WIRKSAMKEIT VON MORUS ALBA-FRUCHTEXTRAKT UND CHLORHEXIDIN AUF SPEICHELSTREPTOCOCCUS MUTANS UND pH-WERTE

EINFÜHRUNG Streptococcus mutans ist der wichtigste Erreger, der an der Entstehung von Zahnkaries beteiligt ist. Dies ist ein anaerober grampositiver Coccus, der natürlicherweise in der oralen Mikrobiota vorkommt und sich leicht auf der Zahnoberfläche ansiedeln kann und die Produktion von Säure initiiert, indem er extrazelluläres Polysaccharid kombiniert, was zu einer Demineralisierung des Zahns und der Entwicklung von Zahnkaries führt (Shah et al., 2018). . Die Menge der besiedelten Oberflächen ist mit Streptococcus mutans im Speichel assoziiert. Somit hätte die Verringerung der Konzentration von Streptococcus mutans in der Mundhöhle einen signifikanten Vorteil bei der Verringerung des Auftretens kariogener Mikroben. (Lemos et al., 2019, Forssten et al., 2010, Banas und Drake., 2018) Zahnkaries ist eine mikrobielle Erkrankung der Mundhöhle, die durch Demineralisation der anorganischen Substanzen und Auflösung der organischen Substanzen der Mundhöhle gekennzeichnet ist Zähne. Zahnkaries wurde im Laufe der Geschichte erkannt und tritt auf der ganzen Welt auf, Berichten zufolge liegt sie bei 44 %, aber der Schweregrad und die Prävalenz ändern sich in verschiedenen Ländern (J.V. Soames und J.C. Southam et al., 2018). In unseren Nachbarländern ist die Häufigkeit von Zahnkaries recht hoch, dokumentiert mit 68 %, 65 % bzw. 64 % in China, Iran und Indien. Die Prävalenz von Zahnkaries in Pakistan ist mit etwa 62 % ebenfalls recht hoch, was mit einer erheblichen Morbidität und wirtschaftlichen Folgen verbunden ist (Reddy K. S., et al., 2017, Lu Liu et al., 2013). Zahnstruktur, die auf den Zahnoberflächen gebildeten Zucker und Biofilme (Pitts, N. B et al., 2016). Der Kariesprozess besteht aus wechselnden Perioden der Demineralisation und Remineralisation des Zahns, die, wenn die Netto-Demineralisation über einen angemessenen Zeitraum erfolgt, zur Auslösung von Zahnkaries führt. Die Ursache von Zahnkaries ist Milchsäure, die durch Fermentation von Zucker durch orale Bakterien produziert wird (Banas und Drake., 2018). Der normale pH-Wert des Speichels liegt zwischen 6,2 und 7,6. Bei neutralem pH-Wert werden Calcium- und Phosphationen aus dem Speichel in den Zahnschmelz eingebaut und erhalten die Struktur des Zahnschmelzes aufrecht, aber wenn der pH-Wert unter den Normalwert fällt, d. h. auf 5,5 oder unter 5,5, werden die Calcium- und Phosphationen aus dem Zahnschmelz herausgelöst und verursacht der Austausch von Mineralionen aus Hydroxyapatit-Kristallen des Zahnschmelzes in Plaque, was zu einer Demineralisierung des Zahns führt (J.V Soames Oral Pathology 2018).

