Bestemmelse af nye detektions- og kvantificeringstærskler for serologiske og molekylære tests for hepatitis deltavirus (HDV) ved brug af kapillært blod på duppepapir (DBS) (SACADE)

Delta-hepatitisvirus (HDV) er en satellitvirus, der kræver tilstedeværelsen af ​​hepatitis B-virus (HBV) for infektion. Cirka 5 % af HBV-inficerede individer, eller omkring 12 millioner mennesker globalt, er også bærere af HDV. Denne dobbelte infektion øger signifikant risikoen for leverskade og progression til hepatocellulært karcinom (HCC).

Historisk set har diagnosen HDV været begrænset, hvilket har ført til en undervurdering af dens sande forekomst både nationalt og internationalt. Nylige fremskridt inden for behandlinger af viral hepatitis og introduktionen af ​​nye HDV-specifikke behandlinger har ansporet øget interesse for virussen, hvilket har fået offentlige sundhedsmyndigheder til at efterlyse forbedrede diagnostiske og overvågningsværktøjer.

Påvisning af HDV involverer typisk serologiske tests (ELISA/CLIA) på serum eller plasma, efterfulgt af viral load kvantificering ved hjælp af RT-qPCR, hvis positiv. Imidlertid er laboratorieadgang ofte utilstrækkelig i mange regioner, hvilket især påvirker marginaliserede befolkninger og højendemiske områder, især i lande med lav ressource. Nye prøveindsamlingsmetoder, der hjælper med at forbinde patienter til ekspertlaboratorier, er nødvendige, da forsendelse af frosne biologiske prøver kan være kompleks og dyr.

Som svar herpå er prøvetagning af tørret blodplet (DBS) - hvor serum, plasma eller fuldblod tørres på filterpapir - blevet vedtaget af adskillige offentlige sundhedsorganisationer som et enkelt, omkostningseffektivt og ikke-smitsomt middel til opbevaring og transport . DBS er allerede valideret til diagnosticering og overvågning af infektioner som HIV, HBV og HCV.

I betragtning af hver viruss unikke biologi er der behov for specifikke undersøgelser for at bestemme, hvordan brugen af ​​DBS påvirker detektions- og kvantificeringstærskler for hver laboratorieteknik. Det nationale referencecenter for deltahepatitis (CNR-Delta), bestilt af Public Health France, har udviklet en DBS-protokol for HDV, baseret på tilgængelig litteratur og tidligere undersøgelser vedrørende opbevaringsforhold og rekonstitueringsløsninger. To retrospektive undersøgelser, der anvender CNR-samlinger, har etableret nye positivitetstærskler for serologi og detektion/kvantificering i molekylærbiologi for serum/plasma og EDTA fuldblod på DBS.

For at færdiggøre denne protokol er yderligere undersøgelse af tærskler for kapillære blodprøver på DBS afgørende. Kapillærblod, opnået via fingerstik, kunne forenkle brugen af ​​dette værktøj, reducere behovet for specialiseret udstyr og ekspertise og potentielt muliggøre selvprøvetagning af patienter.

Den nuværende undersøgelse har til formål at validere DBS-værktøjet til HDV-serologisk og molekylær testning ved brug af kapillærblod. Hypotesen hævder, at geografiske barrierer for adgang til hospitaler og laboratorier for HDV-patienter komplicerer forsendelsen af ​​frosne plasmaprøver, hvilket øger omkostningerne. Udvikling af en serologisk screenings- og virusbelastningstestteknik fra en dråbe kapillærblod på DBS-papir kunne effektivt forbinde patienter til specialiserede centre. Da DBS anses for at være ikke-infektiøs, afbøder det også administrative komplikationer.

Ved at sammenligne resultater fra parrede prøver - plasma (guldstandarden) fra EDTA fuldblod og kapillærblod på DBS - sigter vi mod at omdefinere detektions- og kvantificeringstærskler for begge metoder. Validering af disse nye tærskler vil tillade brugen af ​​dette værktøj, samtidig med at kvalitetsstandarder for diagnosticering og overvågning af aktive HDV-infektioner opretholdes.

Fordelene ved kapillærblodet på DBS-protokollen inkluderer:

• For patienter: Forbedret adgang til pleje uanset geografisk placering og lettere prøveudtagning (selvudtagning).
• For klinikere: Forenklet håndtering og udvidet screening til svært tilgængelige befolkninger.
• For laboratorier: Reducerede transportomkostninger og smittefare.
• For CNR: Muligheden for at studere global prævalens med en forenklet protokol.

Sammenfattende involverer "guldstandarden" til diagnosticering og overvågning af HDV-infektion serologi på serum eller plasma, testning for totale anti-HDV-antistoffer efterfulgt af kvantificering af viral load. For at vurdere om tests fra tørret kapillærblod kan erstatte plasma/serum tests, er det nødvendigt med en sammenlignende undersøgelse, hvor plasmaprøver og en dråbe kapillærblod opsamles samtidigt fra samme patient og testes parallelt. Denne sammenligning vil evaluere følsomheden og specificiteten af ​​DBS-værktøjet ved hjælp af kapillærblod og etablere nye detektions- og kvantificeringstærskler for viral belastning på DBS.