Consorcio multicéntrico de cáncer KM3D: predicción de la respuesta del paciente mediante modelos de cultivo celular en 3D

Este es un estudio clínico no intervencionista en el que (1) tejido canceroso que ha sido resecado, biopsiado o drenado debido a un derrame pleural maligno y que queda después (o no se usa durante) una investigación patológica y, cuando sea posible , (2) se envía un vial de la sangre del mismo paciente a Known Medicine Inc. para su colocación en organoides y posterior medición de la sensibilidad al fármaco tumoral.

Los pacientes recibirán su consentimiento antes de la realización de un procedimiento quirúrgico médicamente indicado y previamente planificado durante el cual se obtenga al menos una pieza de 1 cm3 de tejido tumoral o >100 ml de líquido de derrame pleural y sangre en un vial separado. Estas muestras se enviarán después de retirarlas a Known Medicine Inc. del hospital utilizando un kit proporcionado por Known Medicine. Dentro del kit provisto de Medicamentos Conocidos se proporcionará un formulario de datos, un paquete congelador y recipientes para las muestras.

Si se trata de una muestra de tejido sólido, el tejido se lavará y posteriormente se digerirá en una solución unicelular utilizando métodos de digestión enzimática. Las células se clasificarán en poblaciones de células estromales y cancerosas, se tiñerán con fluorescencia con tinción intramembrana y se colocarán en una matriz de cultivo celular 3D dentro de una placa de pocillos múltiples. Las células también se pueden secuenciar genéticamente.

Si se trata de una muestra de líquido aspirado, las células se separarán del líquido y se clasificarán en poblaciones de células cancerosas.

Se permitirá que los cultivos se mantengan por sí mismos durante 48 horas, momento en el cual se administrará el estándar de atención quimioterapéutica u otros tratamientos farmacológicos aprobados por la FDA. Después de 72 horas, se tomarán imágenes de los pozos de control y tratados usando fluorescencia y se evaluará el fenotipo celular. También se pueden evaluar medios de cultivos. Después de la toma de imágenes, se retirarán los medios y se realizará un ensayo metabólico para determinar la viabilidad del cultivo. Usando los resultados cuantitativos descritos, se determinará la sensibilidad del tumor a cada uno de los tratamientos administrados.

Se hará un seguimiento de los pacientes y se obtendrá información sobre su respuesta al tratamiento y los resultados del hospital, lo que permitirá la validación retrospectiva de la sensibilidad de los organoides tumorales.