Das Kariesmanagement konzentriert sich auf die Reduzierung der Zahndemineralisation durch Änderung der Essgewohnheiten, Veränderung oder Hemmung des Bakterienwachstums, Änderung des Speichel-pH-Werts und der Pufferkapazität (Khirtika et al., 2017, Velmurugan et al., 2013, Yang et al., 2018). Verschiedene antimikrobielle synthetische Mundspülungen, Zahnpasten, Gele, Kaugummis und Lacke wurden verwendet, um die Mundhygiene zu verbessern und Karies vorzubeugen, indem kariogene Mikroorganismen angegriffen wurden. Die Vorbeugung von Zahnkaries erfolgt durch Zähneputzen nach dem Essen, durch die Verwendung von fluoridhaltigen Zahnpasten, antimikrobiellen Mundspülungen, Hilfsmitteln zur Reinigung der Zahnzwischenräume, Speichelstimulanzien (Xylit, Mannit), Versiegelungen von Grübchen und Fissuren sowie durch Anwendung von topischem Fluorid auf den Zahnoberflächen. Mundspülungen reduzieren auch Zahnfleischentzündungen und hemmen die Plaquebildung (Velmurugan et al., 2013, Chen und Wang, 2010, Zajkani et al., 2018). Mundspülungen wirken antikariogen, haben aber gewisse Nachteile. Sie sind teuer, haben Nebenwirkungen wie Zahnverfärbungen und Brennen in der Mundhöhle (Nayak et al., 2012, Aoun et al., 2018).

Chlorhexidin ist der Goldstandard, ein häufig verwendeter und effektivster chemischer Ansatz, um die Ansammlung von Plaque zu verringern. Tägliches Spülen des Mundes mit Chlorhexidin (0,2 %) reduziert nachweislich die Wachstumsrate von Streptococcus mutans in der Mundhöhle (Velmurugan et al., 2013). Es hat jedoch bestimmte Nebenwirkungen, d. h. Erosion der Mundschleimhaut, Parotisschwellung, Verfärbung der Zähne, brennendes Gefühl und bitterer Geschmack. (Jacob und Nivedhitha, 2018b, Shah et al., 2018, Van der Weijden et al., 2010, Nayak et al., 2012, Solderer et al., 2019) Viele Bevölkerungsgruppen verwenden Heilpflanzen als traditionelle oder alternative Behandlungsmethoden für verschiedene Krankheiten aufgrund ihrer besseren Sicherheitsprofile, gesundheitsfördernden Wirkungen, niedrigeren Kosten und einfacher Verfügbarkeit. Zu den für medizinische Zwecke verwendeten Pflanzenarten gehören die der Gattung Morus, zu den am häufigsten verwendeten Arten gehören Morus alba, rubra und nigra, die auch antimikrobielle Eigenschaften gegen verschiedene lebensbedrohliche Infektionen gezeigt haben (Ercisli S et al., 2006). Morus alba wird allgemein als weiße Maulbeere bezeichnet und gehört zur Familie Moraceae und wird auch Tut, Shahtoot oder Maulbeere genannt. Morus Alba (weiße Maulbeere) stammt aus China, Indien, Pakistan und Japan (Kumar V et al., 2008). In der aktuellen Studie wird Morus alba-Fruchtextrakt aufgrund seiner antimikrobiellen Eigenschaften mit Chlorhexidin gegen Streptococcus mutans gegen orale Pathogene verglichen.

Beschreibung des Problems Zahnkaries ist weltweit weit verbreitet, einschließlich Pakistan; es verursacht Zahnverlust, Malokklusion und Kiefergelenksprobleme. Die damit verbundenen Infektionen können das Risiko einer Ausbreitung in oberflächliche und tiefe Faszienräume bergen und sogar lebensbedrohliche Infektionen verursachen. Die Behandlung von Zahnkaries ist ziemlich teuer und stellt eine wirtschaftliche Belastung für unsere bereits benachteiligte Bevölkerung mit niedrigem sozioökonomischen Status dar. Daher besteht Bedarf an der Erforschung von Naturprodukten, die antimikrobielle und andere vorteilhafte Wirkungen haben können, um die Kariesaktivität zu verringern, zusammen mit guten Sicherheitsprofilen, die leicht verfügbar und kostengünstig sind.

Forschungsfrage Sind die wässrigen Extrakte der Morus alba-Frucht ebenso wirksam wie Chlorhexidin-Mundwasser zur Vorbeugung von Zahnkaries? Ziele Vergleich der Wirksamkeit von Morus alba-Fruchtextrakten mit Chlorhexidin bei Patienten mit Zahnkaries auf der Grundlage der Verringerung der Zahl von Streptococcus mutans in ihrem Speichel.

