Účinky kyseliny omega-3 dokosapentaenové na lipidy a další rizikové faktory kardiovaskulárních onemocnění (DPA)

Jedná se o zkříženou, dvojitě zaslepenou, randomizovanou, placebem kontrolovanou klinickou studii. Každá fáze léčby bude trvat nepřetržitě 6 týdnů. Před první léčebnou fází budou účastníci rozděleni tak, aby dostávali doplněk n-3 obohacený o DPA, konvenční doplněk n-3 a identické placebo v náhodném pořadí. K náhodnému přiřazení účastníků do léčebné sekvence bude použit počítačový program. Po každé fázi léčby budou mít účastníci 2týdenní vymývací období před zahájením další fáze léčby.

Intervenční protokol a studijní léčba:

Studijní kapsle budou poskytovány jednou za dva týdny v laboratoři Food, Bioactives, & Health Lab v kampusu University of Arizona nebo Collaboratory. Účastníci si mohou naplánovat časy vyzvednutí, které jim nejvíce vyhovují. Při každém dvoutýdenním odběru bude k dispozici zaměstnanec, který se s účastníky setká.

Léčby jsou následující:

• 4 g/d DPA obohacený n-3 koncentrát (~980 mg DPA, 380 mg EPA, 1720 mg DHA)
• 4 g/den n-3 kontrola (~980 kyselina olejová, 380 mg EPA, 1720 mg DHA)
• 4 g/den placebo kontrola ("light" olivový olej)

Pro každou 6týdenní léčebnou fázi budou účastníci konzumovat 4 g/den koncentrátu obohaceného o DPA, n-3 odpovídající kontroly nebo placebo kontroly. Účastníci budou povinni se během fází léčby vyvarovat konzumace jakékoli jiné stravy nebo doplňků, které obsahují n-3 FA. Budou také požádáni, aby udržovali svůj současný dietní příjem (s výjimkou vyloučení dalších potravin nebo doplňků obsahujících n-3) a udržovali si úroveň fyzické aktivity a tělesnou hmotnost v průběhu studie.

Každé suplementační období bude trvat minimálně 6 týdnů. Léčebná období však mohou být prodloužena o 2 týdny (celkem až 8 týdnů), aby se vyhovělo problémům s plánováním kvůli nemoci, cestování atd. Pokud se například účastník nemůže dostavit na dvě oddělená dopoledne na testování po 6 týdnech suplementace, může pokračovat v suplementaci a naplánovat si testování na následující týden.

Promítání:

Potenciální účastníci budou telefonicky dotazováni, abychom určili jejich počáteční způsobilost. Pokud zůstanou způsobilí i po telefonickém screeningu, budou dále prověřeni v Collaboratory, CATS nebo Food, Bioactives, & Health Lab. Tato screeningová návštěva se bude skládat z: vyplnění formulářů (informovaný souhlas, anamnéza, osobní údaje); měření výšky a hmotnosti, takže lze vypočítat index tělesné hmotnosti (BMI); a měření krevního tlaku (TK). Pokud se po těchto měřeních zjistí, že jsou stále způsobilí, bude jim odebrán vzorek krve a provede se kompletní krevní obraz, zdravotní panel včetně funkce jater a ledvin a panel krevního tuku (přibližně 15 ml krve nebo ~ odebere se 1 polévková lžíce). Pokud je počáteční odběr krve neúspěšný, může být nutné jej se souhlasem účastníka opakovat. Ženám ve fertilním věku bude proveden těhotenský test z moči. Vyšetřovatelé studie zkontrolují všechna data screeningu. Účastníci splňující kritéria způsobilosti budou naplánováni na sběr základních dat a poté bude zahájeno doplňování.

