Determinanti della polmonite da COVID-19 (MC-19) (MC-19)

Come dimostrato da uno studio condotto da Ai et al., comprendente 1014 casi sospetti di COVID-19 sottoposti a molteplici test RT-PCR e TC toracica, complessivamente l'88% dei pazienti ha avuto scansioni TC positive mentre la positività RT-PCR è stata riscontrata solo in 59 % di tutti i casi. Inoltre, come riportato da Yang et al, il tasso positivo totale di RT-PCR per i campioni di tampone faringeo è stato riportato tra il 30% e il 60% circa alla presentazione iniziale. Pertanto, un risultato negativo non esclude la possibilità di infezione e non deve essere utilizzato come unico criterio per il trattamento del paziente e per le decisioni di gestione.

Le ragioni per la RT-PCR falsa negativa possono includere la mancanza di identificazione o procedure inadeguate per la raccolta, la manipolazione e la conservazione dei campioni, nonché la ricombinazione virale attiva o i test eseguiti al di fuori della finestra diagnostica.

Da studi preliminari è emerso che i pazienti possono mostrare cambiamenti CT molto precoci ma significativi anche prima degli studi RT-PCR. Da qui la necessità di sviluppare un approccio combinato per la diagnosi di questi particolari pazienti che presentano risultati negativi al test RT-PCR.

L'ipotesi degli investigatori è che diversi pazienti che si sono presentati con polmonite confermata alla TAC durante l'epidemia di Coronavirus e che sono risultati negativi per SARS-CoV2 alla RT-PCR potrebbero probabilmente essere affetti dalla malattia e devono essere attentamente osservati.

Endpoint primario L'endpoint primario del nostro studio prospettico osservazionale è valutare se i pazienti ricoverati che si sono presentati con polmonite ma hanno avuto un test negativo per Covid-19 sono positivi alla sierologia per SARS-CoV-2.

Endpoint secondari Tra gli altri endpoint secondari, l'obiettivo dei ricercatori è scoprire se la combinazione di TAC e sierologia potrebbe aiutare nell'identificazione di quei pazienti inizialmente negativi ai soli test di laboratorio.

Altri endpoint secondari sono l'efficacia di diversi trattamenti farmaceutici contro il Covid-19 avviati empiricamente in quei casi altamente sospetti e lo sviluppo di un approccio utile per quei pazienti inizialmente risultati negativi all'infezione da Covid-19.

Metodi Prima di iniziare lo studio, il protocollo sarà sottoposto e approvato dai Comitati Etici locali presso la Fondazione Policlinico Universitario A. Gemelli IRCCS, Università Cattolica, Roma, Italia. Prima dell'arruolamento ogni soggetto firmerà il consenso informato.

Criteri di inclusione: soggetti ospedalizzati di entrambi i sessi di età pari o superiore a 18 anni con diagnosi di polmonite, confermata dall'imaging del torace e saturazione di ossigeno (SaO2) ≤ 94% in aria ambiente, test Covid-19 negativo, dato il consenso informato alla raccolta dei dati dal paziente o dal rappresentante legale del paziente se il paziente non sta bene per fornire il consenso.

Criteri di esclusione: età inferiore a 18 anni, gravidanza o allattamento. Verranno prelevati campioni di tampone nasofaringeo per la reazione a catena della polimerasi quantitativa in tempo reale per fare diagnosi di Covid19 (2 test ripetuti).

I dati raccolti includono tempo dei sintomi (tosse, febbre, dispnea, congiuntivite, diarrea, astenia, artralgia), età, sesso, altezza, peso, istruzione, abitudine al fumo e all'alcol, morbilità, glicemia, creatinina, transaminasi, γ-GT, totale colesterolo, colesterolo HDL, trigliceridi, emocromo completo, D-dimero, acido lattico deidrogenasi (LDH), proteina C-reattiva ad alta sensibilità (hs-CRP), creatinkinasi (CK), ferritina, HbA1c, raggi X torace, torace TAC, colture, terapia per polmonite, altri trattamenti inclusi agenti antiipertensivi e antiiperglicemici, temperatura corporea, pressione sanguigna e flusso di ossigeno o altri tipi di trattamento con ossigeno.

Verranno inoltre ottenuti 5 ml di plasma suddivisi in aliquote da 1 ml ciascuna e conservati a -80°C in modo anonimo per future analisi, anche di terze parti.

Dimensione del campione Se non c'è davvero alcuna differenza tra il trattamento standard e quello sperimentale (16% in entrambi i gruppi), allora 260 pazienti devono essere sicuri al 90% che i limiti di un intervallo di confidenza bilaterale al 90% escludano una differenza tra il gruppo standard e gruppo sperimentale superiore al 15% Significatività (α) = 0,05 Potenza (1-β)= 90% Percentuale di decessi nel gruppo di controllo e nel gruppo sperimentale = 16% Limite di equivalenza = 15%

Calcolo basato sulla formula:

n = 2 × f(α, β/2) × π × (100 - π) / d2 dove π è la vera percentuale di "successo" sia nel gruppo di controllo che in quello sperimentale, e f(α, β) = [Φ -1(α) + Φ-1(β)]2 Φ-1 è la funzione di distribuzione cumulativa di una deviazione normale standardizzata.

Statistica L'associazione tra recupero e gruppi di pazienti sarà verificata mediante un test esatto di Fisher. Verrà utilizzata una regressione di Cox Proportional-Hazard per confrontare le curve di sopravvivenza (tempi al miglioramento) tra i gruppi studiati correggendo per la terapia somministrata e per tutte le variabili quantitative raccolte. Le variabili quantitative, misurate al momento del ricovero in ospedale, saranno confrontate tra i gruppi utilizzando l'ANOVA. Nelle analisi univariabili, variabili categoriali, come sesso, istruzione, consumo di alcol e abitudine al fumo saranno analizzate mediante un test Chi-Quadrato per studiarne l'associazione con la ripresa, mentre un modello di regressione logistica sarà utilizzato per testare possibili predittori quantitativi di recupero. Verrà quindi utilizzato un modello logistico multivariabile, con una procedura di selezione graduale, per testare tutte le variabili significative in un'analisi univariabile.