Vergleich der Wirksamkeit von Morus alba-Fruchtextrakten mit Chlorhexidin bei Patienten mit Zahnkaries auf der Grundlage des Anstiegs ihres Speichel-pH-Werts.

Begründung Chlorhexidin ist eine Chemikalie, die einen bitteren Geschmack hat und ein brennendes Gefühl in der Mundhöhle verursacht und aus kosmetischen Gründen für den Patienten möglicherweise nicht durchführbar ist. Aus pflanzlichen Produkten gewonnenes Mundwasser mit antimikrobieller Aktivität gegen orale Krankheitserreger könnte eine wirtschaftliche und sichere Behandlungsoption darstellen, um die Belastung durch Zahnkaries in unserer klinischen Einrichtung zu verringern. Nach unserem besten Wissen wurde der Maulbeerfruchtextrakt nicht auf seine antimikrobielle Aktivität gegen orale Pathogene, einschließlich Streptococcus mutans, untersucht.

Hypothese

Nullhypothese:

Ho: Wässrige Extrakte aus Morus alba-Früchten sind nicht so wirksam wie Chlorhexidin-Mundwasser zur Vorbeugung von Zahnkaries.

Alternative Hypothese:

Ha: Wässrige Extrakte aus Morus alba-Früchten sind ebenso wirksam wie Chlorhexidin-Mundwasser zur Vorbeugung von Zahnkaries.

LITERATURÜBERSICHT Zahnkaries besteht aus Verbindungen zwischen den Zahnstrukturen, Zucker und dem mikrobiellen Biofilm auf den Zahnoberflächen (Pitts, N. B et al., 2016). Streptococcus mutans und der pH-Wert des Speichels sind die beiden Hauptfaktoren, die Zahnkaries verursachen, und daher kann ihre Bekämpfung ein effizienter Weg sein, um diese globale Krankheit zu bekämpfen. Chlorhexidin ist ein hervorragendes antimikrobielles Mittel und gilt als Segen für die Aufrechterhaltung der Mundgesundheit und -hygiene. In ähnlicher Weise wurden viele pflanzliche Mittel eingeführt, die so wirksam wie Chlorhexidin sind. (Sajjan et al., 2016, Ahmed et al., 2017, Jacob und Nivedhitha, 2018, Carounanidy et al., 2007, Esther et al., 2017) Heilpflanzen wurden von vielen Bevölkerungsgruppen als Therapeutikum aufgrund ihrer Eigenschaften verwendet einfache Verfügbarkeit, Sicherheit und Wirtschaftlichkeit. Die Morus-Spezies haben auch medizinische Eigenschaften und wurden als Antidiabetikum, Neuroprotektivum, Hypolipidimikum und als Abführmittel verwendet (Anna Gryn-Rynko et al., 2016). Mehr als 100 Morus-Arten kommen auf der ganzen Welt vor und in Pakistan sind 25 Morus-Arten verfügbar. Die häufigsten Morus-Arten sind Morus alba, rubra und nigra (Imran M., Khan H., et al., 2010).

Morus alba Frucht enthält viele Wirkstoffe, wie Flavonole, Polyphenole, Alkaloide und Polysaccharide (Gundogdu M et al., 2011). Morus alba ist die reiche Quelle von Vitamin A, Vitamin B1, Folsäure, Vitamin C, Mineralien, Kohlenhydraten, Aminosäuren, Fettsäuren, Anthocyanen und Saponinen (Jiang Y et al., 2015).

In der konventionellen chinesischen Naturheilkunde wurden Maulbeerfrüchte in Medikamenten zur Behandlung von Diabetes, Bluthochdruck, Anämie und Gelenkschmerzen eingesetzt. Morus alba ist für seine antidiabetischen, antihelmintischen, antimikrobiellen, anxiolytischen, hepatoprotektiven und nephroprotektiven Eigenschaften bekannt (Wang, J.; et al., 2013, Yang, X. L. et al., 2010, Khalid, S. et al., 2017 ). Obwohl die Morus-Frucht von derselben Art stammt, kann sie unterschiedliche antioxidative Eigenschaften sowie eine unterschiedliche chemische Zusammensetzung aufweisen. Zu den Mineralelementen in Morus alba gehören Kalium (K), Natrium (Na), Phosphor (P), Calcium (Ca), Zink (Zn), Eisen (Fe), Kupfer (Cu), Mangan (Mn), Selen (Se ), Magnesium (Mg), Chrom (Cr) und Arsen (As) (Liang, L et al., 2012).