Základní a koncové návštěvy (celkem 4):

Účastníci podstoupí další klinická hodnocení po dobu jednoho dne na začátku (hodnoty ze screeningu budou použity jako druhé měření) a dva dny pro každou ze 3 endpoint návštěv (na konci každé 6týdenní léčebné fáze). Základní návštěva bude naplánována do 2 týdnů od screeningové návštěvy účastníka. Účastníci budou muset držet půst přes noc (12 hodin bez jídla a pití kromě vody) a zdržet se alkoholu po dobu 48 hodin před každým testovacím dnem. Aby byla zajištěna způsobilost účastníků, bude provedeno krátké hodnocení (viz ScreeningForm_DPA). Pokud účastník nesplňuje požadavky, bude jeho návštěva přeložena. Testování bude provedeno v CATS, Collaboratory nebo Food, Bioactives, & Health Lab a postupy jsou podrobněji popsány níže.

• Odběr krve: Před odběrem krve budou účastníci požádáni, aby po dobu 12 hodin nekonzumovali žádné jídlo ani pití kromě vody a po dobu 48 hodin se vyvarovali alkoholu. Účastníci by také neměli vykonávat intenzivní fyzickou aktivitu po dobu 12 hodin před odběrem krve. Na začátku a na konci každé léčebné fáze budou odebrány dva vzorky krve (celkem 8krát po screeningu způsobilosti). Ve dvou oddělených dnech bude účastníkovi odebrán vzorek krve z paže po 12hodinovém hladovění (bez jídla a pití kromě vody). Pokud je počáteční odběr krve neúspěšný, může být nutné se svolením účastníka opakovat. Přibližně 60 ml (4 polévkové lžíce) krve bude odebráno na začátku a na konci každé léčebné fáze, během dvou dnů oddělených alespoň 24 hodinami. Ten se jeden den shromáždí jako ~52 ml a druhý den ~7,5 ml. Během celé studie bude 8krát odebrána krev v celkovém množství ~247 ml (~16,5 polévkové lžíce), včetně krve odebrané pro screeningové testy před zahájením studie (~15 ml nebo 1 polévková lžíce).

• Na konci každého testovacího období bude krev testována na následující: glukózu, inzulín, triglyceridy, HDL-C, non-HDL-C a koncentrace zánětlivých markerů. Koncentrace mastných kyselin v červených krvinkách budou také měřeny pro posouzení kompliance.
• Další den na konci každého testovacího období poskytnou účastníci vzorek krve (~7,5 ml) k opakování měření lipidů, které se může každý den lišit.

Vzorky krve budou uloženy a analyzovány poté, co všichni účastníci dokončí studii. Výsledky studia budou k dispozici po ukončení studia (což může trvat 2 roky nebo déle).

