COVID-19에 대한 면역 반응 평가 (COVIDIMMUNE)

COVID-19로 인한 2019-20 코로나바이러스 질병은 현재 진행 중인 팬데믹입니다. 이 발병은 2019년 12월 중국 후베이성 ​​우한에서 시작되었고 세계보건기구(WHO)는 2020년 3월 11일에 전염병으로 인정했습니다. 2020년 4월 9일까지 140만 건 이상의 확진 사례와 82,000건 이상의 사망자가 발생했습니다 1. 이스라엘에서는 COVID-19가 9,000건 이상으로 확인되었고 70명의 희생자가 목숨을 잃었습니다(09.04.2020) .

COVID-19의 광범위한 발생으로 많은 인구를 대상으로 한 대량의 연구가 보고되었습니다. Wuet al. COVID-19의 평균 R0는 약 2.68(95% CI: 2.47-2.86)인 것으로 나타났습니다. COVID-19 확산을 줄이기 위해 공중 보건 당국이 확인된 사례를 검역하고 격리하는 조치는 대부분의 국가에서 사용되는 일반적인 관행입니다. 그러나 무증상 감염자가 바이러스를 전파해 감염관리에 차질이 생길 수 있다는 점에서 중요한 문제가 남는다.

문제 지금까지 초기 감시는 주로 중증 질환을 가진 환자에 초점을 맞추었고 따라서 질병의 전체 스펙트럼에 초점을 맞췄습니다. 무증상 질환의 범위는 명확하지 않습니다. Mizumotoet al. 수학적 모델 제안 17.9-33.3% 무증상 보균자입니다. 고려해야 할 또 다른 질문은 이러한 무증상 보균자가 면역 반응을 일으키는지 또는 바이러스 배출을 계속하는지 여부입니다.

질병 COVID-19의 원인 바이러스인 SARS-CoV-2는 클레이드에서 바이러스의 전형적인 막통과 당단백질 스파이크(S 단백질)를 지닌 코로나바이러스입니다. SARS-CoV-2의 스파이크는 바이러스가 폐포 상피 세포에 존재하는 인간 수용체 안지오텐신 전환 효소 2(ACE2)를 통해 숙주 세포로 들어갈 수 있게 합니다. 이러한 스파이크는 인간 면역 반응의 두드러진 표적이며 면역원성이 높고 항체 생산을 유도하는 것으로 밝혀졌습니다. S 단백질의 수용체 결합 도메인(RBD)은 특히 중화 항체의 표적이 됩니다.

증상이 있는 환자에 대한 진단 테스트는 샘플에서 특정 COVID-19 유전자의 존재를 테스트하는 실시간 중합효소 연쇄 반응(RT-PCR)을 기반으로 합니다. 그러나 부적절한 샘플 수집, 낮은 바이러스 부하 또는 PCR의 기술적 불안정성으로 인해 위음성 결과에 대한 보고가 증가하고 있습니다.

혈청검사는 환자의 혈액 내 항체(면역글로불린 M - IgM, 면역글로불린 G - IgG, 면역글로불린 A - IgA), 즉 환자의 면역반응을 검출하는 것을 목적으로 합니다. IgM 항체는 보통 증상 발생 후 3-7일 이내에 나타나지만 IgG 항체는 10-14일 이내에 나타납니다. 호흡기와 관련된 질병은 일반적으로 IgA 상승을 유발합니다.

Zhao et al. 최근 COVID-19 환자가 SARS-CoV-2의 급성 바이러스 감염에 대한 반응으로 전형적인 항체 생산 시간을 보인다는 데이터를 발표했습니다. 전반적으로 데이터는 SARS-CoV-2 감염이 다른 바이러스 감염과 유사한 혈청전환 타임라인을 따른다는 것을 시사합니다. 입원한 유증상 확진자 173명을 대상으로 한 표본에서 93.1%(161/173)에서 항체가 생겼고 이중 82.7%에서 IgM 항체가, 64.7%에서 IgG 항체가 생겼다. 중요한 것은 이 모든 환자들이 증상을 겪었다는 것입니다. 증상 수준, 바이러스 부하 및 면역 반응 사이의 연관성은 아직 결정되지 않았습니다.