Als antimikrobielle Wirkstoffe werden der methanolische Extrakt der Rinde von Morus alba und seine Bestandteile verwendet (Kuete, et al., 2009). Der antimikrobielle Wirkstoff „Kuwanon G“, der aus der Rinde der Wurzel von Morus alba gewonnen wird, zeigt eine Aktivität gegen Streptococcus mutans bei einer MHK von 8,0 μg/ml. Der bakterizide Test von Kuwanon G zeigte, dass es Streptococcus mutans bei einer Konzentration von 20 μg/ml in 60 Sekunden vollständig inaktivierte (Park, K. M. et al., 2002).

Laut Jha et al. bewertete er die antimikrobielle Aktivität von Morus alba-Blättern (wässriger Extrakt) auf grampositive (Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis) und gramnegative Bakterien (Pseudomonas aeruginosa und Escherichia coli). Die Ergebnisse der antimikrobiellen Aktivität bestätigten, dass Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus und Escherichia coli die empfindlichsten Bakterienarten gegenüber Rohextrakt waren, einen MHK-Wert bei einer Konzentration von 0,2–26 mg/ml aufwiesen (S. Jha, A. K. et al., 2013).

Die antimikrobielle Aktivität von 1-Desoxynojirmiycin (Bestandteil von Morus alba-Blättern) und roher ethanolischer Extrakt aus Morus alba-Blättern wurde bewertet. Sowohl das 1-Desoxynojirmiycin als auch die Blätter von Morus alba (Rohextrakt) zeigten eine starke bakteriostatische Aktivität gegen Streptococcus mutans, aber das 1-Desoxynojirmiycin zeigte einen niedrigeren MHK-Wert (15,6 mg/ml) als der Rohextrakt von Morus alba (125 mg/mg/ml). (B. Islam., et al. 2008). Der ethanolische Extrakt aus Blättern von Morus alba zeigte eine antimikrobielle Aktivität gegen Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Candida krusei, Candida albicans, Aspergillus flavus und Candida tropicalis (Oliveira et al., 2015).

Anthocyane sind der wichtigste Bestandteil der Morus alba-Frucht, bei denen es sich um phenolische Verbindungen handelt, die für viele biologische Aktivitäten wie antimikrobielle, antioxidative, neuroprotektive und entzündungshemmende Eigenschaften verantwortlich sind (Liu LK et al., 2008). Cyanidin-3-glucosid und Cyanidin-3-rutinosid sind die wichtigsten Anthocyane, die aus Maulbeerfrüchten abgetrennt werden (Suh H.J. et al. 2003, Liu X. et al. 2004). Der Wirkstoff von Morus alba ist Anthocyanin, und Anthocyanin, das in den Früchten von Morus-Arten vorhanden ist, zeigte antibakterielle Aktivitäten gegen E. coli, Pseudomonas aeruginosa und Staphylococcus aureus (Chen H., et al. 2017). Zu den vorgeschlagenen Mechanismen, durch die Anthocyanin antimikrobielle Wirkungen hervorruft, gehört die Wirkung auf die Zellmembran des Krankheitserregers mit dem Austreten seiner Nukleinsäure und Proteine ​​(Bajpai et al., 2013). Anthocyanin bewirkt eine Hemmung der mikrobiellen Superoxiddismutase, der alkalischen Phosphatase und der ATP-Produktion mit anschließender Hemmung des TCA-Zyklus (Li et al., 2010). All diese Mechanismen führen zur Lyse pathogener Zellen.

