Badanie z wykorzystaniem frakcyjnego dwutlenku węgla i laserów neodymowo-itrowo-aluminiowych o długim impulsie w leczeniu bliznowców

Pacjenci Badaniem objęto 30 egipskich pacjentów z bliznowcem, rekrutowanych z Przychodni Oddziału Dermatologicznego Uniwersytetu w Kairze.

Metodologia

Pacjenci:

- Do badania włączono trzydziestu pacjentów z blizną(ami) keloidową

- Każdy pacjent został poddany następującym zabiegom:

1. Zebranie pełnego wywiadu: historia zachorowania, przebiegu i czasu trwania choroby, wywiad rodzinny oraz historia jakiejkolwiek choroby ogólnoustrojowej lub dermatologicznej kolidującej z kwalifikacją do udziału w badaniu.

   Trzydziestu pacjentów zostało włączonych do badania, które jest klinicznym badaniem porównawczym porównującym skuteczność frakcyjnego CO2, długo pulsującego Nd YAG i ich kombinacji w remodelingu kolagenu w bliznowcach klinicznie u wszystkich włączonych pacjentów oraz biochemicznie i immunohistochemicznie piętnastu pacjentów

2. Pełne badanie kliniczne:

   • Badanie ogólne w celu wykrycia jakiejkolwiek choroby ogólnoustrojowej lub dermatologicznej, która może wykluczyć pacjenta z udziału w badaniu, np. kolagenozy.
   • Badanie miejscowe w celu określenia koloru skóry pacjenta według skali Fitzpatricka oraz umiejscowienia i rozległości blizny, która ma być leczona.

   Metody:

   - Wybrano i oznaczono przypadki z licznymi bliznowcami, trzy zmiany oddalone od siebie o 2 do 3 cm. Pierwszą (zmianę A) leczono laserem frakcyjnym CO2 10 600 nm, drugą (zmianę B) długopulsowym laserem Nd YAG 1064 nm, natomiast ostatnią (zmianę C) połączonym frakcyjnym CO2, a następnie laserami Nd YAG po pół godzinie używany

   - pacjenci, u których wystąpiła duża zmiana, podzielono na trzy równe części oddalone od siebie o 2 do 3 cm, oznaczono je jako obszary A, B i C, a następnie poddano takim samym zabiegom jak w przypadku zmian mnogich .

   • Pacjenci otrzymali 4 sesje leczenia w odstępie od 4 do 8 tygodni. Mody i parametry lasera
   • Znieczulenie miejscowe (lidokaina 2,5% i prylokaina 2,5%) było nakładane na obszar roboczy 30 do 60 minut przed sesją, zmywane i odpowiednio osuszane przed zabiegiem.
   • W sesjach terapeutycznych zastosowano ablacyjny laser frakcyjny z dwutlenkiem węgla 10 600 nm (DEKA smartxide DOT, Włochy) i długoimpulsowy Nd-YAG (DEKA synchro FT) z następującymi parametrami Układanie frakcji CO2: 5, Moc: 20 W, Czas przebywania: 1000 mikrosekunda, Odstęp: 800 mikrometrów Fluencja: 40 j/cm2 Czas trwania impulsu: 0,3 milisekundy Rozmiar plamki: 5 mm Przejścia: 3.

   Ocena Ocena była wykonywana przed zabiegiem każdej sesji i jeden miesiąc po ostatnim zabiegu laserowym. Ocenę kliniczną przeprowadzono u wszystkich pacjentów, natomiast ocenę histopatologiczną i biochemiczną przeprowadzono tylko u 15 pacjentów.

   A. Ocena kliniczna Ocena kliniczna została przeprowadzona poprzez obliczenie wyników zarówno Vancouver Scar Scale; oraz Skala oceny blizn pacjenta i obserwatora. Pacjentów oceniano podczas każdej sesji, zgłaszano wszelkie działania niepożądane, np. ból, obrzęk, infekcję, hiperpigmentację lub hipopigmentację.

   B. Ocena histopatologiczna i biochemiczna

   Piętnastu pacjentów zostało losowo wybranych i poddanych biopsji przed i po leczeniu:

   • Biopsja przed leczeniem:

   Skórna biopsja o grubości 3 mm została pobrana z keloidu (dowolna zmiana A, B lub C) przed rozpoczęciem sesji leczenia. po ostatniej sesji terapeutycznej.

   Biopsje kontroli ● Części nadmiaru skóry od 12 pacjentów poddawanych plastyce brzucha zastosowano jako kontrolę poziomów TGFβ1 i TGFβ3.

   Procedura

   - Biopsje utrwalano w 10% obojętnej buforowanej formalinie, a następnie zatapiano w bloczkach parafinowych. Skrawki przygotowano do rutynowego barwienia przez H&E. Pozostałe skrawki przygotowano do barwienia histochemicznego włókien kolagenowych przy użyciu barwnika trichromowego Massona oraz włókien elastycznych przy użyciu barwnika orceinowego

   - Wszystkie skrawki badano przy użyciu mikroskopu świetlnego Zeiss, Primo Star (Zeiss, Niemcy). Mikroskop posiada zintegrowaną kamerę, za pomocą której uzyskano mikrofotografie przedstawiające różne wyniki badań histopatologicznych i histochemicznych. Wszystkie fotomikrofotografie prezentowane w pracy są zgodne z ich oryginalnym powiększeniem.

   • Ocena włókien elastycznych w skrawkach barwionych orceiną:

   Skrawki wybarwione Orceiną sklasyfikowano zgodnie z kryteriami klasyfikacji przedstawionymi przez Ozoga i in. w 2013 r. za wygląd tkanki elastycznej skóry właściwej w następujący sposób:

0 normalne

1. krótkie rozdrobnione elastyczne włókna
2. pośredni między 1 a 3
3. sprężyste włókna włókniste, równoległe do naskórka
4. pośredni między 3 a 5
5. nieobecny lub prawie nieobecny.

Ocena analizatora obrazu (badanie morfometryczne):

Procent powierzchni włókien kolagenowych i elastycznych oceniono ilościowo w skrawkach wybarwionych trichromem i orceiną Massona odpowiednio przy powiększeniu X100 w 5 nienachodzących na siebie polach dla wszystkich pacjentów. Analizę obrazu wykonano za pomocą systemu komputerowego analizatora obrazu Leica Qwin 500C (Anglia) znajdującego się w Zakładzie Histologii Wydziału Lekarskiego Uniwersytetu w Kairze.