CLIFT 및 ELISA에 의한 Anti-dsDNA 측정

자가면역 류마티스 질환은 관절 및 근육 증상을 나타내는 자가면역 질환입니다. 그러나 다른 기관은 다른 조건에서 다양한 정도로 관련될 수 있습니다. 결합 조직 질환(CTD) 또는 콜라겐 질환이라고도 합니다. 여기에는 전신성 홍반성 루푸스(SLE), 류마티스 관절염(RA), Sjiogren 증후군(SjS), 전신 경화증, 다발성 근염 및 피부근염 및 혼합 결합 조직 질환이 포함됩니다(Peakman 및 Vergani, 2009).

자가면역 류마티스 질환은 항핵항체(ANA)의 존재를 특징으로 합니다. 이러한 항체는 질병 발병에 관여하며, 환자의 혈청에 존재하는 것은 질병 진단에 사용되는 기준 중 하나(임상 증상과 함께)를 구성합니다(Stevens, 2010). ANA에는 추출 가능한 핵 항원에 대한 자가항체와 히스톤 및 데옥시리보핵산(DNA)에 대한 자가항체가 포함됩니다.

항DNA 항체에는 단일 및 이중 가닥 DNA(각각 ssDNA 및 dsDNA)에 대한 항체가 포함됩니다. 항-dsDNA 항체는 SLE의 진단 마커 및 특히 루푸스 신염에서 SLE 질병 활동의 지표로 인식됩니다(Zigon et al., 2011). 그러나 높은 항-dsDNA 수치는 SLE 환자의 50-70%에서만 발견됩니다. . 따라서 음성 항 dsDNA 검사는 SLE를 배제하지 않습니다. 또한 항 dsDNA 항체는 건강한 헌혈자뿐만 아니라 RA 및 SjS와 같은 다른 자가면역 질환에서도 검출될 수 있습니다(Zigon et al., 2011). -SLE 진단 및 SLE 질병 활동 모니터링에서 dsDNA는 이 테스트 실험실 요청과 상업적으로 이용 가능한 키트의 수를 증가시켰습니다(Chiaro et al., 2011).

항-dsDNA 항체의 검출 및 정량화에 사용되는 키트는 다음과 같습니다.

1. Farr 기술(FARR-RIA)(Wold et al., 1968)에 따라 개발된 방사면역분석 방법. 그러나 Farr 분석에서 방사성 원소를 사용하기 때문에 일상적인 진단 실험실 작업에는 널리 사용되지 않습니다(Mahler and Fritzler, 2007).
2. Aarden et al(1975)에 의해 개발된 Crithidia luciliae 면역형광 검사(CLIFT)는 고농도의 천연(dsDNA) DNA를 포함하는 kinetoplast를 포함하는 혈모편모체 Crithidia luciliae를 사용하여 간접 면역형광으로 항-dsDNA를 검출합니다(Zigon et al., 2011). 그러나 면역형광의 판독 및 해석은 주관적이며 테스트 결과에 영향을 미칠 수 있는 실험실 직원의 경험과 교육에 따라 달라집니다(Chiaro et al., 2011).
3. ELISA(Enzyme-linked immunosorbant assay)는 수행이 간단하고 고도로 숙련된 작업자가 필요하지 않으며 자동화할 수 있습니다. 따라서 가장 널리 사용되는 방법이 되고 있습니다(Kumar et al., 2009). 항-dsDNA ELISA 분석의 수가 증가함에 따라 다양한 항원, 분석 원리 및 컷오프 결정이 다르기 때문에 진단 정확도의 변동 가능성이 엄청납니다. 고용되었습니다(Chiaro et al., 2011). Anti-dsDNA ELISA는 pre-coat 중간체에 대한 면역 복합체의 결합으로 인해 위양성 결과를 제공할 수 있습니다(Zigon et al., 2011).

Assiut University Hospital의 임상면역학 연구실에서는 수동 ELISA 키트에서 자동 ELISA 플랫폼(Alegria 시스템, Orgentec Diagnostika, 독일)으로 전환했으며 최근 CLIFT가 실험실에 도입되었습니다.