가정과 같은 폐쇄된 환경은 더 큰 주변 커뮤니티와 쉽게 섞이지 않을 수 있는 정의된 인구를 가지고 있으므로 이러한 환경은 분모가 잘 정의될 수 있기 때문에 새로운 호흡기 감염을 추적하고 바이러스 전파 패턴을 특성화하는 전략적 방법을 제공할 수 있습니다. 또한 노출은 설정 내에서 이루어지며 가족 접촉에 대한 후속 조치는 일반적으로 정의되지 않은 환경에 비해 이 잘 정의된 환경에서 더 실현 가능합니다. 1차 감염에 유사한 수준으로 노출된 밀접 접촉을 통해 무증상 부분을 식별할 수도 있습니다.

우리의 솔루션 현재 연구의 목적은 가정 연구 설계에서 면역 반응을 평가하는 것입니다. 즉, 무증상 사례에서 항 SARS-CoV-2 항체를 개발하는 것입니다.

COVID-19 양성 판정을 받은 1000명 이상의 환자와 그 가족을 평가할 계획입니다. 이 계획에는 12주 동안 10일마다 증상, 바이러스 부하 및 면역 반응에 대한 평가가 포함됩니다. 다음으로, DNA와 가장 중요한 바이러스가 공격하는 수용체인 ACE2 유전자를 시퀀싱하여 피험자 간의 면역 반응 차이의 원인을 분석합니다.

이것은 증상, 바이러스 부하 및 면역 반응 사이의 연결에 필요한 빛을 비출 것입니다. 바이러스 부하, 증상 및 면역 반응 사이의 연관성은 다음을 가능하게 합니다. 질병 진행 모니터링, 심각한 증상이 나타날 위험이 높은 환자 예측, 바이러스에 대한 면역성 결정, 가장 중요하게는 면역성이 발달하지 않는 만성 보균자를 찾습니다.

프로토콜 Shamir 의료 센터 실험실에서 양성 COVID-19 RT-PCR 결과가 나온 후 피험자는 전화로 연락을 받고 연구에 참여하도록 제안됩니다. 동의하면 의료진이 피험자의 집에 도착하여 연구의 세부 사항을 자세히 설명하고 피험자와 18세 이상의 모든 가구에 사전 동의를 요청합니다. 정보에 입각한 동의서에 서명하면 각 피험자는 증상 보고서를 작성하고 구인두 면봉과 ​​혈액 샘플(10-20cc)을 제공합니다.

12주 동안 10일마다 연구자가 피험자의 집을 방문하여 절차(증상 설문지, 채혈 및 구인두 면봉 채취)를 반복합니다.

마지막 평가(12주차) 이후 1년 이내 4~8주 간격으로 연구자가 피험자의 호실을 방문하여 증상설문지 작성 및 채혈을 실시한다.

혈청학 키트:

1. LIAISION SARS-CoV-2 IgM(디아소린, 이탈리아 살루지아)
2. LIAISION SARS-CoV-2 S1/S2 IgG(이탈리아 살루지아 디아소린)
3. ARCHITECT SARS-CoV-2 N IgG Immunoassay(미국 일리노이주 애벗)

RT-PCR kit RT-PCR은 human RNase primer와 probe 외에 3개의 primer와 3개의 probe를 사용하여 수행됩니다.

절차

1. 과목 집에 도착
2. 의료진은 적절한 보호 의료 장비를 사용합니다.
3. 3개의 혈액 튜브(15-20cc)에 대한 채혈
4. 구인두 면봉
5. 샘플은 2-8c도에서 보관됩니다.
6. 샘플은 2-8c도의 Shamir Medical Center 실험실로 반환됩니다.
7. RT-PCR이 수행됩니다.
8. 혈청학은 사용 가능한 키트를 사용하여 수행됩니다. 각 피험자는 9회 샘플링됩니다(첫 번째 접촉에 추가하여 12주 이내에 10일마다). 혈액 샘플은 향후 연구 목적을 위해 -80°C에서 보관 및 보관됩니다.

장기 평가는 최종 평가(12주차)로부터 1년 동안 4-8주마다 혈액 샘플 및 설문지를 포함합니다.

타이밍

1. RT-PCR 양성 결과를 받은 후 1-7일 이내에 환자와 가족 모두에 대한 1차 평가가 완료됩니다.

2. 1차 평가 후 각 참가자는 100일 동안 10일(±2일)마다 평가됩니다. 총 10회 추가.

   요약하면 각 참가자는 11회 평가됩니다(첫 번째 평가 + 10회의 추가 평가).

3. 마지막 평가 후 각 참가자는 1년 동안 4-8주마다 평가됩니다. 총 6-12회.