Llenar lagunas clave en la investigación con implicaciones clínicas en mansonelosis y esquistosomiasis: un enfoque en red

Otro: Muestras biológicas

Huevos de microfilarias de M. perstans y de Schistosoma spp, obtenidos a partir de los procedimientos diagnósticos rutinarios realizados a pacientes, concretamente migrantes y viajeros, visitados en los centros participantes en este estudio.

Prueba de diagnóstico: Análisis de biología molecular.

Se procesarán muestras de microfilarias de M. perstans mediante PCR para investigar la presencia (o ausencia) de Wolbachia utilizando un conjunto de cebadores dirigidos a los genes ftsZ y 16S y optimizados utilizando material de referencia durante el primer año del estudio. Se procesarán muestras de huevos de Schistosoma de orina y heces para la extracción de ADN. Cada muestra se caracterizará genéticamente mediante un análisis de múltiples locus de la región cox1 mitocondrial y las regiones nucleares ITS y 18S rRNA. Los productos de PCR se analizarán mediante electroforesis en gel de agarosa y los amplicones seleccionados se purificarán y secuenciarán con Sanger. Para la individuación de híbridos de Schistosoma, el ADN nuclear de cada muestra se confirmará mediante el análisis de las posiciones polimórficas específicas de la especie de ITS1+2 y 18S. Se registrarán los perfiles genéticos del ADN mitocondrial y nuclear de cada muestra individual para determinar las especies implicadas en las infecciones y también los esquistosomas híbridos.

Número de microfilarias de M. perstans

Número de muestras, definidas como las microfilarias completas de M. perstans extraídas de una muestra de sangre de cada paciente, positivas para la presencia de Wolbachia según lo evaluado por PCR.

Porcentaje de microfilarias de M. perstans

Porcentaje de muestras, definidas como las microfilarias completas de M. perstans extraídas de una muestra de sangre de cada paciente, positivas para la presencia de Wolbachia según lo evaluado mediante PCR.

Número de huevos de esquistosoma

Número de muestras definidas como los huevos completos de Schistosoma extraídos de una muestra de heces u orina de cada paciente, positivos para la presencia de especies híbridas de Schistosoma.

Porcentaje de huevos de esquistosoma

Porcentaje de muestras definidas como huevos completos de Schistosoma extraídos de una muestra de heces u orina de cada paciente, positivos para la presencia de especies híbridas de Schistosoma.

Número de muestras positivas para Wolbachia

número de muestras, definidas como todas las microfilarias de M. perstans extraídas de una muestra de sangre de cada paciente, positivas para la presencia de Wolbachia según lo evaluado por PCR, por país de origen del paciente o país de infección más probable.

Porcentaje de muestras positivas para Wolbachia

Porcentaje de muestras, definidas como todas las microfilarias de M. perstans extraídas de una muestra de sangre de cada paciente, positivas para la presencia de Wolbachia según lo evaluado por PCR, por país de origen del paciente o país de infección más probable.

Número de muestras positivas para especies híbridas de Schistosoma

número de muestras definidas como los huevos completos de Schistosoma extraídos de una muestra de heces u orina de cada paciente, positivas para la presencia de especies híbridas de Schistosoma por país de origen del paciente o país de infección más probable.

Porcentaje de muestras positivas para especies híbridas de Schistosoma

porcentaje de muestras definidas como los huevos completos de Schistosoma extraídos de una muestra de heces u orina de cada paciente, positivas para la presencia de especies híbridas de Schistosoma por país de origen del paciente o país de infección más probable.

Identificación de especies híbridas de Schistosoma spp.

Identificación de especies híbridas de cada especie parental de Schistosoma spp.