Shumaila Naz et al. bestätigten die antimikrobielle Aktivität von Maulbeerfruchtextrakten gegen durch Wasser übertragene mikrobielle Pathogene (Listeria monocytogene, Salmonella enteric, Moraxella catarrhalis, Legionella pneumophila, Micrococcus luteus, Proteus mirabilis, Clostridium sp., Serratia sp., Aeromonas hydrophila, Corneybacterium sp ., Bacillus subtilis, , E. coli, Bacillus megaterium, Bacillus thuringiensis, Streptococcus pyogenes, Actinomyces sp., Staphylococcus aureus, Vibrio cholera, Salmonella typhi, Bacillus anthracis und Streptococcus pneumonia) isoliert aus verschiedenen Wasserproben. Die Ergebnisse zeigten, dass Maulbeerfruchtextrakte gegen durch Wasser übertragene mikrobielle Krankheitserreger wirksam sind (Shumaila Naz et al., 2018).

SICHERHEITSPROFILE VON MORUS ALBA Die intragastrale Verabreichung von Morus alba-Extrakt an Ratten für die Dauer von 7 Tagen bei einer Höchstdosis von 1 g/kg hatte keine toxischen Wirkungen (Jiao Y et al., 2017). Eine an Ratten durchgeführte Studie, in der die Wirkung von ethanolischen Extrakten von Morus alba bei Ratten in einer Dosis von 250 mg/kg für eine 2-wöchige Verabreichung keine toxischen Wirkungen verursachte (Hwang et al., 2016). Eine weitere Studie wurde an Ratten durchgeführt, die mit Anthocyanen aus Maulbeerfrüchten gefüttert wurden. Die Anthocyane senkten die erhöhten Werte der Aspartat-Aminotransferase (AST) und der Alanin-Aminotransferase ALT bei Ratten. (Hepatoprotektive Wirkungen) BERECHNUNG DER PROBENGRÖSSE Die Probengröße wurde unter Verwendung des Open Epi-Probengrößenrechners unter Berücksichtigung der folgenden Statistiken geschätzt; Änderung des pH-Werts (Chlorhexidin) = 6,88 ± 0,20 (Velmurugan et al., 2013) und unter Berücksichtigung eines pH-Unterschieds von 20 % für Maulbeerextrakte als 8,256 ± 0,24 Teststärke = 90 % Konfidenzniveau = 95 % Die berechnete Stichprobengröße betrug 1 in jeder Gruppe. Ich werde jedoch 120 Patienten mit 40 Patienten in jeder Gruppe gemäß der Normalitätsannahme einbeziehen.

FORSCHUNGSMETHODE Studienaufbau Diese Studie wird an der Abteilung für Zahnmedizin, Zivilkrankenhaus Uthal, Distrikt Lasbella und an der Abteilung für Pflanzenpathologie, Universität für Landwirtschaft, Wasser- und Meereswissenschaften (LUAWMS) Lasbella, Belutschistan, durchgeführt.

Studiendesign Randomisierte kontrollierte klinische Studie Es handelt sich um eine doppelblinde Studie, bei der sowohl der Forscher als auch der Patient verblindet sind, um die Ergebnisse unvoreingenommen zu halten. Der Co-Untersucher weiß jedoch, dass der Patient entweder den Goldstandard oder ein pflanzliches Mundwasser erhält.

Studiendauer Die Studiendauer beträgt 6 Monate bis 1 Jahr nach Genehmigung des Studiums durch RAC, ERC und BASR der Ziauddin University.

Stichprobenverfahren Für die Stichprobenauswahl wird ein nicht wahrscheinlichkeitsbasiertes konsekutives Stichprobenverfahren eingesetzt

Auswahlkriterien Einschlusskriterien Alle Patienten im Alter von 18-40 Jahren mit mindestens 20 Zähnen im Mund und ohne Weisheitszähne.

Die Patienten beiderlei Geschlechts. Patienten mit aktiven und unbehandelten kariösen Läsionen (mindestens ein kariöser Zahn sollte in der Mundhöhle des Patienten vorhanden sein).

