Mikroplastik in Mittelohrentzündung mit Ergussmaterial

Diese Studie wurde prospektiv geplant. Mit ethischer Genehmigung wurden Patienten in die Studie aufgenommen, die mindestens drei Monate lang eine bilaterale OME oder mindestens neun Monate lang eine einseitige OME erhalten hatten. Patienten mit einer kraniofazialen Anomalie, einer Gaumenspalte und einer früheren Ohroperation in der Vorgeschichte wurden ausgeschlossen. Sie wurden als Parazentese und Beatmungsschlaucheinführung (VTI) operiert. Von ihnen und ihren Eltern wurde eine Einverständniserklärung eingeholt.

Operation: Die chirurgische Indikation wurde je nach Krankheitsdauer und/oder Hörverlust gestellt. Die Patienten wurden unter Vollnarkose operiert. Die Parazentese wurde am hinteren unteren Quadranten des Trommelfells durchgeführt. Glu-Material wurde im Saugrohr eingeschlossen und sofort in Glasröhrchen überführt (Abbildung 1). Hierzu wurden eine Glasspritze und 0,9 % physiologisches Serum verwendet. Die Proben wurden getrennt vom rechten und linken Ohr gesendet. Die Bestimmung von Mikroplastik wurde im Labor für Umwelttechnik der Fakultät für Ingenieurwissenschaften durchgeführt.

Methode zur Bestimmung von Mikroplastik: Sie wurde gemäß Prada et. Al-Bericht (11). Fragmente, mit Ausnahme von Blutgerinnseln, wurden mit einem Strahl gefilterten destillierten Wassers in der Laminar-Flow-Haube gewaschen, um jegliche Oberflächenverunreinigungen zu entfernen, und alle Proben wurden in geschlossenen Glaskolben auf 0,1 mg genau gewogen (Sartorius, Entris, Deutschland). Es wurde eine zuvor entwickelte und getestete Methode zur Vorbereitung biologischer Proben für die Nilrot-Färbung befolgt [16]: (i) Inkubation für 24 Stunden bei 60 °C (Oasis™ Benchtop IR CO2 Incubator, Caron, OH, USA) in 30 ml von 10 % KOH (w/v, ≥85 %, Labchem, PA, USA); (ii) Nach 24 Stunden wurde die Temperatur auf den Siedepunkt erhöht und die Lösung sofort über eine Glasfaserfiltermembran (1.2) filtriert µm-Poren, Whatman® GF/C, Little Chalfont, Buckinghamshire, UK), montiert in einem Vakuumglasfiltrationssystem; (iii) 100 ml kochendes, gefiltertes, destilliertes Wasser wurden gefiltert, um Seifen zu entfernen; (iv) 10 ml Aceton wurden 10 Minuten lang in den Becher gegeben; (v) weitere 10 ml Aceton wurden filtriert, um lipophile Stoffe zu entfernen; (vi) 0,5–1 ml 0,01 mg mL-1 Nilrot (Mikroskopiequalität, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) wurden 5 Minuten lang in den Becher gegeben; (vii) 50 ml destilliertes Wasser wurden filtriert; und (viii) in Glas-Petrischalen gelagert, die eine Woche lang in Pappkartons aufbewahrt wurden, um bei Raumtemperatur (20 °C) zu trocknen.

Maßnahmen zur Kontaminationskontrolle In allen Phasen wurden strenge Maßnahmen zur Kontaminationskontrolle durchgeführt, und zwar durch: (i) das Tragen von Laborkitteln aus Baumwolle und sauberen Handschuhen; (ii) Arbeiten in der Laminar-Flow-Haube in einem Reinraum, der durch Reinigen mit Ethanol in Papiertüchern und anschließendes Reinigen mit einem Staubtuch, das Staubpartikel und Papierfasern anzieht und einfängt, aufrechterhalten wird; (iii) Filtern aller Lösungen (1,2 µm Pore, Whatman® GF/C); (iv) Verwendung von Glas- und Metallmaterialien; (v) Dekontamination von Glasmaterialien durch Eintauchen in 10 % HNO3 für mindestens 30 Minuten und Spülen mit destilliertem Wasser; (vi) zusätzliches Reinigen von Petrischalen aus Glas mit einem N2-Luftstrahl; (vii) Brennen von Glas-Mikrofaser-Filtermembranen bei 450 °C für 3 Stunden; (viii) Reinigen des Bechers des Filtersystems zwischen den Proben durch 15-sekündiges Eintauchen in eine Lösung (erste Charge: Aceton, zweite Charge: 30 % HNO3) und anschließendes Eintauchen in destilliertes Wasser; (ix) Probenbehälter so weit wie möglich mit Glasdeckeln, Kappen oder Aluminiumfolie verschlossen halten; und (x) Durchführung von Verfahrensleerproben (Lösungen ohne Proben, die Probenvorbereitungsverfahren ausgesetzt wurden) für jede Charge. Jede Probe wurde zur Verifizierung dreimal getestet. Darüber hinaus wurde Mikroplastik im Serum psychologisch untersucht, um eine Kontamination zu verhindern.