Aplikace plazmy bohaté na krevní destičky u onemocnění pilonidálního sinusu

Onemocnění pilonidálních dutin je zdravotní problém, který se pokoušely překonat různými léčebnými modalitami od doby, kdy jej poprvé popsal Herbert Mayo v roce 1833. PS je obvykle diagnostikován ve 30 letech a onemocnění má mužskou převahu 70–80 %.

Častými nemocemi po chirurgické léčbě PS jsou bolest, ztráta produktivní pracovní doby a infekce ran v důsledku dlouhé doby hojení. Proto je hlavním cílem léčby urychlení doby hojení snížením bolesti a snížením ztrát produktivní pracovní doby.

Lokální podávání plazmy bohaté na krevní destičky (PRP), která obsahuje růstové faktory (Gfs), je novou metodou, která údajně urychluje proces hojení o 30–40 % [2].

V této studii jsme se zaměřili na zkoumání vlivu PRP na skóre bolesti, proces hojení ran a kvalitu života v procesu léčby onemocnění PS.

METODA

Uspořádání studie Výzkumníci navrhli studii jako prospektivní, kontrolovaně randomizovanou studii. Studie byla zahájena po získání souhlasu a schválení pacienta od Etické komise Lékařské fakulty Ankarské univerzity v Ankaře (č. etické komise: 03-162-18).

Randomizace Pacienti byli náhodně rozděleni do tří skupin. K randomizaci byl použit jednoduchý randomizační diagram. U pacientů ve skupině A byla aplikována otevřená chirurgická metoda a vlhké krytí. U pacientů ve skupině B byla provedena otevřená operace a následně aplikace PRP. U pacientů ve skupině C byla PRP aplikována po kyretáži dutiny.

Lékařská a demografická anamnéza Po zařazení pacientů vyšetřovatelé zaznamenali všechna demografická data, včetně pohlaví, věku, vzdělání, existence komorbidních onemocnění a užívání drog. Poté byly pacientům předány formuláře skóre kvality života Short Form-36 (SF-36) a Nottingham Health Profile (NHP), kteří byli požádáni o vyplnění dotazníků před operací.

Všichni pacienti byli požádáni, aby očistili sacrococcygeální oblast od chloupků pomocí depilačního krému.

Chirurgický postup Výzkumníci navrhli skupinu A jako kontrolní skupinu. V této skupině vstoupil každý pacient na operační sál a po podání celkové anestezie byl pacient uložen do polohy na břiše. Poté byly hýždě nataženy na boční strany pomocí lepicích pásů, aby se odstranila oblast onemocnění. Sacrococcygeální oblast byla vyčištěna a dezinfikována 10% povidon jodem. Po pokrytí oblasti kolem regionu byl sinusový trakt vyšetřen pomocí tenké ocelové hůlky. Byla zaznamenána délka a bohatství dutiny. Poté byl odstraněn sinusový trakt. Byla zaznamenána hloubka dutiny. Poté bylo 50 cm3 0,9% fyziologického roztoku (SS) odebráno do injekční stříkačky a aplikováno do dutiny, dokud nevyplnilo celý prostor, což umožnilo přesné měření objemu dutiny. Měření bylo provedeno odečtením zbývajícího objemu fyziologického roztoku v injekční stříkačce od celého objemu injekční stříkačky, který byl 50 cm3. Po změření objemu dutiny byla dutina překryta vlhkou gázou a operace byla ukončena.

Administrace PRP Skupina B byla navržena jako lokální administrace PRP po excizi. Celé kroky byly aplikovány stejně jako v první skupině až do kroku převazu dutiny. Po změření objemu kavity 0,9% SS byla podána PRP vyplněním celého prostoru z laterální strany kavity. Po první implementaci PRP byla po 48 hodinách aplikována druhá. Do té doby nebyl obvaz odkrytý. PRP byla aplikována 3., 4. a 5. den po operaci.

Minimálně invazivní chirurgie Skupina C byla navržena tak, aby dostávala lokální aplikaci PRP po minimálně invazivní operaci s lokální anestezií. Na operačním sále, po uložení pacienta do polohy na břiše, byla oblast odstraněna protažením hýždí lepicími páskami a vyčištěním oblasti 10% jodovým povidonem. Největší jamka byla vyříznuta a chloupky v dutině byly odstraněny kleštěmi. Poté byla celá dutina pečlivě kyretována a propláchnuta SS. Po hemostáze byl změřen objem dutiny a do dutiny byla aplikována PRP. Po první implementaci jsme stejně jako u druhé skupiny aplikovali PRP 2., 3., 4. a 5. den po operaci.

Příprava PRP Pro klinické aplikace lze pomocí metody PRP vytvořit koncentráty lidských krevních destiček vyhovující GMP. Koncentrát erytrocytů a plazma obsahující destičky se oddělí první centrifugací a plazma chudá na destičky (PPP) a plazma bohatá na destičky (PRP)/koncentrát destiček se vytvoří druhou centrifugací plazmy obsahující destičky [3]. Krevní destičky obsahují koagulační faktory, růstové faktory (PDGF, TGFβ1, IGF1, HGF1, VEGF, FGF2) a interleukiny (IL1, IL4, IL6, IL10, IL13) [4].

Výzkumníci připravili koncentrát krevních destiček metodou PRP v Hacettepe University Blood Center Laboratory s ohledem na všechny standardizované procesy pro zdravé dárce krve. V souladu s „Národními pokyny pro použití a zajištění kvality pro přípravu krve a krevních složek“ by požadavky na PRP měly zahrnovat objem nejméně 40 ml, nejméně 60 x 109/jednotka krevních destiček [5] a maximálně 0,2 x 109/jednotka leukocytů [6]. Po schválení bylo pacientovi ráno v den operace odebráno flebotomií 450 ml krve. V procesu separace kompletní krve na její složky byla použita dvoustupňová metoda centrifugace. V první fázi byla plazma oddělena se suspenzí erytrocytů použitím nízkorychlostní centrifugace Heraeus Cryofuge 6000i s řízenou teplotou (22 °C, 2500 ot./min, 7 minut). Po 1 hodině čekání ve druhém stupni byl PRP/destičkový koncentrát oddělen od PPP pomocí vysokorychlostní centrifugace (22 °C, 3200 ot./min., 15 minut). Koncentrát PRP/trombocytů získaný po druhém kroku odstřeďování byl třepán v míchačce po dobu 1 hodiny, rozdělen na 5 stejných částí pomocí sterilního spojovacího zařízení (obrázek) a poté odeslán do Všeobecného chirurgického oddělení Ankarské univerzity.

Vyšetřovatelé uchovávali PRP při 25 stupních Celsia v míchadlech. Před každým převazem výzkumníci aplikovali alikvoty PRP na ránu tak, že je jeden po druhém odebírali do injektoru.

Pooperační péče Všichni pacienti byli propuštěni první pooperační den. Pacientům ve všech skupinách bylo doporučeno neotevírat ránu po dobu 2 dnů. Kromě toho bylo nutné po koupání a vyprazdňování udržovat operační prostor v čistotě. Pokud pacienti pociťovali bolest, bylo jim doporučeno užívat předepsaný lék proti bolesti maximálně 2krát denně.