• Odběr slin: Vzorky slin budou odebírány pomocí techniky pasivního slintání. Účastníci použijí pomůcku k odběru slin do specializované 2ml kryozkumavky.
• Těhotenský test moči: Účastnice ve fertilním věku budou požádány, aby poskytly vzorek moči pro těhotenský test na začátku a na konci každé fáze léčby. Pokud účastnice otěhotní, nebude se moci dále účastnit studie.
• Analýza pulsních vln (PWA): V jednom z testovacích dnů pro základní návštěvu a na konci každého období suplementace podstoupí účastníci testování za účelem měření jejich krevního tlaku a pulsových křivek. To bude hodnoceno pomocí systému SphygmoCor (AtCor Medical, Sydney, Austrálie). Testování SphygmoCor bude provedeno před odběrem vzorku krve nalačno a v konzistentním čase (± 1 hodina) pro všechny základní a koncové návštěvy. Měření PWA je velmi podobné běžnému měření krevního tlaku a bude použito k posouzení centrálního krevního tlaku a charakteristik odrazu vln (augmentační index). Ty budou odvozeny z pažních tlakových křivek pomocí ověřené zobecněné přenosové funkce. Měření PWA se bude provádět podle pokynů pro krevní tlak JNC7 v tiché, tlumeně osvětlené místnosti s řízenou teplotou po 5minutovém odpočinku vsedě. Účastníci budou požádáni, aby tiše seděli s nohama na podlaze po dobu alespoň 5 minut. Poté bude na horní část paže umístěna manžeta na měření krevního tlaku. Manžeta se nafoukne, pak se na 5 sekund vyfoukne a poté se částečně znovu nafoukne. Účastníci budou požádáni, aby během tohoto měření zůstali tiše a nehybně. Postup se bude opakovat dvakrát, celkem 3 měření, s přibližně 1 minutou přestávky mezi každým měřením. Poslední 2 výsledky budou zprůměrovány pro zvýšení přesnosti.
• Rychlost pulzní vlny (PWV): Po měření PWA podstoupí účastníci hodnocení tuhosti aorty měřením rychlosti pulzní vlny karotid-femoral (PWV). Pro toto měření budou účastníci požádáni, aby si lehli na nemocniční lůžko bez polštáře. Průběhy tlaku v krční a femorální arterii budou měřeny současně pomocí aplanačního tonometrického senzoru, který je ručně držen na místě nad pravou společnou karotidou a manžetou krevního tlaku umístěnou na pravé společné stehenní tepně. PWV se vypočte vydělením lineární vzdálenosti mezi karotidami a femorálními místy dobou průchodu pomocí systémového softwaru SphygmoCor. Tento test bude proveden třikrát s přibližně 1 minutou mezi měřeními a poslední 2 výsledky budou zprůměrovány pro zvýšení přesnosti.
• Variabilita srdeční frekvence (HVR): Po měření PWV účastníci podstoupí hodnocení kardiovaskulárního zdraví měřením variability srdeční frekvence (HRV). Pro toto měření budou účastníci požádáni, aby si lehli na nemocniční lůžko bez polštáře. Účastníci budou připojeni k systému SphygmoCor pomocí 3 svodů EKG umístěných na horní části trupu. Informace o HRV budou shromažďovány pomocí systémového softwaru SphygmoCor. Tento test bude proveden třikrát s přibližně 1 minutou mezi měřeními a poslední 2 výsledky budou zprůměrovány pro zvýšení přesnosti.

Středové návštěvy:

Doplňky budou poskytovány každé 3 týdny na určeném studijním místě v kampusu University of Arizona nebo v Collaboratory. Účastníci si mohou naplánovat časy vyzvednutí, které nejlépe vyhovují jejich rozvrhu. Pracovník studie bude k dispozici při každé návštěvě, aby se setkal s účastníky, aby odpověděl na otázky nebo diskutoval o vedlejších účincích.

Účastníkům bude dokončení této výzkumné studie trvat přibližně 22–28 týdnů. Celková doba studijních návštěv v Collaboratory, CATS nebo Food, Bioactives, & Health Lab po počátečním screeningu je přibližně 8 hodin. Časy se mohou lišit a ženy před menopauzou budou vyžadovat dalších 5 minut na těhotenský test z moči při screeningu, na začátku a na konci každého léčebného období. Níže je uveden odhad množství času, který účastníci stráví studijními aktivitami:

Termín promítání:

• Formy, krevní tlak a odběr krve: 45-60 minut
• Těhotenský test (pouze ženy před menopauzou): 5 minut

Základní linie:

• Testování koncového bodu:

  • Odběr krve: 15 minut
  • Odběr slin: 5 minut
  • Testování PWA/PWV/HRV: 45 minut
  • Těhotenský test (pouze ženy před menopauzou): 5 minut
• Druhý den testování: (NA; bude použito měření lipidů ze screeningu)

Konec léčebných období 1, 2 a 3:

• Testování koncového bodu:

  • Odběr krve: 15 minut
  • Testování PWA/PWV/HRV: 45 minut
  • Těhotenský test (pouze ženy před menopauzou): 5 minut

• Druhý den testování:

  • Odběr krve: 15 minut
  • Odběr slin: 5 minut *Měření 1. a 2. dne lze přepnout, aby vyhovovalo rozvrhu účastníků
• Návštěvy každé 3 týdny za účelem vyzvednutí nových doplňků a vrácení nepoužitých kapslí: 15 minut/návštěva (~90 minut celkem)
• Denní záznamy o spotřebě (vyplněné doma): ~15 minut celkem

Celkový časový závazek: ~8-9 hodin (8 návštěv pro testování a přibližně 6 návštěv pro vyzvednutí doplňků, stejně jako vyplňování protokolů doma) v průběhu 22-28 týdnů.