Ausschlusskriterien Patienten in kieferorthopädischer Behandlung Patienten, die bereits eine Antibiotikatherapie oder eine antimikrobielle Spülung erhalten. Patienten mit einer Allergie gegen Chlorhexidin-Mundspülung Patienten, deren Zustimmung nicht eingeholt werden konnte MATERIAL UND METHODE IN DER STUDIE VERWENDETE MATERIALIEN Die in der Studie verwendeten Materialien sind Chlorhexidin-Mundspülung, Morus alba-Frucht, pH-Meter, selektiver Agar und Kulturplatten für Streptococcus mutans, Test Röhrchen und Speichelsammelkits.

MORUS ALBA COLLECTION Morus alba (Weiße Maulbeere)-Frucht wird von einem authentischen Kräuterladen bezogen und die Morus alba-Frucht wird von der Botanikabteilung des LUAWMS authentifiziert.

AUFBEREITUNG VON WÄSSERIGEM EXTRAKT AUS MORUS ALBA-FRUCHT Die Aufbereitung erfolgt in der Abteilung Pflanzenpathologie LUAWMS. Morus alba-Früchte werden mit destilliertem Wasser gewaschen und trocknen gelassen. Anschließend wird das Fruchtmaterial (Morus alba) mit Hilfe von Mörser und Pistill zerkleinert. Für eine 20 % wässrige Zubereitung werden 100 ml destilliertes Wasser zu 20 g gemahlenem Pulver gegeben und 8 Stunden lang in einem Schüttelinkubator inkubiert. (Für eine 30 % wässrige Zubereitung werden 100 ml destilliertes Wasser zu 30 g gemahlenem Pulver hinzugefügt). Wässrige Extrakte werden durch Filterpapier Watman Nr. 1 (Schuell und Schleicher 125 mm Kat.-Nr. 1001 125) (Shumaila naz et al., 2018) filtriert.

STANDARDISIERUNG DER TEILNEHMER Die nach Einschlusskriterien ausgewählten Fächer werden standardisiert. Den Teilnehmern wird empfohlen, ihre Zähne zweimal täglich zu putzen (morgens nach dem Frühstück und vor dem Schlafengehen) und Junk Food zu vermeiden. Den Teilnehmern wird empfohlen, zuckerhaltige Getränke (Tee, Kaffee, gesüßte Getränke) nicht öfter als 2 Mal am Tag zu sich zu nehmen. Diese Anweisungen werden den Teilnehmern auch in schriftlicher Form ausgehändigt. Die Teilnehmer werden angewiesen, sich an diese Anleitung zu halten, und werden nach 1 Woche zur Abgabe von Basis-Speichelproben angerufen.

DATENSAMMLUNGSVERFAHREN Insgesamt werden 120 Patienten, die die Einschlusskriterien erfüllen, in die Studie aufgenommen. Von allen Teilnehmern werden Einverständniserklärungen eingeholt. Während der Einverständniserklärung werden die Patienten darüber informiert, dass sie entweder den Goldstandard (Chlorhexidin) oder ein pflanzliches Mundwasser erhalten. Die Auswahl der Patienten entweder in Gruppe A, B oder C erfolgt nach dem Zufallszahlentabellenverfahren. Die Kennzeichnung der Gruppe als A, B und C erfolgt durch den Mitprüfer. Die Gruppenliste wird in einem undurchsichtigen Umschlag versiegelt und nach Abschluss der Studie geöffnet.

STUDIENGRUPPEN Insgesamt werden 120 Teilnehmer in die Studie aufgenommen. Die Teilnehmer werden zu gleichen Teilen in drei Gruppen eingeteilt (Gruppe A, B und C). Die Teilnehmer der Gruppe A erhalten Chlorhexidin-Mundwasser und die Teilnehmer der Gruppen B und C erhalten 20 % bzw. 30 % wässrigen Extrakt aus Morus alba-Früchten.

SPEICHEL-pH-ANALYSE Die Analyse des Speichel-pH-Werts wird mit einem pH-Meter durchgeführt und der Speichel-pH-Wert wird zu Beginn und 15 Tage nach der Verwendung der jeweiligen Mundspülung aufgezeichnet.

