Mobilizace kmenových buněk pomocí G-CSF pro odběr od pacientů s Diamond-Blackfanovou anémií

Tato studie poskytne informace potřebné k vývoji účinnější léčby pro pacienty s Diamond-Blackfanovou anémií (DBA). Současná léčba zahrnuje steroidy, jako je prednison, a krevní transfuze. Tyto léčby mají potenciální dlouhodobé riziko a vedlejší účinky, včetně osteoporózy a zhoršeného růstu steroidy nebo přetížení železem z transfuzí. Navíc, jak pacienti dosáhnou dospělosti, může se u nich rozvinout akutní leukémie nebo selhání kostní dřeně. Jediným lékem na DBA je transplantace kostní dřeně, což je postup, který sám o sobě nese vážná rizika a je možností pouze pro asi 25 procent pacientů.

DBA je způsobena mutací (chybou) v genu, který kóduje produkci červených krvinek z kmenových buněk (krvotvorných buněk produkovaných kostní dření). Za 5 až 10 let se terapie genového přenosu může ukázat jako účinná léčba DBA. Předtím, než lze uvažovat o této léčbě, je však zapotřebí více informací o pacientech s DBA a o tom, jak fungují jejich kmenové buňky. Tato studie bude zkoumat: 1) zda kmenové buňky pacientů s DBA reagují na G-CSF stejně jako u zdravých lidí. (G-CSF je lék, který způsobuje, že se kmenové buňky přesouvají z kostní dřeně do krevního řečiště, kde je lze snáze a ve větším množství odebrat postupem zvaným leukaferéza, který je popsán níže. Pokud G-CSF u pacientů s DBA nefunguje dobře, bude nutné prozkoumat jiné strategie odběru); a 2) zda lze genetickou chybu v DBA napravit přenosem genu do kmenových buněk pacientů.

Pro tuto studii mohou být způsobilí pacienti s Diamond-Blackfanovou anémií ve věku 4 let a starší, kteří váží alespoň 27 liber a kteří jsou závislí na transfuzích červených krvinek. Kandidátům bude odebrána anamnéza a fyzikální vyšetření a budou viděni na oddělení transfuze medicíny klinického centra pro vyhodnocení leukaferézy. Budou mít aspiraci kostní dřeně a biopsii k potvrzení diagnózy DBA. Pro tyto testy je oblast kyčle anestetizována a jehla je použita k odběru kostní dřeně z kyčelní kosti. V případě potřeby se postup provádí pod sedací.

Pacientům bude G-CSF podáván injekcí pod kůži po dobu až 6 dnů. Počet krve a kmenových buněk se bude měřit z čajové lžičky krve odebrané každé ráno. Ráno po páté dávce podstoupí pacient leukaferézu za účelem odběru kmenových buněk. Při tomto postupu se do žíly na paži umístí velký katétr (o průměru ne větším než brčko), aby krev mohla proudit do zařízení na separaci buněk. Většina dětí a někteří dospělí nemají žíly dostatečně velké a silné pro tuto hadičku, takže velká intravenózní linie nazývaná "centrální linie" je umístěna do velké žíly na krku nebo v tříslech. To se provádí pod sedací a lokálním anestetikem. Zatímco pacient leží na lůžku nebo na lůžku, plná krev se odebírá katétrem v jedné paži nebo centrální linii, kmenové buňky se oddělí rotací, poté se červené krvinky, krevní destičky a plazma vrátí zpět druhým katétrem do druhé rameno nebo druhý otvor ve středové linii. Procedura trvá asi 3 až 5 hodin, během kterých může pacient sledovat televizi nebo videa a mít u lůžka společnost členů rodiny. Po ukončení procedury účast pacienta na protokolu končí.

Některé kmenové buňky odebrané leukaferézou budou použity pro výzkum a některé budou zmrazeny a uloženy pro případnou budoucí transplantaci pacientovi, bude-li to nutné.