Alteración del microambiente inmunitario en el carcinoma de células basales después de la terapia fotodinámica

Cada participante servirá como su propio control, recibiendo TFD para un tumor, sin TFD para el segundo tumor (control no tratado).

Visita 1:

• Consentimiento informado
• Extracción de sangre
• Lesión(es) fotografiada
• (ALA) aplicado durante 4 horas
• PpIX medido en lesiones (acumulación de PpIX monitoreada cada 30 minutos durante un período de 4 h)
• PDT con luz azul

Visita 2 (programada dentro de uno de los siguientes intervalos de tiempo: 1 a 3 días, 4 a 7 días u 8 a 14 días después de la PDT):

• Extracción de sangre
• Lesión(es) fotografiada
• cirugía de Mohs
• Después del procedimiento, el exceso de tejido BCC congelado se guardará para su análisis.

• Levulan

Tiempo (días) hasta la expresión máxima de moléculas de punto de control inmunitario en tumores BCC y estroma peritumoral después de la TFD, en comparación con tumores no tratados.

Datos de especímenes BCC congelados después de la TFD mediante inmunotinción de los especímenes tumorales con anticuerpos contra PD-L1, PD-1, CTLA-4, así como las moléculas IC más nuevas TIGIT, TIM-3 y LAG-3

Expresión alterada de moléculas de punto de control inmunitario en muestras de tumores BCC después de la TFD.

Evaluado mediante la comparación de la expresión de la molécula IC en tumores tratados y no tratados con TFD con inmunotinción en las muestras tumorales con anticuerpos contra PD-L1, PD-1, CTLA-4, así como las moléculas IC más nuevas TIGIT, TIM-3 y LAG-3. (cuantificación con microscopio de inmunofluorescencia)

Determinar la proporción de células T citotóxicas a células T reguladoras en tumores BCC y estroma peritumoral después de PDT, en comparación con tumores no tratados.

Medido con anticuerpos específicos frente a los siguientes marcadores, para determinar el curso temporal cualitativo de la infiltración por cada población de células inmunitarias: neutrófilos (Gr1+ o MPO+); macrófagos (F4/80+); MDSC (CD33, S100A9); células T citotóxicas (CD8+); células T reguladoras (CD4+, FoxP3+, CD25+, CD127-); Células asesinas naturales NK (CD56+CD16+).

Diferencia en las células T CD8 después de la TFD obtenidas de la sangre periférica de los participantes, muestreadas antes y después del tratamiento con TFD de un tumor BCC.

Estos datos se derivan de muestras de sangre de pacientes. Cada paciente tendrá dos extracciones de sangre: en la Visita 1 (antes de la TFD, para establecer una línea de base) y en la Visita 2. Compararemos la proporción de células T CD8 después de la TFD en función de cuándo regrese el participante (dentro de los 3 intervalos de tiempo), y se informará un solo valor (diferencia en células T CD8, medidas antes y después de la PDT) para ese paciente.

Tasa relativa de acumulación de PpIX en tumores evaluada mediante mediciones no invasivas de fluorescencia de PpIX usando un dosímetro.

La PpIX se medirá cada 30 minutos durante las 4 horas de incubación. El propósito es monitorear la cinética de la TFD. Mediremos el nivel de PpIX en cada momento, pero el resultado final a informar es la tasa relativa de cambio en la intensidad de la fluorescencia.

Cambio en el volumen de tumores en la visita de cirugía de Mohs en comparación con la visita de TFD.

Los volúmenes tumorales (mm3) se determinarán a partir del análisis computarizado de fotografías en 3D.