
• Insulinooporność wykonano przed rozpoczęciem szczepienia i 3 miesiące po ostatniej dawce szczepionki. Obliczono go metodą HOMA-IR, wartość większa niż 2 wskazuje na insulinooporność [20].
• Genotypowanie HBV przeprowadzono przy użyciu testu INNO-LiPA HBV Genotyping; Innogenetics NV, Gandawa, Belgia.
• Oznaczanie miana HBsAg (test Elecsys HBsAg II, Roche Diagnostics, USA) [21]. Wykonywano je przed szczepieniem i 3 miesiące po ostatniej dawce szczepionki, następnie co 6 miesięcy przez 3 lata.
• Oznaczenie przeciwciał anty-HBs wykonano 3 miesiące po trzeciej dawce szczepionki lub 3 miesiące po czwartej dawce przypominającej. Serokonwersję rozważano, gdy poziom anty-HBs przekraczał 10 j.m./ml, a brak odpowiedzi, gdy poziom anty-HBs wynosił poniżej 10 j.m./ml [22].
• Poziomy IP-10 w surowicy określono w surowicy przed szczepieniem i 3 miesiące po ostatniej dawce szczepionki, metodą kanapkowego testu ELISA w fazie stałej (Quantikine, R&D Systems, USA) (wartość referencyjna: 7,8-500 pg/ml).

E- Uczestnicy USG jamy brzusznej byli badani po 6 godzinach na czczo. Udokumentowano kryteria marskości wątroby, nadciśnienia wrotnego i obecności stłuszczeniowej choroby wątroby.

F- Ocena sztywności wątroby (LSM) Fibroscan wykonano w celu pomiaru sztywności wątroby przed terapią przeciwwirusową i 3 miesiące po ostatniej dawce szczepionki HBV, przy liczbie wstrzyknięć 10, rozstęp międzykwartylowy ≤ 25%. Sztywność wątroby 2,5-7 kPa oznacza (F0-1), 7-9,5 kPa (F2), 9,5-12,5 kPa (F3), >12,5 kPa oznacza marskość wątroby.