EXPERIMENTELLES VERFAHREN Die nicht stimulierten 5-ml-Speichelproben der Basislinie werden den Teilnehmern durch passive Speicheltechnik entnommen, dann werden 3 ml zur Messung des Speichel-pH-Werts verwendet und die verbleibende Speichelprobe wird bei 0 ° C gelagert und dann für die ins Labor überführt Beurteilung von Streptococcus mutans. Nach der Entnahme von Speichelproben zu Studienbeginn werden die Teilnehmer gebeten, 10 ml des jeweiligen Mundwassers zu spülen und für die Dauer von 30 Sekunden im Mund zu behalten, bevor sie es ausspucken. Das Verfahren wird von den Teilnehmern 15 Tage lang zweimal täglich wiederholt. Nach 15 Tagen werden den Teilnehmern erneut Speichelproben zur Bestimmung von Streptococcus mutans entnommen, und die erhaltenen Ergebnisse werden mit den Basislinien-Speichelproben für Streptococcus mutans verglichen.

KULTURVERFAHREN Die Technik zur Bestimmung des mikrobiellen Gehalts ist die Verdünnungs- und Ausbreitungsplattenmethode. Die mikrobielle Speichelanalyse wird durchgeführt, indem jede Speichelprobe im Verhältnis 1:10 in destilliertem Wasser verdünnt wird. Jede Probe wird dann auf eine Platte mit Mitis salivarius-Agarmedien (MSA) ausgestrichen. Die Platten werden dann 48 Stunden lang bei 37 °C inkubiert und die Anzahl der Streptococcus mutans-Kolonien (CFU) wird unter einem selbstleuchtenden binokularen Mikroskop gezählt. Alle Ergebnisse werden in vorgefertigten Formularen festgehalten. (Smariti sexena et al. 2017, Velmurugan et al. 2013, Hongkun Wu et al., 2003) STATISTISCHE ANALYSE Die Daten werden mit SPSS Version 23 analysiert. Für numerische Daten werden Mittelwert und Standardabweichung genommen. Häufigkeit und Prozentsätze werden für kategoriale Daten verwendet.

Der Paired-t-Test wird zum Vergleich zwischen den Werten der Bakterienzahlen und pH-Werte vor und nach der Intervention für jede Gruppe durchgeführt, und die ANOVA mit dem Post-hoc-Tukey-Test wird zum Vergleich zwischen drei Gruppen angewendet. P < 0,05 wird als statistisch signifikant angesehen.

ETHISCHE ÜBERLEGUNG Die ethische Genehmigung wird von der Ethikkommission der Ziauddin-Universität eingeholt. Vor der Aufzeichnung einer Messung wird von jedem Probanden eine informierte Zustimmung eingeholt. Alle aus der Studie gewonnenen Informationen werden streng vertraulich behandelt. Die Anonymität aller Subjekte wird durch sorgfältige Speicherung der Informationen gewahrt. Wenn zahnärztliche Probleme festgestellt werden, werden die Patienten informiert und zur notwendigen Behandlung an die entsprechenden Kliniken überwiesen.

BEDEUTUNG DER STUDIE Wenn die Ergebnisse unserer Studie zeigen, dass Morus alba wirksamer ist, dann steht aus natürlicher Quelle zukünftig ein sicheres, kostengünstiges und umweltfreundliches Mittel zur Vorbeugung von Zahnkaries zur Verfügung. Morus alba könnte auch für Kinder und diejenigen verwendet werden, die synthetische Mundspülungen aufgrund von Reizungen, Geschmacksveränderungen, Brennen und aus kosmetischen Gründen nicht verwenden können.

Morus alba ist wie andere pflanzliche Produkte umweltfreundlich und seine Formulierung als antimikrobielle Mundspülung trägt dazu bei, die toxischen Wirkungen auf die Umwelt zu minimieren, die durch chemisch hergestelltes Chlorhexidin zur Mundspülung entstehen, das derzeit der Goldstandard für zahnmedizinische Träger ist. Die Ergebnisse dieser Studie können Türen für andere Forschungen zu anderen pflanzlichen Produkten öffnen, die traditionell wegen ihres antimikrobiellen Potenzials verwendet werden.